| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-28页 |
| ·引言 | 第10页 |
| ·定向进化研究进展 | 第10-18页 |
| ·定向进化的概念与内容 | 第10-11页 |
| ·定向进化策略 | 第11-17页 |
| ·定向进化技术的应用与前景 | 第17-18页 |
| ·细胞色素P450 BM—3的定向进化 | 第18-22页 |
| ·细胞色素P450概述 | 第18-19页 |
| ·P450 BM—3概述 | 第19-20页 |
| ·P450 BM-3的定向进化 | 第20-22页 |
| ·靛蓝类色素类化合物的性质及其生产工艺研究 | 第22-26页 |
| ·靛蓝 | 第22-23页 |
| ·靛玉红 | 第23-24页 |
| ·靛玉红的生物学作用 | 第24页 |
| ·靛玉红的生产与提取工艺 | 第24-26页 |
| ·本课题研究思路及目标 | 第26-28页 |
| 第二章 细胞色素P450 BM-3饱和突变文库的构建 | 第28-37页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·材料与方法 | 第28-34页 |
| ·试剂与材料 | 第28-29页 |
| ·培养基 | 第29-30页 |
| ·实验仪器 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-36页 |
| ·饱和定点突变PCR反应 | 第34-35页 |
| ·饱和突变文库的构建 | 第35-36页 |
| ·小结 | 第36-37页 |
| 第三章 细胞色素P450 BM-3易错PCR突变文库构建 | 第37-49页 |
| ·引言 | 第37-38页 |
| ·材料与方法 | 第38-43页 |
| ·试剂与材料 | 第38-39页 |
| ·培养基 | 第39页 |
| ·主要实验仪器 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-48页 |
| ·易错PCR反应体系优化 | 第43-45页 |
| ·易错PCR产物与共表达载体的双酶切反应及连接反应 | 第45-47页 |
| ·突变文库的构建 | 第47-48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 第四章 细胞色素P450 BM-3突变文库的筛选及产物分析 | 第49-57页 |
| ·引言 | 第49页 |
| ·材料与方法 | 第49-51页 |
| ·试剂与材料 | 第49页 |
| ·培养基 | 第49页 |
| ·实验仪器 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-56页 |
| ·突变文库的筛选 | 第51-52页 |
| ·突变酶吲哚羟基化产物分析 | 第52-55页 |
| ·DNA测序 | 第55-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 第五章 突变酶D168R、D168W酶学性质初探 | 第57-72页 |
| ·引言 | 第57页 |
| ·材料与方法 | 第57-61页 |
| ·试剂与材料 | 第57页 |
| ·实验仪器 | 第57-58页 |
| ·实验方法 | 第58-61页 |
| ·结果与讨论 | 第61-71页 |
| ·突变酶P450 BM-3的分离纯化 | 第61-65页 |
| ·突变酶催化吲哚羟基化反应活力及动力学特征分析 | 第65-67页 |
| ·突变酶电子耦合率分析 | 第67-68页 |
| ·突变酶催化产物组成测定 | 第68-69页 |
| ·pH对突变酶羟基化反应的影响 | 第69页 |
| ·突变酶最适反应温度及热稳定性测定 | 第69-71页 |
| ·本章小结 | 第71-72页 |
| 第六章 结论与展望 | 第72-75页 |
| ·结论 | 第72-73页 |
| ·本论文创新之处 | 第73-74页 |
| ·展望 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
