| 第一章 文献综述 | 第1-22页 |
| ·微管骨架 | 第10-12页 |
| ·微管的基本结构 | 第10页 |
| ·微管蛋白 | 第10-12页 |
| ·植物微管 | 第12-14页 |
| ·植物细胞中微管生长的动态特征 | 第12-13页 |
| ·植物细胞的微管列阵 | 第13-14页 |
| ·植物微管结合蛋白 | 第14-20页 |
| ·MOR1(Microtubule Organization1)和TMBP200 | 第16页 |
| ·剑蛋白(Katanin) | 第16-17页 |
| ·SPR1(SPIRAL1) | 第17页 |
| ·EB1(End Binding1) | 第17-18页 |
| ·MAP65家族 | 第18-19页 |
| ·磷脂酶D(PLD)和胁迫诱导的脂类信号 | 第19-20页 |
| ·植物中微管骨架与细胞形态 | 第20-22页 |
| 第二章 拟南芥AtMAP18体外结合微管 | 第22-32页 |
| ·引言 | 第22页 |
| ·材料与方法 | 第22-26页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·原核表达菌株的转化与筛选 | 第23页 |
| ·AtMAP18诱导表达与纯化 | 第23-24页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印记 | 第24页 |
| ·猪脑微管蛋白的纯化及荧光标记 | 第24-25页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第25页 |
| ·蛋白质纯度鉴定 | 第25页 |
| ·共沉淀实验 | 第25页 |
| ·AtMAP18的荧光标记 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-31页 |
| ·AtMAP18基因的克隆和原核表达载体的构建 | 第26页 |
| ·pGEX-4T-AtMAP18原核表达载体的鉴定 | 第26-27页 |
| ·AtMAP18的核苷酸测定及氨基酸序列分析 | 第27页 |
| ·AtMAP18蛋白的纯化 | 第27-28页 |
| ·猪脑微管蛋白的纯化 | 第28-29页 |
| ·AtMAP18体外结合微管 | 第29-30页 |
| ·Alexa Fluor~R 488标记的AtMAP18结合微管的荧光观察 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| 第三章 AtMAP18对微管聚合的影响 | 第32-39页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·材料与方法 | 第32-33页 |
| ·浊度法 | 第32页 |
| ·荧光镜观察AtMAP18对微管聚合的影响 | 第32-33页 |
| ·EDC交联 | 第33页 |
| ·超薄切片 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-38页 |
| ·AtMAP18对微管聚合的影响 | 第33-34页 |
| ·AtMAP18影响微管聚合的荧光观察 | 第34-35页 |
| ·AtMAP18不结合微管蛋白单体 | 第35-36页 |
| ·荧光镜观察AtMAP18对微管成束的影响 | 第36-37页 |
| ·电镜观察AtMAP18抑制微管聚合 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| 第四章 AtMAP18的组织定位和亚细胞定位 | 第39-54页 |
| ·引言 | 第39页 |
| ·材料与方法 | 第39-43页 |
| ·AtMAP18抗体制备及纯化 | 第39-40页 |
| ·拟南芥不同组织的免疫印记 | 第40页 |
| ·拟南芥根的免疫荧光观察 | 第40-41页 |
| ·AtMAP18启动子活性的组织特异性 | 第41-43页 |
| ·pCAMBIA1300-RFP-AtMAP18转化野生型(Columbia ecotype)和GFP-α-tubulin拟南芥 | 第43页 |
| ·结果分析 | 第43-52页 |
| ·AtMAP18抗体纯化和效价检测 | 第43-44页 |
| ·抗体分析AtMAP18在拟南芥的表达 | 第44页 |
| ·AtMAP18启动子活性的组织特异性 | 第44-48页 |
| ·AtMAP18的亚细胞定位 | 第48-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第五章 AtMAP18基因过表达和抑制植株的表型观察 | 第54-70页 |
| ·引言 | 第54页 |
| ·材料与方法 | 第54-56页 |
| ·实验材料 | 第54页 |
| ·RT-PCR检测AtMAP18基因过表达株系和抑制株系 | 第54-55页 |
| ·Western blotting检测AtMAP18基因过表达株系和抑制株系 | 第55页 |
| ·AtMAP18基因过表达株系和抑制株系纯合体的筛选 | 第55页 |
| ·Spurr's树脂半薄切片 | 第55-56页 |
| ·扫描电镜观察 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-69页 |
| ·转AtMAP18基因过表达和抑制纯合体的筛选 | 第56-58页 |
| ·AtMAP18过表达和抑制的RT-PCR和Western blot鉴定 | 第58页 |
| ·AtMAP18基因过表达和抑制株系的花粉观察 | 第58-60页 |
| ·AtMAP18基因过表达和抑制株系根的观察 | 第60-61页 |
| ·AtMAP18基因过表和抑制株系叶的观察 | 第61-62页 |
| ·AtMAP18基因过表达和抑制子叶的观察 | 第62-65页 |
| ·AtMAP18基因过表达下胚轴的观察 | 第65-67页 |
| ·AtMAP18基因过表达表皮毛的观察 | 第67-69页 |
| ·讨论 | 第69-70页 |
| 第六章 AtMAP18通过调控周质微管列阵参与细胞形态建成 | 第70-80页 |
| ·引言 | 第70页 |
| ·材料与方法 | 第70-72页 |
| ·实验材料 | 第70-71页 |
| ·野生型和AtMAP18过表达根的免疫荧光 | 第71页 |
| ·AtMAP18过表达植株与GFP-Tubulin拟南芥植株杂交 | 第71页 |
| ·Taxol处理GFP-Tubulin和AtMAP18过表达拟南芥 | 第71页 |
| ·Orzalin处GFP-Tubulin和AtMAP18过表达拟南芥 | 第71-72页 |
| ·结果与分析 | 第72-78页 |
| ·AtMAP18过表达植株根的微管观察 | 第72-73页 |
| ·AtMAP18过表达植株子叶和下胚轴的表皮细胞微管观察 | 第73-74页 |
| ·Taxol处理后野生型和AtMAP18过表达子叶铺板细胞微管观察 | 第74-76页 |
| ·Taxol处理后野生型和过表达下胚轴表皮细胞微管观察 | 第76-77页 |
| ·Orzalin处理后野生型和过表达微管观察 | 第77-78页 |
| ·讨论 | 第78-80页 |
| 第七章 结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
