| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 主要符号表 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-18页 |
| 材料与方法 | 第18-34页 |
| 1.1 主要材料和仪器设备 | 第18-20页 |
| 1.2 细胞株培养 | 第20-21页 |
| 1.2.1 细胞复苏 | 第20页 |
| 1.2.2 细胞冻存 | 第20页 |
| 1.2.3 细胞计数 | 第20-21页 |
| 1.2.4 细胞换液及传代 | 第21页 |
| 1.2.5 收集细胞 | 第21页 |
| 1.3 建立急性早幼粒细胞白血病细胞诱导分化模型 | 第21-23页 |
| 1.3.1 CCK-8 法进行细胞增殖抑制试验 | 第21-22页 |
| 1.3.2 细胞形态学观察 | 第22页 |
| 1.3.3 流式细胞术检测细胞表面标志表达 | 第22-23页 |
| 1.3.4 建立细胞模型 | 第23页 |
| 1.4 RT-PCR及q-PCR检测细胞中目的基因的表达 | 第23-25页 |
| 1.4.1 Trizol法提取细胞总RNA | 第23页 |
| 1.4.2 逆转录反应合成cDNA | 第23-24页 |
| 1.4.3 PCR聚合酶链式反应 | 第24页 |
| 1.4.4 电泳检测扩增产物 | 第24-25页 |
| 1.4.5 q-PCR检测细胞mRNA表达水平 | 第25页 |
| 1.5 Western blotting实验 | 第25-28页 |
| 1.5.1 样品蛋白制备 | 第25-26页 |
| 1.5.2 配胶 | 第26-27页 |
| 1.5.3 电泳 | 第27页 |
| 1.5.4 转膜 | 第27-28页 |
| 1.5.5 显影 | 第28页 |
| 1.6 构建载体 | 第28-33页 |
| 1.6.1 目的基因的获取 | 第28-29页 |
| 1.6.2 酶切质粒 | 第29-30页 |
| 1.6.3 连接 | 第30页 |
| 1.6.4 转化 | 第30页 |
| 1.6.5 挑克隆 | 第30页 |
| 1.6.6 提质粒 | 第30-31页 |
| 1.6.7 酶切鉴定 | 第31-32页 |
| 1.6.8 转染试剂转染 | 第32页 |
| 1.6.9 电穿孔转染 | 第32-33页 |
| 1.7 免疫共沉淀实验(CO-IP) | 第33页 |
| 1.8 统计方法 | 第33-34页 |
| 实验结果 | 第34-44页 |
| 2.1 CCK8实验显示ATRA对HL-60 细胞及NB4细胞增殖的影响 | 第34-35页 |
| 2.2 ATRA作用前后细胞形态学的变化 | 第35-36页 |
| 2.3 ATRA作用前后细胞表面分子标志的改变 | 第36-37页 |
| 2.4 多种细胞中TRIM22及eIF4E的mRNA表达水平 | 第37页 |
| 2.5 ATRA作用前后细胞中TRIM22、eIF4E在mRNA表达水平的变化 | 第37-39页 |
| 2.6 ATRA作用前后细胞中TRIM22和eIF4E蛋白表达水平变化 | 第39页 |
| 2.7 转染条件的筛选 | 第39-40页 |
| 2.8 过表达TRIM22后对NB4细胞增殖的影响 | 第40-41页 |
| 2.9 过表达或干扰TRIM22对NB4细胞分化的影响 | 第41-42页 |
| 2.10 干预TRIM22后对eIF4E蛋白表达水平的影响 | 第42-43页 |
| 2.11 CO-IP验证两者关系 | 第43-44页 |
| 讨论 | 第44-48页 |
| 结论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
