| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-33页 |
| ·简介 | 第14-15页 |
| ·RNAi及其作用机制 | 第15-17页 |
| ·Caenorhabditis elegans中CDC-42和极性蛋白在胚胎中的作用 | 第17-23页 |
| ·C.elegans作为模型研究寿命和衰老 | 第23-24页 |
| ·daf-2基因 | 第24页 |
| ·daf-16基因 | 第24-25页 |
| ·DAF-2/DAF-16信号通路 | 第25-29页 |
| ·下游信号调控 | 第29页 |
| ·感觉神经细胞对寿命的调控 | 第29-30页 |
| ·生殖信号对寿命的调控 | 第30页 |
| ·氧化损害和寿命 | 第30-33页 |
| 第二章 材料与仪器 | 第33-37页 |
| ·实验所用材料 | 第33-34页 |
| ·试剂与培养基的配制 | 第34-36页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第37-89页 |
| 第一节 CDC-42调控C.elegans早期胚胎发育极性以及对PAR蛋白定位的影响 | 第37-47页 |
| ·RNA干扰菌的构建 | 第37-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-45页 |
| ·cdc-42 RNAi载体构建 | 第39-41页 |
| ·对C.elegans野生型的cdc-42 RNA干扰 | 第41页 |
| ·cdc-42与PAR-2的关系 | 第41-42页 |
| ·cdc-42与PAR-3的关系 | 第42-43页 |
| ·cdc-42与PAR-5的关系 | 第43-44页 |
| ·cdc-42与PAR-6的关系 | 第44-45页 |
| ·干扰效率分析 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第二节 C.elegans CDC-42蛋白的原核表达、纯化以及Western blot分析 | 第47-58页 |
| ·实验方法 | 第47-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-56页 |
| ·cdc-42-PET表达菌的构建 | 第50-51页 |
| ·CDC-42重组蛋白表达条件优化 | 第51-52页 |
| ·蛋白纯化 | 第52页 |
| ·His-tag检测 | 第52-53页 |
| ·抗体效价测定 | 第53-54页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第54-55页 |
| ·Western blot分析 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 第三节 CDC-42在野生型和par突变体胚胎中的分布 | 第58-68页 |
| ·实验方法 | 第58页 |
| ·结果 | 第58-66页 |
| ·CDC-42在野生型N2)胚胎中的表达 | 第58-60页 |
| ·CDC-42在par-1突变体(KK288)胚胎中的表达 | 第60-61页 |
| ·CDC-42在par-2突变体(KK114)胚胎中的表达 | 第61-62页 |
| ·CDC-42在par-3突变体(KK237)胚胎中的表达 | 第62-63页 |
| ·CDC-42在par-4突变体(KK300)胚胎中的表达 | 第63-64页 |
| ·CDC-42在par-5突变体(KK299)胚胎中的表达 | 第64-65页 |
| ·CDC-42在par-6突变体(KK818)胚胎中的表达 | 第65-66页 |
| ·CDC-42在N2和par突变体胚胎中的中的表达量比较 | 第66页 |
| ·讨论 | 第66-68页 |
| 第四节 cdc-42对daf-2和daf-16突变体线虫寿命的影响 | 第68-79页 |
| ·寿命研究方法 | 第68-69页 |
| ·结果 | 第69-77页 |
| ·cdc-42 RNAi后对C.elegans虫体寿命的影响 | 第69-73页 |
| ·Western blot检测CDC-42在daf-16(-)和daf-2(-)突变体中的分布 | 第73页 |
| ·cdc-42 RNAi后DAF-16∷GFP,SOD-3∷GFP变化情况 | 第73-75页 |
| ·daf-2、daf-16突变体胚胎中CDC-42的表达 | 第75-77页 |
| ·讨论 | 第77-79页 |
| 第五节 免疫共沉淀研究CDC-42相互作用的蛋白 | 第79-89页 |
| ·实验方法 | 第79-81页 |
| ·结果与分析 | 第81-88页 |
| ·单向SDS-PAGE结果 | 第81-83页 |
| ·质谱分析及检索结果 | 第83-88页 |
| ·讨论 | 第88-89页 |
| 总结 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
