| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 前言 | 第15-24页 |
| 第一章 常规细胞培养基和实验动物饲料中叶酸含量的调整 | 第24-33页 |
| 一、 集落形成法考察不同浓度叶酸培养液对 HeLa229 细胞生长的影响 | 第24-26页 |
| 1 、材料与仪器 | 第24页 |
| ·细胞 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24页 |
| ·仪器设备 | 第24页 |
| 2 、方法 | 第24-25页 |
| ·细胞培养 | 第24-25页 |
| ·染色与固定 | 第25页 |
| ·集落计数及集落形成率的计算 | 第25页 |
| 3 、结果与讨论 | 第25-26页 |
| ·不同浓度叶酸培养液条件下集落形成率 | 第25-26页 |
| 二、 不同叶酸含量饲料对小鼠血清浓度及体重的影响 | 第26-32页 |
| 1 、材料与仪器 | 第26-27页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·仪器 | 第27页 |
| 2 、方法 | 第27-28页 |
| ·放射免疫法测定市售实验动物饲料中叶酸含量 | 第27页 |
| ·饲料中叶酸提取 | 第27页 |
| ·放射免疫法测定饲料中叶酸含量 | 第27页 |
| ·数据处理 | 第27页 |
| ·低叶酸饲料配方的调整 | 第27页 |
| ·不同叶酸含量饲料饲养后小鼠血清叶酸浓度测定及体重变化的考察 | 第27-28页 |
| 3 、结果与讨论 | 第28-32页 |
| ·市售实验动物饲料中叶酸含量和低叶酸饲料配方的确定 | 第28-29页 |
| ·叶酸标准曲线 | 第28页 |
| ·实验动物饲料中各组份叶酸含量和低叶酸饲料配方 | 第28-29页 |
| ·动物饲料成品中叶酸含量 | 第29页 |
| ·不同叶酸含量饲料对小鼠血清叶酸浓度的影响 | 第29-30页 |
| ·不同叶酸含量饲料对小鼠体重的影响 | 第30-32页 |
| 三、 本章小结 | 第32-33页 |
| 第二章 叶酸高分子复合物抗肿瘤谱的筛选 | 第33-47页 |
| 一、 放射性配基受体结合分析法测定 18 种人体细胞株叶酸受体的测定 | 第33-38页 |
| 1 、材料与仪器 | 第33页 |
| 2 、方法 | 第33-34页 |
| ·肿瘤细胞培养及处理 | 第33-34页 |
| ·肿瘤细胞与125I-叶酸结合饱和试验 | 第34页 |
| 3 、结果与讨论 | 第34-38页 |
| 二、 SGC-7901 细胞与125I-叶酸结合特性的研究 | 第38-42页 |
| 1 、材料与仪器 | 第38页 |
| 2 、方法 | 第38-40页 |
| ·SGC-7901 细胞培养及处理 | 第38-39页 |
| ·SGC-7901 细胞与125I-叶酸结合动力学试验 | 第39页 |
| ·SGC-7901 细胞浓度对125I-叶酸与受体结合的影响试验 | 第39页 |
| ·125I-叶酸浓度对结合反应的影响试验 | 第39页 |
| ·叶酸对 SGC-7901 细胞结合125I-叶酸的竞争抑制试验 | 第39页 |
| ·SGC-7901 细胞内化125I-叶酸试验 | 第39-40页 |
| 3 、结果与讨论 | 第40-42页 |
| ·SGC-7901细胞和125I-叶酸结合与时间的关系 | 第40页 |
| ·SGC-7901 细胞浓度对结合反应的影响 | 第40-41页 |
| ·竞争剂对SGC-7901细胞结合125I-叶酸的影响 | 第41页 |
| ·SGC-7901细胞内化125I-叶酸的程度 | 第41-42页 |
| 三、 裸鼠肿瘤组织与125I-叶酸体外结合的初步考察 | 第42-45页 |
| 1 、材料与仪器 | 第42页 |
| 2 、方法 | 第42-43页 |
| ·SGC-7901 肿瘤组织冷冻切片与 I-叶酸结合试验 | 第133-43页 |
| ·SGC-7901 肿瘤组织冷冻切片制作 | 第42页 |
| ·SGC-7901 冷冻切片与125I-叶酸结合试验 | 第42-43页 |
| ·KB 肿瘤组织匀浆中膜蛋白提取液与125I-叶酸结合试验 | 第43页 |
| ·KB 肿瘤组织匀浆的制备及其膜蛋白的提取 | 第43页 |
| ·膜蛋白含量测定 | 第43页 |
| ·标准曲线的建立 | 第43页 |
| ·膜蛋白总量测定 | 第43页 |
| ·膜蛋白提取液与125I-叶酸结合试验 | 第43页 |
| 3 、结果与讨论 | 第43-45页 |
| ·SGC-7901 肿瘤组织冷冻切片与125I-叶酸结合的特异性 | 第43-44页 |
| ·BCA 蛋白分析用标准曲线 | 第44-45页 |
| ·KB 肿瘤组织膜蛋白提取液与125I-叶酸结合的特异性 | 第45页 |
| 四、 本章小结 | 第45-47页 |
| 第三章 叶酸-右旋糖酐复合物初步抗肿瘤活性、药物动力学及安全性研究 | 第47-56页 |
| 一、 体外抗肿瘤生长试验 | 第47-49页 |
| 1 、材料与仪器 | 第47页 |
| 2 、方法 | 第47-48页 |
| ·细胞分装 | 第47页 |
| ·药液配制 | 第47页 |
| ·给药方案 | 第47-48页 |
| 3 、结果与讨论 | 第48-49页 |
| 二、 模型动物体内抗肿瘤活性试验 | 第49-52页 |
| 1 、HeLa229 荷瘤裸小鼠模型建立 | 第49页 |
| 2 、叶酸-右旋糖酐复合物抑制肿瘤生长试验 | 第49-50页 |
| 3 、结果与讨论 | 第50-52页 |
| ·瘤体动态变化 | 第50页 |
| ·抑瘤率 | 第50-52页 |
| 三、 叶酸-右旋糖酐复合物在正常小鼠体内药物动力学及其分布 | 第52-53页 |
| 1 、材料和仪器 | 第52页 |
| 2 、方法 | 第52页 |
| 3 、结果与讨论 | 第52-53页 |
| ·叶酸-右旋糖酐复合物在正常小鼠体内药物动力学参数 | 第52-53页 |
| 四、 叶酸-右旋糖酐复合物急性毒性试验 | 第53页 |
| 1 、方法 | 第53页 |
| 2 、结果与讨论 | 第53页 |
| 五、 叶酸-右旋糖酐复合物过敏试验 | 第53-54页 |
| 1 、动物 | 第54页 |
| 2 、方法 | 第54页 |
| 3 、结果与讨论 | 第54页 |
| 六、 本章小结 | 第54-56页 |
| 第四章 叶酸-右旋糖酐复合物靶向抗肿瘤机理的初步探讨 | 第56-74页 |
| 一、 叶酸-右旋糖酐复合物与肿瘤细胞结合的特异性和亲和力评价 | 第56-59页 |
| 1 、材料与仪器 | 第56页 |
| 2 、方法 | 第56页 |
| ·肿瘤细胞株与125I-Tyr-叶酸右旋糖酐复合物饱和结合试验 | 第56页 |
| ·叶酸-右旋糖酐复合物竞争抑制肿瘤细胞与125I-叶酸结合试验 | 第56页 |
| 3 、结果与讨论 | 第56-59页 |
| ·肿瘤细胞结合125I-Tyr-叶酸右旋糖酐复合物 Bmax 和 Kd | 第56-58页 |
| ·叶酸-右旋糖酐复合物对肿瘤细胞的特异性亲和作用 | 第58-59页 |
| 二、 叶酸-右旋糖酐复合物介导叶酸受体对肿瘤细胞靶向的论证 | 第59-64页 |
| 1 、材料与仪器 | 第59页 |
| 2 、方法 | 第59-61页 |
| ·荧光示踪法考察肿瘤细胞对叶酸-右旋糖酐复合物选择性摄取试验 | 第59-60页 |
| ·浓度对摄取影响试验 | 第59-60页 |
| ·培养时间对摄取影响试验 | 第60页 |
| ·游离叶酸对摄取影响试验 | 第60页 |
| ·酶处理对摄取影响试验 | 第60页 |
| ·同位素示踪法考察肿留细胞对叶酸-右旋糖酐复合物的内化试验 | 第60-61页 |
| 3 结果与讨论 | 第61-64页 |
| ·HeLa229细胞对FITC-叶酸右旋糖酐复合物摄取的选择性 | 第61-63页 |
| ·FITC-叶酸-右旋糖酐复合物浓度对其摄取影响 | 第61页 |
| ·培养时间对 FITC-叶酸-右旋糖酐复合物摄取影响 | 第61-62页 |
| ·游离叶酸对 FITC-叶酸-右旋糖酐复合物摄取影响 | 第62-63页 |
| ·酶处理对 FITC-叶酸-右旋糖酐复合物摄取影响试验 | 第63页 |
| ·HeLa229 细胞内化125I-Tyr-叶酸右旋糖酐复合物程度 | 第63-64页 |
| 三、 组织、细胞和分子水平探讨叶酸-右旋糖酐复合物的抗肿瘤机理 | 第64-73页 |
| 1 、材料与仪器 | 第64页 |
| 2 、方法 | 第64-65页 |
| ·组织病理学考察叶酸-右旋糖酐复合物对肿瘤组织结构的影响 | 第64页 |
| ·图象细胞光度计法考察叶酸-右旋糖酐复合物对肿瘤细胞DNA 指数的影响 | 第64-65页 |
| ·电镜法考察叶酸-右旋糖酐复合物对肿瘤亚细胞器形态的影响 | 第65页 |
| ·流式细胞仪法考察叶酸-右旋糖酐复合物对肿瘤细胞周期 DNA含量及凋亡的影响 | 第65页 |
| 3 、结果与讨论 | 第65-73页 |
| ·瘤组织形态观察 | 第65-67页 |
| ·叶酸-右旋糖酐复合物对瘤组织中癌细胞 DNA 指数的影响 | 第67页 |
| ·叶酸-右旋糖酐复合物对亚细胞形态的影响 | 第67-73页 |
| 四、 本章小结 | 第73-74页 |
| 第五章 其它叶酸高分子复合物作为介导叶酸受体靶向肿瘤细胞药物或药物载体的可行性探讨 | 第74-81页 |
| 一、 叶酸-羧甲基化右旋糖酐复合物 | 第74-77页 |
| 1 、材料与仪器 | 第74页 |
| 2 、方法 | 第74-75页 |
| ·羧甲基化右旋糖酐复合物在小鼠体内组织分布试验 | 第74页 |
| ·叶酸-羧甲基化右旋糖酐复合物在荷瘤裸鼠体内组织分布试验 | 第74-133页 |
| ·叶酸-羧甲基化右旋糖酐复合物(F-CMDx)竞争抑制 I-叶酸与肿瘤细胞结合试验 | 第133-75页 |
| 3 、结果与讨论 | 第75-77页 |
| ·羧甲基化右旋糖酐在小鼠体内组织分布 | 第75-76页 |
| ·叶酸-羧甲基化右旋糖酐复合物对肿瘤组织的靶向性 | 第76-77页 |
| ·叶酸-羧甲基化右旋糖酐复合物对肿瘤细胞的特异性亲和作用 | 第77页 |
| 二、 叶酸-聚乙二醇复合物及其衍生物 | 第77-80页 |
| 1 、材料与仪器 | 第78页 |
| 2 、方法 | 第78页 |
| ·叶酸-聚乙二醇复合物竞争抑制 I-叶酸与肿瘤细胞结合试验... 70 | 第133-78页 |
| ·流式细胞仪法考察叶酸-聚乙二醇复合物对肿瘤细胞周期DNA 含量及凋亡的影响 | 第78页 |
| 3 、结果与讨论 | 第78-80页 |
| ·叶酸-聚乙二醇复合物对肿瘤细胞的特异性亲和作用 | 第78-79页 |
| ·叶酸-聚乙二醇复合物对体外肿瘤细胞周期 DNA 含量及凋亡的影响 | 第79-80页 |
| 三、 本章小结 | 第80-81页 |
| 第六章 防御素对肿瘤细胞作用的初步探讨 | 第81-86页 |
| 1 、材料与仪器 | 第81页 |
| 2 、方法 | 第81-82页 |
| 3 、结果与讨论 | 第82-85页 |
| ·防御素对体外 HeLa229 细胞形态影响 | 第82页 |
| ·防御素对体外 HeLa229 细胞周期 DNA 含量及凋亡的影响 | 第82-85页 |
| 4 、本章小结 | 第85-86页 |
| 结语 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 附录 | 第97-98页 |
