| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-42页 |
| ·细菌质粒的基本特征 | 第13-21页 |
| ·质粒的复制方式 | 第13-18页 |
| ·滚环复制及其分类 | 第14-15页 |
| ·θ复制及其分类 | 第15-17页 |
| ·D-环复制 | 第17-18页 |
| ·质粒拷贝数和质粒的不相容性 | 第18-19页 |
| ·质粒拷贝数 | 第18页 |
| ·质粒拷贝数的控制 | 第18-19页 |
| ·质粒的不相容性 | 第19页 |
| ·质粒分离的稳定性 | 第19-21页 |
| ·位点特异性重组系统 | 第19-20页 |
| ·主动分配系统 | 第20页 |
| ·质粒沉溺系统 | 第20-21页 |
| ·苏云金芽胞杆菌质粒的研究进展 | 第21-30页 |
| ·苏云金芽胞杆菌质粒的分类 | 第21-22页 |
| ·苏云金芽胞杆菌质粒的功能 | 第22-24页 |
| ·携带杀虫晶体蛋白基因及其辅助蛋白基因 | 第22-23页 |
| ·携带转座因子 | 第23页 |
| ·接合转移 | 第23-24页 |
| ·其它功能 | 第24页 |
| ·苏云金芽胞杆菌质粒及其复制子的克隆 | 第24-30页 |
| ·苏云金芽胞杆菌滚环复制质粒的克隆与研究 | 第25-26页 |
| ·苏云金芽胞杆菌θ复制质粒的克隆与研究 | 第26-30页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的转座因子 | 第30-41页 |
| ·苏云金芽胞杆菌转座因子的类群和结构 | 第31-39页 |
| ·插入序列 | 第33-37页 |
| ·转座子 | 第37-39页 |
| ·苏云金芽胞杆菌转座因子的转座机理 | 第39-40页 |
| ·苏云金芽胞杆菌转座因子的插入特异性 | 第40-41页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第41-42页 |
| 2 材料与方法 | 第42-51页 |
| ·实验材料 | 第42-46页 |
| ·菌株和质粒 | 第42-45页 |
| ·培养基 | 第45-46页 |
| ·试剂和仪器 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46页 |
| ·仪器 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-48页 |
| ·DNA操作 | 第46-47页 |
| ·苏云金芽胞杆菌质粒的制备 | 第46-47页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第47页 |
| ·质粒 DNA的纯化 | 第47页 |
| ·DNA的体外重组操作 | 第47页 |
| ·重组质粒的转化及转化子的筛选鉴定 | 第47-48页 |
| ·大肠杆菌的常规转化 | 第47-48页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的电转化 | 第48页 |
| ·大肠杆菌转化子的筛选 | 第48页 |
| ·苏云金芽胞杆菌重组菌的筛选 | 第48页 |
| ·苏云金芽胞杆菌质粒稳定性检测 | 第48页 |
| ·PCR扩增 | 第48-49页 |
| ·斑点杂交 | 第49-50页 |
| ·苏云金芽胞杆菌质粒消除突变株的筛选 | 第50页 |
| ·利用逐级升温培养方法消除质粒 | 第50页 |
| ·用 SDS作质粒消除剂消除质粒 | 第50页 |
| ·序列测定和序列分析 | 第50-51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-84页 |
| ·拟步行甲亚种菌株 YBT-1765质粒pBMB165复制子的研究 | 第51-66页 |
| ·包含质粒pBMB165复制子克隆片段DNA序列的测定 | 第51-52页 |
| ·质粒pBMB165最小复制区的初步定位 | 第52-58页 |
| ·重组质粒pBMB6071的衍生质粒构建 | 第53-57页 |
| ·重组质粒复制功能的验证 | 第57页 |
| ·质粒pBMB165复制区的序列分析 | 第57-58页 |
| ·质粒pBMB165复制必需因子的确定 | 第58-65页 |
| ·质粒复制非必需因子ORF5 | 第58-60页 |
| ·质粒复制必需因子rep165和ori165 | 第60-62页 |
| ·质粒复制必需因子iterons | 第62-64页 |
| ·质粒复制非必需因子ORF4 | 第64-65页 |
| ·小结 | 第65页 |
| ·重组质粒的遗传稳定性 | 第65-66页 |
| ·质粒pBMB165中控制质粒稳定性因子的确定 | 第66-72页 |
| ·菌株 YBT-1765质粒文库的筛选及亚克隆 | 第67页 |
| ·控制质粒稳定性因子 ORF6和ORF10 | 第67-72页 |
| ·质粒pBMB165复制区邻近序列的分析 | 第72-74页 |
| ·转座因子 | 第72-73页 |
| ·其它功能基因 | 第73-74页 |
| ·拟步行甲亚种菌株 YBT-1765消除质粒突变株的筛选 | 第74-75页 |
| ·用逐级升温的方法筛选消除质粒突变株 | 第74-75页 |
| ·用 SDS作质粒消除剂筛选消除质粒突变株 | 第75页 |
| ·拟步行甲亚种菌株 YBT-1765最小质粒pBMB175的克隆 | 第75-84页 |
| ·质粒pBMB175的限制性酶切图谱分析 | 第75-76页 |
| ·质粒pBMB175的克隆和序列测定 | 第76页 |
| ·质粒pBMB175的序列分析 | 第76-78页 |
| ·质粒pBMB175复制区的定位 | 第78-82页 |
| ·质粒pBMB175的最小复制区 | 第79-81页 |
| ·质粒pBMB175属于一个新的质粒家族 | 第81-82页 |
| ·质粒pBMB175复制子的分布 | 第82-83页 |
| ·小结 | 第83-84页 |
| 4 讨论 | 第84-87页 |
| ·芽胞杆菌群中pAMβ1家族质粒 | 第84页 |
| ·pAMβ1家族质粒复制区的可塑性 | 第84-85页 |
| ·菌株 YBT-1765质粒的消除及遗传稳定性 | 第85页 |
| ·质粒pBMB175与RCR质粒pGI3的关系 | 第85-86页 |
| ·质粒pBMB175的复制类型 | 第86-87页 |
| 5 总结 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 附录 已发表和待发表论文 | 第99页 |
