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EPSPS基因直接作为大豆遗传转化筛选标记的研究

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第1章 绪论第11-17页
   ·转基因大豆研究进展第11-13页
     ·大豆转基因体系的优化第11-12页
     ·外源基因在大豆转基因育种中的研究第12-13页
     ·大豆转基因育种的发展与应用第13页
     ·本实验室转基因大豆研究基础第13页
   ·转基因技术中筛选剂的使用第13-14页
   ·草甘膦除草剂及 EPSPS 基因第14-15页
     ·草甘膦作用机理及应用现状第14-15页
     ·EPSPS 基因研究进展第15页
   ·EPSPS 基因作为标记基因、草甘膦作为筛选剂的大豆遗传转化体系第15-17页
第2章 草甘膦作为大豆遗传转化筛选剂的分析第17-29页
   ·试验材料第17-18页
     ·植物材料第17页
     ·主要试剂第17页
     ·培养基配制第17-18页
   ·试验方法第18-20页
     ·无菌苗培养第18页
     ·丛生芽诱导期不同草甘膦浓度处理第18页
     ·丛生芽筛选期不同草甘膦浓度处理第18页
     ·丛生芽伸长期不同草甘膦浓度处理第18-19页
     ·品种间丛生芽诱导率的差异第19页
     ·数据分析第19-20页
   ·结果与分析第20-27页
     ·草甘膦对大豆丛生芽诱导及伸长的影响第20-25页
     ·草甘膦在丛生芽三个时期的整体筛选策略第25页
     ·亲本与子代对草甘膦敏感性的差异第25-26页
     ·品种间丛生芽诱导率的差异第26-27页
   ·讨论第27-28页
   ·本章小结第28-29页
第3章 CP4-EPSPS 基因的克隆与双元载体的构建第29-43页
   ·试验材料第29-30页
     ·菌株、基础载体第29页
     ·植物材料第29页
     ·主要试剂及培养基第29-30页
   ·试验方法第30-35页
     ·植物总 DNA 提取第30页
     ·PCR 扩增目的片段第30-31页
     ·PCR 回收(Cycle-Pure kit)第31页
     ·连接测序载体(ZeroBack Fast Ligation Kit)第31-32页
     ·连接产物转化 pZeroBack Vector第32页
     ·菌落 PCR 检测第32-33页
     ·质粒提取第33页
     ·酶切与连接第33-34页
     ·胶回收第34页
     ·农杆菌感受态的制备第34页
     ·转化农杆菌第34-35页
     ·琼脂糖凝胶电泳第35页
   ·结果与分析第35-41页
     ·CP4-EPSPS 基因的克隆第35-38页
     ·载体的构建与鉴定第38-41页
   ·讨论第41-42页
   ·本章小结第42-43页
第4章 转 CP4-EPSPS 基因大豆的获得及检测第43-53页
   ·试验材料第43-44页
     ·大豆材料第43页
     ·菌株第43页
     ·质粒第43页
     ·主要试剂及耗材第43-44页
   ·试验方法第44-48页
     ·培养基配制第44-45页
     ·根癌农杆菌介导的大豆遗传转化方法第45-47页
     ·转 EPSPS 基因大豆的检测第47-48页
   ·结果与分析第48-50页
     ·转 EPSPS 基因大豆的获得第48-49页
     ·转 EPSPS 基因大豆的检测第49-50页
   ·讨论第50-51页
   ·本章小结第51-53页
第5章 讨论第53-56页
   ·农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化体系第53页
   ·草甘膦作为大豆遗传转化筛选剂的分析第53-54页
   ·转基因技术在大豆改良中的应用第54-56页
结论第56-57页
参考文献第57-62页
攻读硕士学位期间所发表的学术论文第62-64页
致谢第64页

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