| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-28页 |
| ·巴西橡胶树概况 | 第9-21页 |
| ·橡胶树橡胶粒子 | 第9页 |
| ·天然橡胶的生物合成途径 | 第9-15页 |
| ·异戊二烯焦磷酸(IPP)的合成 | 第11页 |
| ·橡胶分子的生物合成 | 第11-15页 |
| ·橡胶分子形成的启动 | 第11-13页 |
| ·橡胶分子的延伸相关酶类及其基因 | 第13-15页 |
| ·橡胶生物合成的调控机制 | 第15-21页 |
| ·酶调控机制 | 第15-18页 |
| ·HMGR及其调控 | 第15-16页 |
| ·FPS及其调控 | 第16页 |
| ·CPT及其调控 | 第16-17页 |
| ·其他酶类调控 | 第17-18页 |
| ·激素对橡胶生物合成的调控 | 第18-21页 |
| ·乙烯利对橡胶生物合成的调控 | 第18页 |
| ·茉莉酸类物质对橡胶生物合成的调控 | 第18-21页 |
| ·BN-PAGE技术在植物研究中的应用进展 | 第21-26页 |
| ·BN-PAGE电泳技术的历史 | 第21页 |
| ·BN-PAGE电泳技术的作用 | 第21-22页 |
| ·BN-PAGE电泳技术的原理 | 第22-23页 |
| ·BN-PAGE的局限性及改进 | 第23-24页 |
| ·BN-PAGE电泳技术当前在生物方面的应用 | 第24-26页 |
| ·BN-PAGE电泳技术在线粒体和叶绿体电子转移链上的研究 | 第24-25页 |
| ·BN-PAGE电泳技术在植物中其它方面的研究 | 第25页 |
| ·BN-PAGE电泳技术在细菌、酵母和哺乳动物的研究 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的和意义及研究内容 | 第26-27页 |
| ·目的和意义 | 第26-27页 |
| ·研究内容 | 第27页 |
| ·本研究的技术路线 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-45页 |
| ·材料 | 第28-30页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·质粒及大肠杆菌 | 第28页 |
| ·主要生化试剂及试剂盒 | 第28-30页 |
| ·主要仪器、设备 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-45页 |
| ·REF、SRPP及HRT2多克隆抗体的制备及纯化 | 第30-35页 |
| ·REF、SRPP及HRT2 cDNA的克隆 | 第31-33页 |
| ·胶乳总RNA的提取和反转录 | 第31-32页 |
| ·REF、SRPP和HRT2的cDNA扩增 | 第32-33页 |
| ·连接和转化大肠杆菌 | 第33页 |
| ·阳性重组子的鉴定和测序 | 第33-34页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第34页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第34-35页 |
| ·抗体的制备与鉴定 | 第35页 |
| ·橡胶树大、小橡胶粒子的分离纯化 | 第35-37页 |
| ·不同离心速度下橡胶树大橡胶粒子的分离纯化 | 第35-36页 |
| ·橡胶树小橡胶粒子的分离纯化 | 第36-37页 |
| ·橡胶树小橡胶粒子的光镜检测 | 第37页 |
| ·橡胶树橡胶粒子膜蛋白的分离 | 第37-45页 |
| ·橡胶粒子膜蛋白的制备以及去污剂条件的优化 | 第37-39页 |
| ·用于SDS-PAGE分析的大橡胶粒子膜蛋白的制备 | 第37-38页 |
| ·用于BN-PAGE分析的大、小橡胶粒子和黄色体膜蛋白的制备 | 第38-39页 |
| ·橡胶粒子膜蛋白的BN-PAGE/SDS-PAGE和2-DE电泳 | 第39-43页 |
| ·凝胶染色与脱色 | 第43页 |
| ·Western Bloting | 第43-44页 |
| ·蛋白质点的MALDI-TOF肽质指纹图谱分析 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-59页 |
| ·制备REF、SRPP和HRT2的多克隆抗体并纯化 | 第45-51页 |
| ·橡胶树RNA的提取及质量分析 | 第45-46页 |
| ·REF、SRPP和HRT2编码基因的RT-PCR扩增 | 第46页 |
| ·阳性重组子的鉴定 | 第46-47页 |
| ·大肠杆菌表达重组蛋白的分离纯化 | 第47-50页 |
| ·抗血清的效价及特异性鉴定 | 第50-51页 |
| ·橡胶树大、小橡胶粒子的分离纯化 | 第51-55页 |
| ·橡胶粒子的纯化和处理 | 第51-53页 |
| ·不同离心速度对分离橡胶粒子膜蛋白的影响 | 第53页 |
| ·不同去污剂不同浓度洗脱的胶乳各组分膜蛋白分析 | 第53-55页 |
| ·橡胶树橡胶粒子膜蛋白的分离 | 第55-59页 |
| ·橡胶树大橡胶粒子膜蛋白的BN-PAGE分析 | 第55-57页 |
| ·橡胶树大小橡胶粒子SDS-PAGE及2-DE双向电泳分析 | 第57-59页 |
| ·大小橡胶粒子膜蛋白的SDS-PAGE电泳分析 | 第57-58页 |
| ·大小橡胶粒子膜蛋白2-DE双向电泳分析 | 第58-59页 |
| ·橡胶树橡胶粒子膜蛋白的质谱分析鉴定 | 第59页 |
| 4 讨论 | 第59-62页 |
| ·REF、SRPP和HRT抗血清的制备 | 第59-60页 |
| ·分离纯化大小橡胶粒子的必要性 | 第60页 |
| ·大小橡胶粒子膜蛋白上差异蛋白的研究意义 | 第60-61页 |
| ·BN-PAGE电泳技术研究橡胶粒子膜蛋白的前景 | 第61页 |
| ·后续工作展望 | 第61-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 附图 | 第63-66页 |
| 縮写词及其英汉对照 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
