摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
第一章 引言 | 第12-15页 |
第二章 实验材料与仪器 | 第15-20页 |
·实验动物 | 第15页 |
·实验试剂 | 第15-19页 |
·主要购置试剂 | 第15-16页 |
·主要配置试剂 | 第16-19页 |
·实验仪器 | 第19-20页 |
第三章 实验方法 | 第20-30页 |
·RNA 干扰腺病毒载体的构建 | 第20页 |
·重组腺病毒载体转染效率的观察 | 第20-21页 |
·体内实验的分组 | 第21-22页 |
·实验动物体内CVS 模型的建立 | 第22-23页 |
·测定建立模型后Cx43 mRNA 及蛋白表达的变化 | 第23页 |
·脑基底动脉造影及血管直径的测量 | 第23页 |
·RT-PCR 技术测定Cx43 mRNA 表达的变化 | 第23-26页 |
·提取总RNA | 第23-24页 |
·总RNA 样品质量分析 | 第24页 |
·逆转录 | 第24-25页 |
·PCR 扩增 | 第25页 |
·配制1.596琼脂糖凝胶 | 第25-26页 |
·PCR 产物水平电泳 | 第26页 |
·观察结果并拍照 | 第26页 |
·Western blotting 技术测定Cx43 蛋白表达的变化 | 第26-29页 |
·总蛋白样品制备 | 第26页 |
·样品蛋白含量的测定 | 第26-27页 |
·配制5%积层胶及8%分离 | 第27页 |
·灌胶及上样 | 第27-28页 |
·垂直电泳 | 第28页 |
·转膜 | 第28页 |
·目标蛋白免疫反应 | 第28页 |
·目标蛋白化学发光及曝光 | 第28-29页 |
·膜再生 | 第29页 |
·内参蛋白免疫反应 | 第29页 |
·内参蛋白化学发光及曝光 | 第29页 |
·图像分析 | 第29页 |
·光镜下血管壁组织形态学观察的变化 | 第29页 |
·数据统计分析 | 第29-30页 |
第四章 实验结果 | 第30-35页 |
·RNA 干扰重组腺病毒载体的构建 | 第30页 |
·重组腺病毒载体转染效率的观察 | 第30-31页 |
·动物体内CVS 模型的建立 | 第31-32页 |
·建立模型后Cx43 mRNA 及蛋白表达的变化 | 第32页 |
·预处理组实验 | 第32-34页 |
·处理组实验 | 第34-35页 |
第五章 讨论 | 第35-41页 |
·蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛(CVS) | 第35页 |
·CVS 的研究仍存在的问题 | 第35-36页 |
·目前机制仍不明 | 第35-36页 |
·CVS 治疗的研究有很多,但无特效或存在争议 | 第36页 |
·我们的前期研究中存在的问题 | 第36页 |
·缝隙连接(GJ) | 第36-38页 |
·细胞GJ 的功能 | 第37页 |
·细胞GJ 功能的调节 | 第37-38页 |
·Cx43 表达在GJ 功能变化中的作用 | 第38页 |
·RNA 干扰(RNAi)技术及其应用 | 第38-39页 |
·Cx43 在CVS 中表达变化的机制及RNAi 防治CVS 的前景 | 第39-41页 |
第六章 结论 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-46页 |
附图 | 第46-56页 |
综述 | 第56-65页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第65页 |