| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-28页 |
| 1 农杆菌介导的玉米遗传转化 | 第15-21页 |
| 1．1 农杆菌的研究历史及应用 | 第15-17页 |
| 1．2 农杆菌介导转化玉米的研究历程 | 第17-18页 |
| 1．3 农杆菌介导玉米遗传转化理论与技术探讨 | 第18-21页 |
| 1．3．1 关于农杆菌的吸附 | 第18-19页 |
| 1．3．2 关于Vir基因的活化 | 第19页 |
| 1．3．3 关于感受态细胞 | 第19-20页 |
| 1．3．4 关于共培养条件 | 第20页 |
| 1．3．5 农杆菌转化方法的发展 | 第20-21页 |
| 2 基因枪介导的玉米遗传转化 | 第21-23页 |
| 3 其他转化方法介导的玉米遗传转化 | 第23-24页 |
| 3．1 PEG法 | 第23页 |
| 3．2 电击法 | 第23页 |
| 3．3 超声波法 | 第23-24页 |
| 3．4 碳化硅纤维法 | 第24页 |
| 3．5 花粉管通道法 | 第24页 |
| 4 本研究的意义 | 第24-28页 |
| 4．1 转化受体及基因型 | 第24-25页 |
| 4．2 农杆菌介导法 | 第25页 |
| 4．3 基因枪法 | 第25-26页 |
| 4．4 花粉管通道法 | 第26-28页 |
| 第二部分 研究内容 | 第28-86页 |
| 实验一 常规玉米自交系遗传转化受体体系的建立 | 第28-40页 |
| 1 材料和方法 | 第28-30页 |
| 1．1 实验材料 | 第28页 |
| 1．2 主要仪器和试剂 | 第28-29页 |
| 1．3 方法 | 第29-30页 |
| 1．3．1 培养基 | 第29-30页 |
| 1．3．2 材料处理 | 第30页 |
| 1．3．3 培养条件 | 第30页 |
| 1．3．4 组培苗移栽 | 第30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-38页 |
| 2．1 不同基因型、不同培养基对愈伤组织诱导的影响 | 第30-31页 |
| 2．1．1 不同基因型、不同培养基对愈伤组织诱导率的影响 | 第30-31页 |
| 2．1．2 不同基因型、不同培养基诱导愈伤的特点 | 第31页 |
| 2．2 不同基因型、不同培养基对愈伤组织继代培养的影响 | 第31-33页 |
| 2．2．1 基因型的影响 | 第32-33页 |
| 2．2．2 培养基的影响 | 第33页 |
| 2．3 胚性愈伤组织的分化 | 第33-36页 |
| 2．4 组培苗的移栽 | 第36-38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| 实验二 农杆菌介导法将Bt杀虫蛋白基因导入优良玉米自交系 | 第40-66页 |
| 1 材料与方法 | 第40-53页 |
| 1．1 材料 | 第40-42页 |
| 1．1．1 植物材料 | 第41页 |
| 1．1．2 转化受体 | 第41页 |
| 1．1．3 质粒和菌株 | 第41页 |
| 1．1．4 培养基 | 第41-42页 |
| 1．2 主要仪器与试剂 | 第42-43页 |
| 1．3 方法 | 第43-53页 |
| 1．3．1 工程菌液制备 | 第43页 |
| 1．3．2 侵染转化 | 第43-44页 |
| 1．3．3 PPT筛选浓度的选择 | 第44页 |
| 1．3．4 转化受体及侵染液浓度的选择 | 第44页 |
| 1．3．5 转化筛选及植株再生 | 第44页 |
| 1．3．6 T_0代抗性植株PCR检测 | 第44-47页 |
| 1．3．7 PCR阳性植株PCR-Southern和Southern blotting检测 | 第47-53页 |
| 1．3．8 T_0代阳性植株Basta检测 | 第53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-63页 |
| 2．1 PPT筛选浓度的确定 | 第53页 |
| 2．2 侵染转化的效果 | 第53-56页 |
| 2．3 转化受体及侵染液浓度的选择 | 第56页 |
| 2．4 幼胚大小、预培养、预培养时间、共培养温度等因素的影响 | 第56-60页 |
| 2．5 T_0代抗性植株的PCR检测 | 第60-61页 |
| 2．6 PCR阳性植株PCR-Southern和Southern blotting检测 | 第61-62页 |
| 2．7 Basta抗性鉴定 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-66页 |
| 实验三 以基因枪法将Bt杀虫蛋白基因导入优良玉米自交系 | 第66-78页 |
| 1 材料与方法 | 第66-72页 |
| 1．1 材料 | 第66-67页 |
| 1．1．1 植物材料 | 第66页 |
| 1．1．2 受体材料 | 第66页 |
| 1．1．3 培养基 | 第66-67页 |
| 1．1．4 质粒和菌株 | 第67页 |
| 1．2 主要仪器与试剂 | 第67-68页 |
| 1．3 方法 | 第68-72页 |
| 1．3．1 质粒DNA提取纯化 | 第68-70页 |
| 1．3．2 基因枪轰击 | 第70-71页 |
| 1．3．3 抗性愈伤组织筛选及植株再生 | 第71页 |
| 1．3．4 GUS基因的瞬间检测 | 第71-72页 |
| 1．3．5 T_0代抗性植株的PCR检测 | 第72页 |
| 2 结果与分析 | 第72-75页 |
| 2．1 质粒DNA电泳分析 | 第72页 |
| 2．2 GUS基因的瞬间表达 | 第72-74页 |
| 2．3 抗性愈伤组织筛选及植株再生 | 第74页 |
| 2．4 再生植株分子检测 | 第74-75页 |
| 3 讨论 | 第75-78页 |
| 实验四 花粉管通道法将Bt杀虫蛋白基因导入优良玉米自交系 | 第78-86页 |
| 1 材料和方法 | 第79-82页 |
| 1．1 材料 | 第79页 |
| 1．2 主要仪器和试剂 | 第79页 |
| 1．3 方法 | 第79-82页 |
| 1．3．1 质粒DNA提取 | 第79页 |
| 1．3．2 导入时间的设定 | 第79-80页 |
| 1．3．3 导入 | 第80页 |
| 1．3．4 检测 | 第80-82页 |
| 2 结果与分析 | 第82-84页 |
| 2．1 Basta抗性筛选浓度的确定 | 第82页 |
| 2．2 Basta抗性筛选和PCR检测结果 | 第82-84页 |
| 3 讨论 | 第84-86页 |
| 结论 | 第86-88页 |
| 致谢 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-100页 |
| 英文摘要 | 第100-102页 |
| CURRICULUM VITAE | 第102-104页 |
