摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
符号说明 | 第9-10页 |
第一部分 前言 | 第10-26页 |
1 提高转基因植物安全性的策略和研究进展 | 第10-20页 |
1.1 不使用选择标记基因 | 第11页 |
1.2 使用安全选择标记基因 | 第11-13页 |
1.3 报告基因 | 第13页 |
1.4 选择标记基因的组织特异性表达 | 第13页 |
1.5 选择标记基因的失活 | 第13-14页 |
1.6 选择标记基因的删除 | 第14-19页 |
1.7 FLP/frt位点特异性重组系统的研究进展 | 第19-20页 |
2 高等植物启动子及其在植物基因工程中的应用 | 第20-25页 |
2.1 组成型启动子 | 第20-21页 |
2.2 组织或器官特异性启动子 | 第21页 |
2.3 诱导型启动子 | 第21-24页 |
2.4 双向表达启动子 | 第24-25页 |
3 本工作的目的和意义 | 第25-26页 |
第二部分 材料与方法 | 第26-42页 |
1 植物表达载体的构建 | 第26-35页 |
1.1 材料 | 第26-27页 |
1.2 质粒的重组和转化 | 第27-30页 |
1.3 重组酶FLP基因的克隆 | 第30-34页 |
1.4 大豆热诱导蛋白启动子的克隆 | 第34-35页 |
2 农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第35-39页 |
2.1 材料和培养基 | 第35-36页 |
2.2 重组质粒转入农杆菌 | 第36页 |
2.3 农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第36-37页 |
2.4 转基因烟草植株的分子检测 | 第37-39页 |
3 热诱导启动子的功能鉴定 | 第39-42页 |
3.1 试剂 | 第39-40页 |
3.2 转基因烟草叶盘的热诱导过程 | 第40页 |
3.3 GUS活性的组织化学染色 | 第40页 |
3.4 烟草叶盘蛋白含量测定 | 第40页 |
3.5 GUS活性的荧光定星分析 | 第40-42页 |
第三部分 结果和讨论 | 第42-74页 |
1 植物FLP/frt位点特异性重组系统的构建 | 第42-56页 |
1.1 含有FLP重组酶基因的植物表达载体的构建 | 第42-47页 |
1.2 含有方位点的植物表达载体的构建 | 第47-56页 |
2 利用FLP/frt定点重组系统删除转基因烟草中的选择标记基因 | 第56-64页 |
2.1 利用FLP重组酶基因表达载体转化含有frt位点的烟草去除选择标记基因 | 第56-61页 |
2.2 利用含有frt位点的植物表达载体转化含有重组酶FLP基因的烟草去除选择标记基因 | 第61页 |
2.3 利用共转化方法获得去除选择标记基因的转基因植株 | 第61-64页 |
3 大豆热诱导蛋白启动子的克隆和功能鉴定 | 第64-74页 |
3.1 大豆热诱导蛋白启动子的克隆 | 第64-66页 |
3.2 含有35S-gus、hsp-gus的植物表达载体的构建 | 第66-68页 |
3.3 热诱导启动子的功能鉴定 | 第68-74页 |
第四部分 结束语 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第87-88页 |
附件二:学位论文评阅及答辩情况表 | 第88页 |