| 前言 | 第1-18页 |
| 1. HPV 的基因结构和功能 | 第7-8页 |
| 2. HPV 的致癌机制 | 第8-10页 |
| 3. HPV58 型感染的流行病学特点 | 第10-12页 |
| 4. HPV 预防性疫苗的研究进展 | 第12-18页 |
| 第一章 仪器和材料 | 第18-20页 |
| 第二章 方法 | 第20-31页 |
| 1. 病理组织DNA 的提取 | 第20页 |
| 2. PCR 扩增HPV58 L1 基因片段 | 第20-22页 |
| ·引物设计与合成 | 第20-21页 |
| ·PCR 扩增L1 基因反应条件 | 第21页 |
| ·PCR 扩增L1 基因反应体系 | 第21-22页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第22页 |
| 3. pGEM-T-L1 重组质粒的构建 | 第22-23页 |
| ·连接反应 | 第22页 |
| ·大肠杆菌JM109 感受态的制备(小量制备) | 第22-23页 |
| ·转化大肠肝菌 | 第23页 |
| ·重组质粒小量提取与鉴定 | 第23页 |
| 4. pRSET-B-L1 重组原核表达质粒的构建 | 第23-26页 |
| ·酶切目的基因与载体 | 第23-24页 |
| ·连接反应 | 第24-25页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第25页 |
| ·转化细菌 | 第25页 |
| ·质粒pRSET-B-L1 的小量提取与鉴定 | 第25-26页 |
| 5. 融合蛋白L1 的表达 | 第26页 |
| 6. 表达产物的纯化 | 第26-28页 |
| ·样品纯化前的处理 | 第26-27页 |
| ·L1 蛋白的纯化 | 第27-28页 |
| 7. 表达产物的鉴定 | 第28-31页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第28-29页 |
| ·蛋白印迹(Western blot) | 第29-31页 |
| 第三章 结果 | 第31-38页 |
| 1. HPV58 L1 基因的克隆 | 第31-35页 |
| ·模板DNA 的获得 | 第31-32页 |
| ·HPV58 L1 基因PCR 扩增结果 | 第32页 |
| ·质粒pGEM-T-L1 测序结果 | 第32-34页 |
| ·pRSET B-L1 重组质粒酶切鉴定结果 | 第34-35页 |
| 2. HPV58 L1 基因的表达 | 第35-38页 |
| ·重组表达产物的SDS-PAGE 鉴定结果 | 第35页 |
| ·SDS-PAGE 鉴定表达产物存在形式 | 第35-36页 |
| ·蛋白印迹(Western blot)鉴定结果 | 第36-37页 |
| ·L1 蛋白的纯化 | 第37-38页 |
| 第四章 讨论 | 第38-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 中文摘要 | 第48-50页 |
| ABSTRACT | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 导师简介 | 第56-57页 |
| 作者简历 | 第57页 |