| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-40页 |
| 1 双生病毒的发生与危害 | 第13-14页 |
| 2 双生病毒的分类与基因组结构 | 第14-17页 |
| 2．1 玉米线条病毒属(Mastrevirus) | 第14页 |
| 2．2 甜菜曲顶病毒属(Curtovirus) | 第14-15页 |
| 2．3 番茄伪曲顶病毒属(Topocuvirus) | 第15-16页 |
| 2．4 菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus) | 第16-17页 |
| 3 双生病毒的侵染 | 第17-27页 |
| 3．1 双生病毒的复制 | 第17-21页 |
| 3．1．1 双生病毒复制所需的细胞环境——寄主细胞周期的激活 | 第18-19页 |
| 3．1．2 双生病毒复制相关的结构域 | 第19-20页 |
| 3．1．3 双生病毒的滚环复制 | 第20-21页 |
| 3．2 双生病毒的转录 | 第21-23页 |
| 3．3 双生病毒的移动 | 第23-26页 |
| 3．3．1 双组份双生病毒的移动 | 第23-24页 |
| 3．3．2 单组份双生病毒的移动 | 第24-26页 |
| 3．4 双生病毒的介体传毒 | 第26-27页 |
| 4 双生病毒的致病因子 | 第27-28页 |
| 5 双生病毒基因组的变异 | 第28-31页 |
| 5．1 突变 | 第28页 |
| 5．2 缺失和获取外源DNA | 第28-29页 |
| 5．3 假重组 | 第29-30页 |
| 5．4 重组 | 第30-31页 |
| 5．4．1 属间重组 | 第30页 |
| 5．4．2 属内重组 | 第30-31页 |
| 6 双生病毒伴随的小分子DNA | 第31-34页 |
| 6．1 DNA1分子 | 第31-32页 |
| 6．2 DNAβ分子 | 第32-34页 |
| 6．3 双生病毒与小分子DNA形成病害复合体 | 第34页 |
| 7 杂草上双生病毒研究进展 | 第34-39页 |
| 7．1 杂草上双生病毒的研究意义 | 第34-35页 |
| 7．2 杂草上双生病毒的发生状况 | 第35-37页 |
| 7．3 杂草上双生病毒的检测方法 | 第37-39页 |
| 8 立题意义 | 第39-40页 |
| 第二章 材料与方法 | 第40-49页 |
| 1 材料 | 第40页 |
| 1．1 病毒 | 第40页 |
| 1．2 植物材料 | 第40页 |
| 1．3 菌株和质粒 | 第40页 |
| 1．4 试剂与仪器 | 第40页 |
| 1．5 常用缓冲液的配制 | 第40页 |
| 2 方法 | 第40-49页 |
| 2．1 植物总DNA提取 | 第40-41页 |
| 2．2 PCR技术 | 第41页 |
| 2．2．1 反应体系 | 第41页 |
| 2．2．2 反应参数 | 第41页 |
| 2．3 PCR产物纯化 | 第41-42页 |
| 2．4 DNA克隆技术 | 第42-43页 |
| 2．4．1 载体的去磷酸化 | 第42页 |
| 2．4．2 连接 | 第42页 |
| 2．4．3 感受态细胞制备方法 | 第42-43页 |
| 2．4．4 转化 | 第43页 |
| 2．5 重组质粒的提取与鉴定 | 第43-45页 |
| 2．5．1 碱裂解法 | 第43-44页 |
| 2．5．2 质粒微量提取试剂盒 | 第44-45页 |
| 2．5．3 PCR鉴定 | 第45页 |
| 2．5．4 酶切鉴定 | 第45页 |
| 2．6 Southern blot分析 | 第45-47页 |
| 2．6．1 转膜 | 第45页 |
| 2．6．2 探针标记 | 第45-46页 |
| 2．6．3 杂交和洗膜 | 第46页 |
| 2．6．4 免疫显色 | 第46-47页 |
| 2．7 侵染性克隆的转化 | 第47页 |
| 2．7．1 三亲交配法 | 第47页 |
| 2．7．2 电击法 | 第47页 |
| 2．8 农杆菌接种 | 第47-49页 |
| 第三章 云南杂草上双生病毒的PCR快速检测 | 第49-54页 |
| 1 材料与方法 | 第49页 |
| 1．1 病毒 | 第49页 |
| 1．2 植物总DNA提取 | 第49页 |
| 1．3 PCR扩增、克隆及序列测定 | 第49页 |
| 1．4 序列分析 | 第49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-51页 |
| 3 讨论 | 第51-54页 |
| 第四章 侵染赛葵的双生病毒的分子鉴定 | 第54-88页 |
| 第一节 云南赛葵黄脉病毒及其卫星DNA的基因组结构 | 第54-64页 |
| 1 材料与方法 | 第54-55页 |
| 1．1 病毒 | 第54页 |
| 1．2 植物总 DNA提取 | 第54页 |
| 1．3 PCR扩增、克隆和测序 | 第54页 |
| 1．4 序列分析 | 第54-55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-62页 |
| 2．1 病毒基因组 DNA-A结构 | 第55页 |
| 2．2 Y160 DNA-A与其它双生病毒的比较及分子进化分析 | 第55-60页 |
| 2．3 病毒基因组 DNAβ结构 | 第60-61页 |
| 2．4 Y160 DNAβ与其它双生病毒DNAβ的比较及其分子进化分析 | 第61-62页 |
| 3 讨论 | 第62-64页 |
| 第二节 云南赛葵黄脉病毒及其卫星DNA的致病性研究 | 第64-74页 |
| 1 材料与方法 | 第64-68页 |
| 1．1 MYVYNV-Y160 DNA-A侵染性克隆的构建 | 第64-65页 |
| 1．2 MYVYNV-Y160 DNAβ侵染性克隆的构建 | 第65页 |
| 1．3 MYVYNV-Y160 DNA-A和DNAβ在同一植物表达载体上的构建 | 第65页 |
| 1．4 侵染性克隆的转化 | 第65-68页 |
| 1．5 农杆菌接种 | 第68页 |
| 1．6 病毒DNA的PCR鉴定 | 第68页 |
| 1．7 病毒DNA的Southern印迹检测 | 第68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-71页 |
| 2．1 MYVYNV-Y160 DNA-A和DNAβ的致病性测定 | 第68-69页 |
| 2．2 MYVYNV-Y160寄主范围的测定 | 第69-70页 |
| 2．3 病毒DNA的Southern印迹检测分析 | 第70-71页 |
| 3 讨论 | 第71-74页 |
| 第三节 赛葵黄脉病毒卫星DNA的基因组结构及变异 | 第74-79页 |
| 1 材料与方法 | 第74页 |
| 1．1 病毒 | 第74页 |
| 1．2 植物总DNA提取 | 第74页 |
| 1．3 PCR扩增、克隆和测序 | 第74页 |
| 1．4 序列分析 | 第74页 |
| 2 结果与分析 | 第74-78页 |
| 2．1 DNAβ分子的结构特征及变异 | 第74-75页 |
| 2．2 DNAβ核苷酸序列及分子进化分析 | 第75-78页 |
| 3 讨论 | 第78-79页 |
| 第四节 赛葵上双生病毒复合侵染的测定 | 第79-88页 |
| 1 赛葵是中国番茄黄化曲叶病毒的寄主 | 第79-83页 |
| 1．1 材料与方法 | 第79页 |
| 1．1．1 病毒 | 第79页 |
| 1．1．2 植物总 DNA提取 | 第79页 |
| 1．1．3 PCR扩增、克隆和测序 | 第79页 |
| 1．2 结果与分析 | 第79-82页 |
| 1．2．1 DNA-A复合侵染检测 | 第79-80页 |
| 1．2．2 DNAβ复合侵染检测 | 第80-82页 |
| 1．3 讨论 | 第82-83页 |
| 2 侵染赛葵的中国番茄黄化曲叶病毒的基因组结构 | 第83-88页 |
| 2．1 材料与方法 | 第83-84页 |
| 2．1．1 病毒 | 第83页 |
| 2．1．2 植物总 DNA提取 | 第83页 |
| 2．1．3 PCR扩增、克隆和测序 | 第83-84页 |
| 2．1．4 序列分析 | 第84页 |
| 2．2 结果与讨论 | 第84-88页 |
| 2．2．1 病毒基因组DNA-A结构 | 第84-85页 |
| 2．2．2 Y193、Y194 DNA-A与其它双生病毒的比较及分子进化分析 | 第85-86页 |
| 2．2．3 Y193、Y194是重组形成的TYLCCNV分离物 | 第86-88页 |
| 第五章 侵染胜红蓟的双生病毒的分子鉴定 | 第88-99页 |
| 1 材料与方法 | 第88-89页 |
| 1．1 病毒 | 第88页 |
| 1．2 植物总DNA提取 | 第88页 |
| 1．3 PCR扩增、克隆和测序 | 第88页 |
| 1．4 序列分析 | 第88-89页 |
| 2 结果与分析 | 第89-97页 |
| 2．1 Y206 DNA-A和DNAβ基因组结构及分子进化分析4 | 第89-94页 |
| 2．2 Y282 DNA-A基因组结构及分子进化分析 | 第94-95页 |
| 2．3 Y283 DNA-A基因组结构及分子进化分析 | 第95-97页 |
| 3 讨论 | 第97-99页 |
| 第六章 稀硷上与中国番茄黄化曲叶病毒伴随的卫星 DNA的基因组结构 | 第99-103页 |
| 1 材料与方法 | 第99页 |
| 1．1 病毒 | 第99页 |
| 1．2 植物总 DNA提取 | 第99页 |
| 1．3 PCR扩增、克隆和测序 | 第99页 |
| 1．4 序列分析 | 第99页 |
| 2 结果与讨论 | 第99-103页 |
| 2．1 病毒基因组 DNAβ结构 | 第99-100页 |
| 2．2 从稀硷中分离的6个 DNAβ与其它双生病毒DNAβ的比较 | 第100页 |
| 2．3 与TYLCCNV伴随的DNAβ分子的进化分析 | 第100-103页 |
| 全文小结 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-115页 |
| 附录A: 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第115-116页 |
| 附录B: 常用缓冲液及培养基配方 | 第116-119页 |
| 附录C: EMBL登陆基因 | 第119-122页 |
| 附录D: 博士研究生期间发表及投稿中的学术论文 | 第122页 |
