致谢 | 第1-7页 |
前言 | 第7-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
缩写表 | 第14-15页 |
目次 | 第15-18页 |
第一部分 文献综述 | 第18-42页 |
1.AMPK激酶的研究概述 | 第20页 |
2.AMPK激酶的结构与活性调节 | 第20-24页 |
3.AMPK激酶在生物体内的功能 | 第24-28页 |
4.AMPK的上游激酶 | 第28-29页 |
5.AMPK的下游底物 | 第29-30页 |
6.LKB1-AMPK-TSC途径 | 第30-31页 |
7.展望 | 第31-33页 |
参考文献 | 第33-42页 |
第二部分 研究内容 | 第42-102页 |
第一章 AMPKα基因在卤虫中的分子克隆和表达特征分析 | 第44-78页 |
1.引言 | 第44-46页 |
2.材料 | 第46-47页 |
·实验材料 | 第46页 |
·主要试剂 | 第46-47页 |
·主要仪器 | 第47页 |
3.方法 | 第47-61页 |
·总RNA的提取 | 第47-48页 |
·3'RACE cDNA的合成 | 第48页 |
·卤虫AMPKα基因的分子克隆 | 第48-55页 |
·Northern blotting分析 | 第55-57页 |
·半定量RT-PCR | 第57-59页 |
·AMPKα基因组上拷贝数分析 | 第59-61页 |
4.结果 | 第61-72页 |
·卤虫AMPKα基因的分子克隆与分子特征分析 | 第61-64页 |
·Northern blotting结果 | 第64-65页 |
·Afr-AMPKalphal在发育过程中的表达 | 第65-68页 |
·Afr-AMPKa1pha1在应激情况下的表达 | 第68-70页 |
·AMPKα基因组上的拷贝数分析 | 第70-72页 |
5.讨论 | 第72-75页 |
参考文献 | 第75-78页 |
第二章 卤虫AMPK的功能研究 | 第78-100页 |
1.引言 | 第78-80页 |
2.材料 | 第80-81页 |
·实验材料 | 第80页 |
·主要试剂 | 第80页 |
·主要仪器 | 第80-81页 |
3.方法 | 第81-86页 |
·总蛋白质的提取 | 第81页 |
·Western blotting | 第81-82页 |
·胚胎整体免疫组化 | 第82-83页 |
·细胞核和细胞质蛋白的分离 | 第83-84页 |
·细胞核的抽提 | 第84页 |
·细胞核的免疫荧光分析 | 第84-85页 |
·细胞内ATP,AMP,和ATP的抽提 | 第85页 |
·HPLC测定细胞内ATP,AMP和ATP含量 | 第85-86页 |
4.结果 | 第86-94页 |
·AMPK在发育过程中的磷酸化研究 | 第86-87页 |
·磷酸化的AMPK在发育过程中的组织定位 | 第87-88页 |
·AMPK的在细胞内的定位 | 第88-90页 |
·AMPK的磷酸化与AMP:ATP的关系研究 | 第90-94页 |
5.讨论 | 第94-97页 |
参考文献 | 第97-100页 |
第三章 结论与展望 | 第100-102页 |
1.结论 | 第100-101页 |
2.展望 | 第101-102页 |
第三部分 本研究的创新点 | 第102-106页 |
第四部分 附录 | 第106-130页 |
附录一 硕士阶段部分工作 | 第108-124页 |
附录二 常用试剂配制一览表 | 第124-130页 |
作者简历 | 第130-131页 |