| 摘要 | 第1-9页 |
| abstract | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-21页 |
| ·托品烷生物碱概况 | 第12-16页 |
| ·莨菪烷生物碱的合成途径 | 第14-16页 |
| ·莨菪烷类生物碱代谢工程研究进展 | 第16页 |
| ·莨菪碱6 β- 羟化酶（H6H） | 第16-17页 |
| ·三分三植物性状概述 | 第17-19页 |
| ·课题研究目的及意义 | 第19-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-31页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·载体和菌种 | 第21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·试剂及药品 | 第22页 |
| ·常用试剂 | 第22-23页 |
| ·主要常规试剂及方法 | 第23-31页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第23-25页 |
| ·AaH6H在E.coli中的表达 | 第25-26页 |
| ·His-AaH6H在E.coli中的表达 | 第25-26页 |
| ·GST-AaH6H在E.coli 中的表达 | 第26页 |
| ·AaH6H 蛋白的纯化 | 第26-27页 |
| ·His-AaH6H 蛋白的纯化 | 第26-27页 |
| ·GST-AaH6H 蛋白的纯化 | 第27页 |
| ·重组蛋白的Western Blot分析 | 第27-28页 |
| ·His-AaH6H蛋白的Western Blot分析 | 第27-28页 |
| ·GST-AaH6H蛋白的Western Blot分析 | 第28页 |
| ·重组菌株对莨菪碱的转化 | 第28-29页 |
| ·包含pET30a-AaH6H质粒的重组菌株对莨菪碱的生物转化 | 第28-29页 |
| ·包含pGEX4T-1-AaH6H质粒的重组菌株对莨菪碱的生物转化 | 第29页 |
| ·托品烷莨菪碱的GC分析 | 第29-30页 |
| ·托品烷莨菪碱标准品的GC分析 | 第29-30页 |
| ·诱导后培养基中托品烷莨菪碱的GC分析 | 第30页 |
| ·诱导后培养基托品烷莨菪碱的MS分析 | 第30-31页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第31-45页 |
| ·AaH6H在E.coli中的表达纯化及性质研究 | 第31-45页 |
| ·表达载体的构建 | 第31-33页 |
| ·AaH6H在E.coli中的表达 | 第33-35页 |
| ·His-AaH6H在E.coli中的表达 | 第33-34页 |
| ·GST-AaH6H在E.coli中的表达 | 第34-35页 |
| ·AaH6H 蛋白的纯化 | 第35-37页 |
| ·His-AaH6H的蛋白纯化 | 第35-36页 |
| ·GST-AaH6H 的蛋白纯化 | 第36-37页 |
| ·重组表达AaH6H 蛋白的 Western Blot分析 | 第37-39页 |
| ·His-AaH6H的Western Blot分析 | 第37-38页 |
| ·GST-AaH6H的Western Blot分析 | 第38-39页 |
| ·AaH6H 的性质分析 | 第39-45页 |
| ·莨菪碱、山莨菪碱和东莨菪碱标准品的GC 图谱 | 第39-40页 |
| ·重组细胞转化产物的鉴定 | 第40-42页 |
| ·重组细胞转化后产物的质谱分析 | 第42-43页 |
| ·重组大肠杆菌对莨菪碱的转化效率分析 | 第43-45页 |
| 第四章 总结与展望 | 第45-47页 |
| ·研究结论 | 第45-46页 |
| ·后续研究方向 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 硕士期间发表的论文及成果 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
