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FLP/frt重组系统的构建和在转基因烟草中的应用

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
符号说明第9-10页
第一部分 前言第10-26页
 1 提高转基因植物安全性的策略和研究进展第10-20页
  1.1 不使用选择标记基因第11页
  1.2 使用安全选择标记基因第11-13页
  1.3 报告基因第13页
  1.4 选择标记基因的组织特异性表达第13页
  1.5 选择标记基因的失活第13-14页
  1.6 选择标记基因的删除第14-19页
  1.7 FLP/frt位点特异性重组系统的研究进展第19-20页
 2 高等植物启动子及其在植物基因工程中的应用第20-25页
  2.1 组成型启动子第20-21页
  2.2 组织或器官特异性启动子第21页
  2.3 诱导型启动子第21-24页
  2.4 双向表达启动子第24-25页
 3 本工作的目的和意义第25-26页
第二部分 材料与方法第26-42页
 1 植物表达载体的构建第26-35页
  1.1 材料第26-27页
  1.2 质粒的重组和转化第27-30页
  1.3 重组酶FLP基因的克隆第30-34页
  1.4 大豆热诱导蛋白启动子的克隆第34-35页
 2 农杆菌介导的烟草遗传转化第35-39页
  2.1 材料和培养基第35-36页
  2.2 重组质粒转入农杆菌第36页
  2.3 农杆菌介导的烟草遗传转化第36-37页
  2.4 转基因烟草植株的分子检测第37-39页
 3 热诱导启动子的功能鉴定第39-42页
  3.1 试剂第39-40页
  3.2 转基因烟草叶盘的热诱导过程第40页
  3.3 GUS活性的组织化学染色第40页
  3.4 烟草叶盘蛋白含量测定第40页
  3.5 GUS活性的荧光定星分析第40-42页
第三部分 结果和讨论第42-74页
 1 植物FLP/frt位点特异性重组系统的构建第42-56页
  1.1 含有FLP重组酶基因的植物表达载体的构建第42-47页
  1.2 含有方位点的植物表达载体的构建第47-56页
 2 利用FLP/frt定点重组系统删除转基因烟草中的选择标记基因第56-64页
  2.1 利用FLP重组酶基因表达载体转化含有frt位点的烟草去除选择标记基因第56-61页
  2.2 利用含有frt位点的植物表达载体转化含有重组酶FLP基因的烟草去除选择标记基因第61页
  2.3 利用共转化方法获得去除选择标记基因的转基因植株第61-64页
 3 大豆热诱导蛋白启动子的克隆和功能鉴定第64-74页
  3.1 大豆热诱导蛋白启动子的克隆第64-66页
  3.2 含有35S-gus、hsp-gus的植物表达载体的构建第66-68页
  3.3 热诱导启动子的功能鉴定第68-74页
第四部分 结束语第74-75页
参考文献第75-86页
致谢第86-87页
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录第87-88页
附件二:学位论文评阅及答辩情况表第88页

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