| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 缩写词表 | 第15-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-47页 |
| ·植物组织培养 | 第16-21页 |
| ·植物组织培养的概述 | 第16页 |
| ·棉花的组织培养研究 | 第16-17页 |
| ·棉花组织培养及植株再生 | 第17-19页 |
| ·愈伤组织的诱导和培养 | 第17-18页 |
| ·植株再生 | 第18-19页 |
| ·影响体细胞胚发生和植株再生的因素 | 第19-20页 |
| ·基因型 | 第19页 |
| ·外植体 | 第19-20页 |
| ·激素 | 第20页 |
| ·氮源 | 第20页 |
| ·其他因素 | 第20页 |
| ·棉花体细胞肚发生和植株再生程序的建立 | 第20-21页 |
| ·植物细胞程序性死亡研究进展 | 第21-24页 |
| ·植物生长发育过程中的PCD现象 | 第22-23页 |
| ·营养器官程序性细胞死亡 | 第22页 |
| ·生殖器官的程序性细胞死亡 | 第22-23页 |
| ·体外细胞培养和体细胞胚发生的程序性细胞死亡 | 第23页 |
| ·环境胁迫诱导的植物细胞程序性死亡 | 第23-24页 |
| ·环境胁迫因子的类型 | 第23页 |
| ·环境胁迫诱导PCD的特点 | 第23-24页 |
| ·植物转基因研究 | 第24-32页 |
| ·植物遗传转化的发展 | 第24-26页 |
| ·棉花的遗传转化 | 第26-27页 |
| ·根癌农杆菌介导的植物转基因 | 第27-32页 |
| ·根癌农杆菌的结构与功能研究 | 第28-29页 |
| ·农杆菌转化的机理 | 第29页 |
| ·农杆菌T-DNA转移的影响因素 | 第29-31页 |
| ·转化细胞的选择培养 | 第31页 |
| ·利用体细胞胚胎为受体的转基因体系的建立 | 第31-32页 |
| ·植物抗虫基因工程研究进展 | 第32-37页 |
| ·Bt毒蛋白基因的杀虫机理 | 第32-33页 |
| ·Bt基因及其转Bt基因植物的研究 | 第33-35页 |
| ·Bt基因克隆的研究进展 | 第33-34页 |
| ·转Bt基因作物的应用 | 第34-35页 |
| ·其它抗虫基因的克隆和遗传转化 | 第35-36页 |
| ·蛋白酶抑制剂基因 | 第35页 |
| ·淀粉酶抑制剂(α-amylase inhibitor，α-AI)基因 | 第35页 |
| ·几丁质酶基因、昆虫神经激素基因和营养杀虫蛋白基因等研究 | 第35-36页 |
| ·存在的问题 | 第36-37页 |
| ·抗药性的产业 | 第36页 |
| ·抗虫范围较窄 | 第36页 |
| ·表达水平较低 | 第36页 |
| ·外源Bt基因在棉株中表达的时空性 | 第36-37页 |
| ·转抗虫基因植物的安全性问题 | 第37页 |
| ·植物抗病研究 | 第37-40页 |
| ·棉花黄萎病菌致病的机理 | 第38页 |
| ·植物几丁质酶及其基因的研究 | 第38-39页 |
| ·植物几丁质酶基因的分离克隆 | 第38页 |
| ·几丁质酶转基因植物 | 第38-39页 |
| ·植物葡聚糖酶及其基因的研究 | 第39-40页 |
| ·植物β-1，3-葡聚糖酶的研究 | 第39页 |
| ·植物β-1，3-葡聚糖酶转基因植物研究 | 第39-40页 |
| ·转基因植物的体细胞克隆变异和外源基因的稳定性 | 第40-45页 |
| ·转基因植物的体细胞克隆变异的研究 | 第40-44页 |
| ·转基因植物的体细胞克隆变异 | 第40页 |
| ·转基因植物体细胞克隆的表型多样性 | 第40-41页 |
| ·转基因植物体细胞克隆的DNA多样性 | 第41页 |
| ·转基因植株体细胞克隆变异与DNA多样性的相关性分析 | 第41-42页 |
| ·转基因植物表型和基因组DNA多样性的可遗传性 | 第42页 |
| ·转基因植物“体细胞克隆变异”产生的原因分析 | 第42-43页 |
| ·转基因植株“体细胞克隆变异”的利用 | 第43-44页 |
| ·转基因植物中外源目的基因的稳定性研究 | 第44-45页 |
| ·外源基因的遗传符合孟德尔遗传规律 | 第44页 |
| ·外源基因在植物体内的遗传复杂性 | 第44-45页 |
| ·本课题的研究目的与意义 | 第45-47页 |
| ·顽拗基因型棉花品种的体细胞胚胎发生和植株再生的调控 | 第45-46页 |
| ·农杆菌介导棉花胚性愈伤组织的转化体系建立 | 第46页 |
| ·抗虫和抗病基因转化棉花 | 第46页 |
| ·转基因棉花植株的体细胞克隆变异和外源基因的遗传稳定性 | 第46-47页 |
| 第二章 顽拗基因型品种的体细胞胚胎发生 | 第47-63页 |
| ·材料和方法 | 第48-52页 |
| ·品种材料 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-50页 |
| ·棉花组织培养所用培养基和培养条件: | 第48-49页 |
| ·棉花体细胞再生的培养体系 | 第49-50页 |
| ·试管苗增殖和生根 | 第50页 |
| ·试管苗移栽 | 第50页 |
| ·棉花组织培养和体细胞胚胎发生的调控 | 第50-51页 |
| ·激素浓度及配比对愈伤组织诱导和胚分化的影响 | 第50页 |
| ·无机盐对珂字201组织培养的影响 | 第50-51页 |
| ·氮素的调控对棉花组织培养的影响 | 第51页 |
| ·再生系统的建立和比较 | 第51-52页 |
| ·体细胞胚胎发生、成熟和苗发的形态观察 | 第52页 |
| ·据统计与分析 | 第52页 |
| ·结果与分析 | 第52-63页 |
| ·激素浓度及配比对珂字201愈伤组织诱导和胚分化影响 | 第52-53页 |
| ·无机盐对珂字201组织培养的影响 | 第53-55页 |
| ·愈伤组织诱导和增殖的调控 | 第53-54页 |
| ·胚性愈伤组织和胚分化的调控 | 第54-55页 |
| ·氮素的调控对再生的影响 | 第55-57页 |
| ·顽拗基因型品种的调控和体细胞再生 | 第57-58页 |
| ·试管苗的移栽和嫁接 | 第58-59页 |
| ·对三种棉花体细胞再生系统的比较研究 | 第59-60页 |
| ·珂字201的胚性愈伤组织内体细胞胚的发育状况 | 第60-63页 |
| 第三章 棉花组织培养中的细胞程序性死亡 | 第63-71页 |
| ·材料和方法 | 第63-65页 |
| ·棉花品种 | 第63页 |
| ·试验方法 | 第63-65页 |
| ·DNA的提取和DNA ladder分析 | 第64页 |
| ·愈伤组织细胞的观察 | 第64页 |
| ·棉花细胞原尘质体的分离和纯化 | 第64页 |
| ·程序性死亡细胞核的形态学观察 | 第64-65页 |
| ·结果 | 第65-69页 |
| ·愈伤组织细胞的DNA-Ladder电泳检测 | 第65页 |
| ·棉花组织培养中PCD发生的两个高峰和愈伤褐化死亡 | 第65-67页 |
| ·愈伤组织第一次PCD发生和褐化高峰 | 第65-66页 |
| ·愈伤组织第二次PCD发生和褐化高峰 | 第66-67页 |
| ·棉花体细胞胚胎发生时PCD细胞的形态学观察和鉴定 | 第67-69页 |
| ·DAPI染色观察程序性死亡的细胞核的形态 | 第67-68页 |
| ·发生程序性死亡的愈伤组织块不同部位细胞形态观察 | 第68-69页 |
| ·卡宝品红染色观察程序性死亡的细胞的形态 | 第69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| 第四章 胚性愈伤组织外植体的农杆菌介导遗传转化 | 第71-91页 |
| ·材料与方法 | 第72-79页 |
| ·试验材料 | 第72页 |
| ·棉花胚性愈伤组织的根癌农杆菌转化体系的建立 | 第72-74页 |
| ·培养基及培养条件 | 第72-73页 |
| ·转化方法 | 第73-74页 |
| ·基因组DNA抽提 | 第74-75页 |
| ·大量抽提法(用于Southern杂交) | 第74-75页 |
| ·小量抽提法(用于PCR扩增) | 第75页 |
| ·转基因棉花的分子检测 | 第75-77页 |
| ·PCR分析: | 第75-76页 |
| ·Southern杂交 | 第76-77页 |
| ·转基因植株的BtCry1Ac表达的ELISA检测 | 第77页 |
| ·根癌农杆菌转化珂字201胚性愈伤组织的因子优化 | 第77-78页 |
| ·卡那霉素(Kn)有效筛选浓度的试验 | 第77页 |
| ·愈伤组织生理状态与农杆菌侵染 | 第77页 |
| ·不同共培养培养基与农杆菌侵染 | 第77-78页 |
| ·农杆菌悬浮培养基的比较试验 | 第78页 |
| ·农杆菌处理菌液浓度与其侵染 | 第78页 |
| ·共培养温度与农杆菌侵染 | 第78页 |
| ·共培时间与农杆菌侵染 | 第78页 |
| ·程序化转基因体系的建立及其有效性的验证试验 | 第78页 |
| ·转基因棉花植株的卡那霉素和抗虫性鉴定 | 第78-79页 |
| ·卡那霉素抗性的检测； | 第78-79页 |
| ·转基因植株抗虫性的检测； | 第79页 |
| ·结果与分析 | 第79-89页 |
| ·农杆菌转化棉花胚性愈伤组织的参数优化研究 | 第79-84页 |
| ·珂字201愈伤组织对卡那霉素的敏感性 | 第79-80页 |
| ·愈伤组织生理状态对根癌农杆菌侵染的影响 | 第80页 |
| ·共培养培养基对农杆菌侵染的影响 | 第80-81页 |
| ·农杆菌悬浮培养基 | 第81页 |
| ·不同浓度的农杆菌对愈伤组织侵染的影响 | 第81-82页 |
| ·共培养温度对农杆菌侵染力的影响 | 第82-83页 |
| ·共培养时间对农杆菌转化棉花的影响 | 第83页 |
| ·农杆菌介导的珂字201的胚性愈伤组织体系的建立 | 第83-84页 |
| ·抗性愈伤组织的分子鉴定 | 第84-85页 |
| ·抗性愈伤组织的PCR鉴定 | 第84页 |
| ·抗性愈伤组织的Southern杂交分析 | 第84-85页 |
| ·转CrylAc和API-B嵌合基因棉花的再生 | 第85-89页 |
| ·三个品种的转基因再生 | 第85页 |
| ·转基因再生植株的分子检测 | 第85-87页 |
| ·转双抗虫基因植株的抗性 | 第87-89页 |
| ·转双抗虫基因棉花的BtCry1Ac表达量的ELISA检测 | 第89页 |
| ·讨论 | 第89-91页 |
| 第五章 转几丁质酶和葡聚糖酶基因棉花的获得及其对黄萎病的抗性 | 第91-98页 |
| ·材料和方法 | 第91-93页 |
| ·材料 | 第91-92页 |
| ·方法 | 第92页 |
| ·棉花的遗传转化 | 第92页 |
| ·卡那霉素涂抹叶片试验 | 第92页 |
| ·转基因棉花子代的抗病鉴定 | 第92页 |
| ·转化再生植株的生物学分析 | 第92-93页 |
| ·棉花DNA提取和转基因棉花PCR检测 | 第92-93页 |
| ·棉花DNA的酶解和Southern杂交 | 第93页 |
| ·转基因株抗病基因的遗传分析 | 第93页 |
| ·结果与分析 | 第93-97页 |
| ·棉花的遗传转化和转基因植株的获得 | 第93-94页 |
| ·棉花转基因株的卡那霉素涂抹和PCR检测 | 第94-95页 |
| ·转基因棉花的Southern blotting检测 | 第95-96页 |
| ·双价抗病基因的遗传分析 | 第96页 |
| ·转基因棉花T_3代的抗病性检测和抗性纯合系的选择 | 第96-97页 |
| ·讨论 | 第97-98页 |
| 第六章 转基因棉花的体细胞克隆变异和外源基因的稳定性 | 第98-110页 |
| ·材料和方法 | 第99-100页 |
| ·材料 | 第99页 |
| ·方法 | 第99-100页 |
| ·转基因当代材料的观察 | 第99页 |
| ·发生体细胞克隆变异的材料的观察和研究 | 第99页 |
| ·转基因变异群体的各个性状变异方向和变异分布 | 第99页 |
| ·转基因变异株系的外源基因插入片断的初步研究 | 第99-100页 |
| ·转基因皱缩叶片变异材料的初步研究 | 第100页 |
| ·转基因棉花材料的培育和试验设计 | 第100页 |
| ·转基因植株卡那霉素抗性和抗虫性的检测 | 第100页 |
| ·转化再生植株的尘物学分析 | 第100页 |
| ·结果与分析 | 第100-108页 |
| ·转基因棉花T_ο真真的性状考察 | 第100-101页 |
| ·T_ο的体细胞克隆变异 | 第100-101页 |
| ·转基因棉花体细胞克隆变异的研究 | 第101-103页 |
| ·转基因棉花农艺性状的变异规律 | 第101-102页 |
| ·转基因棉花株系品质性状变异的研究 | 第102-103页 |
| ·转基因变异群体中外源基因的插入的初步研究 | 第103-104页 |
| ·叶片皱缩突变体的研究 | 第104-105页 |
| ·转双抗虫基因棉花T_1的抗虫性分离 | 第105-106页 |
| ·转抗虫棉花纯合系杂交F_2的抗虫性分离 | 第106-107页 |
| ·抗虫棉的Southern杂交分析 | 第107-108页 |
| ·转化棉花株系的纯合系选育 | 第108页 |
| ·讨论 | 第108-110页 |
| 参考文献 | 第110-131页 |
| 附录: 博士在读期间发表或已接受的文章 | 第131-132页 |
| 致谢 | 第132页 |
