| 第一章 哺乳动物胚胎干细胞研究历史与现状 | 第1-35页 |
| §1．1 早期胚胎来源的ES细胞研究历史 | 第9-13页 |
| §1．1．1 研究历史 | 第9-11页 |
| §1．1．2 早期胚胎来源的ES细胞分离克隆程序 | 第11-13页 |
| §1．2 PGCS来源的ES细胞研究历史 | 第13-20页 |
| §1．2．1 以PGCs为材料获得ES细胞的优势及目前各种动物研究进展 | 第13-14页 |
| §1．2．2 PGCs的获得及PGCs向ES细胞的转化 | 第14-17页 |
| §1．2．3 目前各种动物由PGCs分离克隆ES细胞的研究进展 | 第17-20页 |
| §1．3 影响胚胎干细胞分离克隆的因素 | 第20-29页 |
| §1．3．1 饲养层 | 第20-22页 |
| §1．3．2 培养基 | 第22-23页 |
| §1．3．3 添加物 | 第23-27页 |
| §1．3．4 胚胎日龄、遗传背景以及获取原始生殖细胞的时间 | 第27-29页 |
| §1．4 胚胎干细胞的鉴定 | 第29-31页 |
| §1．4．1 形态学及生长行为鉴定 | 第29页 |
| §1．4．2 碱性磷酸酶染色 | 第29页 |
| §1．4．3 胚胎阶段特异性表面抗原（SSEA-1）的检测 | 第29-30页 |
| §1．4．4 Oct-4转录因子表达产物的检测 | 第30页 |
| §1．4．5 核型分析 | 第30页 |
| §1．4．6 体内体外分化实验 | 第30-31页 |
| §1．4．7 嵌合体的制备 | 第31页 |
| §1．5 研究胚胎干细胞的意义 | 第31-33页 |
| §1．5．1 生产克隆动物 | 第31-32页 |
| §1．5．2 生产转基因动物 | 第32页 |
| §1．5．3 药理研究与新药开发 | 第32页 |
| §1．5．4 为组织工程提供充足的种子细胞 | 第32-33页 |
| §1．5．5 研究胚胎发育的基因调控 | 第33页 |
| §1．6 结束语 | 第33-35页 |
| 第二章 实验研究 | 第35-49页 |
| §2．1 引言 | 第35页 |
| §2．2 材料与方法 | 第35-41页 |
| §2．2．1 材料 | 第35-36页 |
| §2．2．2 方法 | 第36-41页 |
| §2．3 结果 | 第41-45页 |
| §2．3．1 成纤维细胞的生长行为 | 第41-42页 |
| §2．3．2 小鼠ES细胞的生长行为 | 第42页 |
| §2．3．3 牛ES细胞集落的生长行为及传代后的情况 | 第42页 |
| §2．3．4 由牛PGCs分离克隆ES细胞的效果 | 第42-43页 |
| §2．3．5 培养液对牛ES细胞分离传代的作用结果 | 第43-44页 |
| §2．3．6 消化液对牛ES细胞克隆传代的作用结果 | 第44页 |
| §2．3．7 饲养层对牛ES细胞分离克隆的作用结果 | 第44页 |
| §2．3．8 牛ES细胞的鉴定结果 | 第44-45页 |
| §2．3．9 牛ES细胞冷冻保存结果 | 第45页 |
| §2．4 讨论 | 第45-49页 |
| §2．4．1 胎龄对牛PGCs分离的影响 | 第45-46页 |
| §2．4．2 犊牛血清浓度对牛ES细胞分离克隆的影响 | 第46页 |
| §2．4．3 细胞因子及饲养层对牛ES细胞分离克隆的影响 | 第46-47页 |
| §2．4．4 消化液对牛ES细胞克隆的影响 | 第47页 |
| §2．4．5 来源于牛PGCs的ES细胞生长特性 | 第47-48页 |
| §2．4．6 来源于牛PGCs的ES细胞的鉴定 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-61页 |
| 作者简介 | 第61-74页 |
| 附图说明 | 第74页 |
