应用PCR技术检测甘蔗线虫病抗性基因的研究
| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第9-21页 |
| ·线虫病的研究现状 | 第9-10页 |
| ·根结线虫 | 第9页 |
| ·胞囊线虫 | 第9-10页 |
| ·作物抗线虫基因的研究现状 | 第10-12页 |
| ·作物抗线虫基因的克隆 | 第10-11页 |
| ·作物抗线虫基因的定位 | 第11-12页 |
| ·生物技术在基因检测方面的应用 | 第12-20页 |
| ·PCR的研究现状 | 第12-18页 |
| ·影响PCR反应特异性的几个因素及解决方法 | 第14-15页 |
| ·PCR技术的应用 | 第15-18页 |
| ·PCR技术的展望 | 第18页 |
| ·Southern杂交的研究现状 | 第18-20页 |
| ·探针的标记 | 第18-19页 |
| ·核酸分子杂交方法 | 第19-20页 |
| ·我国甘蔗线虫病研究概况 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| ·本研究的技术路线 | 第21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-28页 |
| ·供试材料 | 第21-22页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·原种和野生品种 | 第22页 |
| ·栽培品种 | 第22页 |
| ·亲本品种 | 第22页 |
| ·引进品种 | 第22页 |
| ·果蔗品种 | 第22页 |
| ·生化试剂和仪器 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-28页 |
| ·DNA提取纯化方法 | 第22-23页 |
| ·DNA的提取 | 第23页 |
| ·DNA的纯化 | 第23页 |
| ·引物设计 | 第23-24页 |
| ·PCR扩增和电泳 | 第24页 |
| ·PCR反应体系 | 第24页 |
| ·反应程序 | 第24页 |
| ·结果记录 | 第24页 |
| ·PCR-Southern杂交 | 第24-28页 |
| ·杂交溶液的制备 | 第25页 |
| ·目的基因片段的回收 | 第25页 |
| ·探针的制备 | 第25-26页 |
| ·转膜 | 第26-27页 |
| ·杂交 | 第27页 |
| ·洗膜 | 第27页 |
| ·显色 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-40页 |
| ·PCR特异扩增影响因素分析 | 第28-31页 |
| ·模板DNA浓度的影响 | 第28页 |
| ·Taq酶浓度的影响 | 第28-29页 |
| ·引物浓度的影响 | 第29-30页 |
| ·dNTP浓度的影响 | 第30页 |
| ·退火温度的影响 | 第30-31页 |
| ·引物筛选 | 第31-32页 |
| ·抗根结线虫引物筛选 | 第31-32页 |
| ·抗胞囊线虫引物筛选 | 第32页 |
| ·野生和栽培甘蔗品种PCR特异扩增产物的分析 | 第32-39页 |
| ·野生品种特异扩增产物的分析 | 第33-34页 |
| ·甘蔗栽培品种特异扩增产物的分析 | 第34-35页 |
| ·甘蔗亲本品种特异扩增产物的分析 | 第35-37页 |
| ·甘蔗引进品种特异扩增产物的分析 | 第37-38页 |
| ·果蔗特异扩增产物的分析 | 第38-39页 |
| ·PCR-Southern杂交结果的分析 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| ·关于实验材料的选取 | 第40-41页 |
| ·关于PCR特异扩增 | 第41页 |
| ·关于PCR-Southern杂交 | 第41页 |
| ·甘蔗对不同线虫病的抗性结果讨论 | 第41-42页 |
| ·PCR-Southern杂交结果的验证性 | 第42页 |
| 5 结论 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 附录1 | 第48-49页 |
| 附录2 | 第49-50页 |
| 附录3 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
