| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-17页 |
| ·转基因大豆研究进展 | 第11-13页 |
| ·大豆转基因体系的优化 | 第11-12页 |
| ·外源基因在大豆转基因育种中的研究 | 第12-13页 |
| ·大豆转基因育种的发展与应用 | 第13页 |
| ·本实验室转基因大豆研究基础 | 第13页 |
| ·转基因技术中筛选剂的使用 | 第13-14页 |
| ·草甘膦除草剂及 EPSPS 基因 | 第14-15页 |
| ·草甘膦作用机理及应用现状 | 第14-15页 |
| ·EPSPS 基因研究进展 | 第15页 |
| ·EPSPS 基因作为标记基因、草甘膦作为筛选剂的大豆遗传转化体系 | 第15-17页 |
| 第2章 草甘膦作为大豆遗传转化筛选剂的分析 | 第17-29页 |
| ·试验材料 | 第17-18页 |
| ·植物材料 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·培养基配制 | 第17-18页 |
| ·试验方法 | 第18-20页 |
| ·无菌苗培养 | 第18页 |
| ·丛生芽诱导期不同草甘膦浓度处理 | 第18页 |
| ·丛生芽筛选期不同草甘膦浓度处理 | 第18页 |
| ·丛生芽伸长期不同草甘膦浓度处理 | 第18-19页 |
| ·品种间丛生芽诱导率的差异 | 第19页 |
| ·数据分析 | 第19-20页 |
| ·结果与分析 | 第20-27页 |
| ·草甘膦对大豆丛生芽诱导及伸长的影响 | 第20-25页 |
| ·草甘膦在丛生芽三个时期的整体筛选策略 | 第25页 |
| ·亲本与子代对草甘膦敏感性的差异 | 第25-26页 |
| ·品种间丛生芽诱导率的差异 | 第26-27页 |
| ·讨论 | 第27-28页 |
| ·本章小结 | 第28-29页 |
| 第3章 CP4-EPSPS 基因的克隆与双元载体的构建 | 第29-43页 |
| ·试验材料 | 第29-30页 |
| ·菌株、基础载体 | 第29页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第29-30页 |
| ·试验方法 | 第30-35页 |
| ·植物总 DNA 提取 | 第30页 |
| ·PCR 扩增目的片段 | 第30-31页 |
| ·PCR 回收(Cycle-Pure kit) | 第31页 |
| ·连接测序载体(ZeroBack Fast Ligation Kit) | 第31-32页 |
| ·连接产物转化 pZeroBack Vector | 第32页 |
| ·菌落 PCR 检测 | 第32-33页 |
| ·质粒提取 | 第33页 |
| ·酶切与连接 | 第33-34页 |
| ·胶回收 | 第34页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第34页 |
| ·转化农杆菌 | 第34-35页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-41页 |
| ·CP4-EPSPS 基因的克隆 | 第35-38页 |
| ·载体的构建与鉴定 | 第38-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·本章小结 | 第42-43页 |
| 第4章 转 CP4-EPSPS 基因大豆的获得及检测 | 第43-53页 |
| ·试验材料 | 第43-44页 |
| ·大豆材料 | 第43页 |
| ·菌株 | 第43页 |
| ·质粒 | 第43页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第43-44页 |
| ·试验方法 | 第44-48页 |
| ·培养基配制 | 第44-45页 |
| ·根癌农杆菌介导的大豆遗传转化方法 | 第45-47页 |
| ·转 EPSPS 基因大豆的检测 | 第47-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-50页 |
| ·转 EPSPS 基因大豆的获得 | 第48-49页 |
| ·转 EPSPS 基因大豆的检测 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| ·本章小结 | 第51-53页 |
| 第5章 讨论 | 第53-56页 |
| ·农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化体系 | 第53页 |
| ·草甘膦作为大豆遗传转化筛选剂的分析 | 第53-54页 |
| ·转基因技术在大豆改良中的应用 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64页 |