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耐辐射球菌deinoxanthin代谢关键酶CrtI和逆境压力保护蛋白Dps-2鉴定与功能研究

致谢第1-8页
摘要第8-10页
ABSTRACT第10-17页
缩略词第17-18页
1 文献综述第18-60页
   ·耐辐射球菌研究进展第19-38页
     ·耐辐射球菌的特征第19-21页
     ·耐辐射球菌基因组学研究进展第21-23页
     ·转录组学和蛋白质组学研究进展第23-25页
     ·耐辐射球菌极端抗性机制研究进展第25-34页
       ·基因组冗余第26页
       ·特殊的染色体结构第26-27页
       ·DNA降解和损伤DNA的外排第27-28页
       ·DNA损伤修复系统第28-31页
       ·高效的抗氧化保护机制第31-34页
     ·小结与展望第34页
     ·参考文献第34-38页
   ·类胡萝卜素功能和微生物中色素合成酶研究综述第38-48页
     ·类胡萝卜素功能研究进展第38-40页
       ·β-胡萝卜素(β-carotene)第38-39页
       ·番茄红素(lycopene)第39-40页
     ·微生物体内类胡萝卜素合成酶研究进展第40-44页
       ·GGPP合成酶(GGPS)第41-42页
       ·八氢番茄红素合成酶(PSY)第42页
       ·八氢番茄红素脱饱和酶(PDS)第42-44页
     ·小结与展望第44-45页
     ·参考文献第45-48页
   ·逆境压力保护蛋白Dps的研究综述第48-60页
     ·DNA结合功能研究第48-52页
     ·铁氧化酶和金属离子结合活性第52-55页
     ·Dps蛋白的调控机理研究第55-56页
     ·小结与展望第56-57页
     ·参考文献第57-60页
2 耐辐射球菌deinoxanthin色素功能及其合成酶CrtI研究第60-104页
   ·耐辐射球菌类胡萝卜素deinoxanthin的分离和功能研究第61-69页
     ·前言第61-62页
     ·材料和方法第62-63页
       ·菌株、试剂和仪器第62页
       ·类胡萝卜素deinoxanthin的提取和鉴定第62页
       ·类胡萝卜素deinoxanthin的分离纯化第62-63页
       ·deinoxanthin自由基清除能力分析第63页
       ·deinoxanthin体外DNA保护功能分析第63页
     ·结果与分析第63-68页
       ·耐辐射球菌类胡萝卜素分析第63-64页
       ·耐辐射球菌deinoxanthin分离和纯化第64-65页
       ·deinoxanthin自由基清除能力分析第65-66页
       ·deinoxanthin体外DNA保护功能鉴定第66-68页
     ·小结与讨论第68页
     ·参考文献第68-69页
   ·耐辐射球菌类胡萝卜素合成酶的生物信息学分析第69-77页
     ·引言第69页
     ·材料和方法第69-70页
       ·数据来源第69-70页
       ·研究方法第70页
     ·结果与分析第70-76页
       ·DR0861序列特征分析第70-71页
       ·基因密码子偏好性分析第71页
       ·DR861基因启动子预测第71-72页
       ·DR0861蛋白结构域搜索和分析第72-73页
       ·多序列同源比对和活性位点分析第73-74页
       ·DR0861蛋白进化树构建和分析第74-76页
     ·小结与讨论第76页
     ·参考文献第76-77页
   ·耐辐射球菌DR0861基因功能研究第77-92页
     ·引言第77页
     ·材料和方法第77-82页
       ·供试菌株、试剂和仪器第77-78页
       ·突变株的构建和转化第78-80页
       ·补偿菌株和过表达菌株的构建第80页
       ·高效液相色谱(HPLC)分析第80页
       ·光照对菌落生长影响第80-81页
       ·~(60)Co电离辐射处理第81页
       ·过氧化氢(H_2O_2)处理第81页
       ·过氧化氢酶(catalase)活性染色检测第81-82页
       ·细胞蛋白提取物抗氧化能力检测第82页
     ·结果与分析第82-90页
       ·DR0861突变株构建和鉴定第82-83页
       ·补偿和过表达菌株的鉴定第83-84页
       ·DR0861基因突变对类胡萝卜素代谢的影响第84-86页
       ·DR0861基因缺失影响细胞生长第86页
       ·电离辐射处理对菌体存活率影响第86-87页
       ·H_2O_2处理对菌体生存率影响第87-89页
       ·DR0861缺失对过氧化氢酶活性的影响第89页
       ·DR0861突变对细胞自由基清除能力的影响第89-90页
     ·小结与讨论第90-91页
     ·参考文献第91-92页
   ·耐辐射球菌类胡萝卜素合成酶DR0861生化功能研究第92-104页
     ·引言第92页
     ·材料和方法第92-96页
       ·菌株和质粒第92-93页
       ·试剂和仪器第93页
       ·基因克隆和表达质粒构建第93-94页
       ·DR0861蛋白表达第94页
       ·DR0861目的蛋白纯化第94页
       ·DR0861蛋白体外活性分析第94-95页
       ·大肠杆菌双质粒共表达工程菌的构建第95页
       ·大肠杆菌工程菌类胡萝卜素的合成分析第95页
       ·大肠杆菌体内类胡萝卜素的功能研究第95-96页
     ·结果与分析第96-102页
       ·DR0861表达质粒鉴定第96页
       ·DR0861蛋白表达和纯化第96-97页
       ·DR0861蛋白体内催化活性鉴定第97-99页
       ·DR0861蛋白体外脱氢酶活性分析第99页
       ·工程菌体内类胡萝卜素功能研究第99-101页
       ·大肠杆菌体内类胡萝卜素定量分析第101-102页
     ·小结与讨论第102页
     ·参考文献第102-104页
3 耐辐射球菌逆境保护蛋白Dps-2的鉴定和功能研究第104-139页
   ·耐辐射球菌Dps-2生物信息学分析第105-112页
     ·引言第105页
     ·材料和方法第105页
     ·结果与分析第105-111页
       ·序列特征分析第105-106页
       ·Dps-2蛋白结构域分析第106-108页
       ·多序列同源比对第108-109页
       ·Dps-2蛋白进化分析第109-111页
     ·小结与讨论第111页
     ·参考文献第111-112页
   ·耐辐射球菌dps-2基因功能分析第112-125页
     ·引言第112页
     ·材料与方法第112-115页
       ·菌株和质粒第112页
       ·实验仪器第112-113页
       ·dps单突变和双突变菌株构建第113页
       ·补偿菌株构建第113-114页
       ·菌株生长曲线测定第114页
       ·逆境压力处理方法第114页
       ·细胞内金属离子含量测定第114-115页
       ·过氧化氢酶(catalase)活性检测第115页
       ·细胞抗氧化能力检测第115页
     ·结果与分析第115-123页
       ·dps基因突变株的鉴定第115-117页
       ·补偿质粒的鉴定第117页
       ·dps-2基因缺失影响细胞生长第117-118页
       ·逆境压力影响细胞生存率第118-120页
       ·dps-2缺失影响细胞过氧化氢酶活性第120-121页
       ·dps-2突变降低细胞自由基清除能力第121-122页
       ·dps-2缺失对细胞内金属含量的影响第122-123页
     ·小结与讨论第123-124页
     ·参考文献第124-125页
   ·耐辐射球菌Dps-2蛋白生化特性研究第125-139页
     ·引言第125-126页
     ·材料与方法第126-128页
       ·菌株、质粒和试剂第126页
       ·基因克隆、表达与纯化第126页
       ·Dps-2蛋白热稳定性分析第126-127页
       ·Dps-2多聚体形态分析第127页
       ·Dps-2亚铁氧化酶(ferroxidase)活性分析第127页
       ·Dps-2蛋白促铁代谢动力学分析第127页
       ·体外DNA结合能力分析第127-128页
       ·体外DNA保护功能分析第128页
     ·实验结果与分析第128-137页
       ·表达质粒鉴定第128-129页
       ·Dps-2表达和纯化第129页
       ·温度对Dps-2蛋白稳定性影响第129-130页
       ·Dps-2蛋白多聚体形态鉴定第130-132页
       ·亚铁氧化酶(ferroxidase)活性染色鉴定第132页
       ·Dps-2蛋白促铁氧化动力学分析第132-133页
       ·Dps-2蛋白DNA结合功能分析第133-136页
       ·体外DNA保护功能分析第136-137页
     ·小结与讨论第137-138页
     ·参考文献第138-139页
4 结论第139-142页
作者简历和科研成果第142页

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