| 英文缩写 | 第1-3页 |
| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 正文 | 第8-79页 |
| 一、引言 | 第8-19页 |
| 1. 异柠檬酸脱氢酶的概况,分类 | 第8-9页 |
| 2. IDH 及其复合物的结构 | 第9-12页 |
| ·细菌来源的 | 第9-12页 |
| ·单体型IDH 的晶体结构 | 第12页 |
| ·真核生物IDH 的结构 | 第12页 |
| 3. IDH 的催化机制 | 第12-14页 |
| 4. 原核生物IDH 催化活性的调节方式 | 第14-16页 |
| ·磷酸化调节的结构基础 | 第14页 |
| ·IDH 激酶 | 第14-15页 |
| ·IDH 的磷酸化过程 | 第15页 |
| ·对磷酸化过程的调节 | 第15-16页 |
| 5. 真核生物IDH 的调节方式 | 第16-17页 |
| 6. 真核生物NADP-IDH 的生物学功能 | 第17-19页 |
| 二、材料和方法 | 第19-28页 |
| 1. 材料和试剂 | 第19-21页 |
| ·常用试剂和材料 | 第19页 |
| ·菌株 | 第19-20页 |
| ·酶,试剂盒 | 第20页 |
| ·仪器 | 第20-21页 |
| 2. 方法 | 第21-28页 |
| ·HcIDH 基因的克隆,表达载体的构建 | 第21页 |
| ·HcIDH 的表达和纯化 | 第21-23页 |
| ·溶液中蛋白质分子尺寸,和聚集状态分析 | 第23页 |
| ·蛋白质的鉴定及分子量测定 | 第23页 |
| ·蛋白质浓度测定方法 | 第23页 |
| ·晶体生长--悬滴气相扩散法 | 第23-24页 |
| ·X-射线晶体衍射和数据收集 | 第24-25页 |
| ·HcIDH 复合物的晶体结构测定 | 第25-26页 |
| ·HcIDH 野生型酶活力的测定 | 第26-28页 |
| 三、结果 | 第28-51页 |
| 1. HcIDH 野生型的表达和纯化 | 第28页 |
| 2. HcIDH 各种复合物的晶体生长及结构解析 | 第28-31页 |
| ·HcIDH-NADP 复合物(binary comple | 第28-31页 |
| ·HcIDH-NADP-isocitrate-Ca~(2+)复合物(quaternary complex) | 第31页 |
| 3. HcIDH 的整体结构 | 第31-40页 |
| ·结构域的划分 | 第35页 |
| ·功能口袋 | 第35-40页 |
| ·钩扣结构域 | 第40页 |
| 4. HcIDH 二聚体的形成 | 第40-41页 |
| 5. 底物和金属离子的结合位点及方式 | 第41-45页 |
| ·底物的结合位点 | 第41页 |
| ·金属离子的结合位点 | 第41-45页 |
| 6. 辅酶的结合位点 | 第45-47页 |
| ·binary complex 中的辅酶结 | 第45-47页 |
| ·quaternary complex 中的辅酶结 | 第47页 |
| 7. 不同结构中的构象差异 | 第47-51页 |
| 四、讨论 | 第51-67页 |
| 1. 辅酶的特异性识别 | 第51-52页 |
| 2. Arg~(314)的功能分析 | 第52-53页 |
| 3. 不同的构象可能代表生物学相关的酶的不同状态 | 第53-55页 |
| 4. HcIDH 的催化机制 | 第55-62页 |
| 5. HcIDH 的自身调节机制 | 第62-65页 |
| 6. 自身调节的生物学意义 | 第65-67页 |
| 五、结论 | 第67-68页 |
| 六、参考文献 | 第68-79页 |
| 附录 | 第79-81页 |
| 发表文章目录 | 第81-82页 |
| 获奖 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
