| 中文摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-23页 |
| 1 核糖体蛋白L11 | 第12-16页 |
| ·核糖体蛋白L11的结构 | 第12-13页 |
| ·核糖体蛋白L11的功能 | 第13-15页 |
| ·真核生物中有关L11的研究 | 第15-16页 |
| 2 第一类肽链释放因子 | 第16-18页 |
| ·第一类肽链释放因子的结构 | 第16页 |
| ·第一类肽链释放因子的功能 | 第16-18页 |
| 3 实验材料 | 第18-21页 |
| ·八肋游仆虫 | 第18-19页 |
| ·纤毛虫遗传密码子的变异 | 第19页 |
| ·纤毛虫作为分子生物学实验动物的优势及意义 | 第19-21页 |
| 4 工作的背景与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 八肋游仆虫核糖体蛋白L11基因的克隆与序列分析 | 第23-37页 |
| 1 材料 | 第23-25页 |
| ·菌株与质粒 | 第23页 |
| ·主要的工具酶及生化试剂 | 第23页 |
| ·寡聚核苷酸 | 第23-24页 |
| ·主要试剂的配制 | 第24页 |
| ·主要实验仪器 | 第24-25页 |
| 2 方法 | 第25-31页 |
| ·细胞的培养 | 第25页 |
| ·大核DNA的提取 | 第25页 |
| ·L11基因的扩增 | 第25-31页 |
| 3 结果 | 第31-36页 |
| ·保守片段的扩增 | 第31-32页 |
| ·5′端编码序列的扩增 | 第32-33页 |
| ·3′端编码序列的扩增 | 第33-35页 |
| ·测序结果 | 第35-36页 |
| 4 序列分析 | 第36-37页 |
| 第三章 八肋游仆虫核糖体蛋白L11的表达、纯化及多克隆抗体的制备 | 第37-56页 |
| 1 材料 | 第37-40页 |
| ·菌株与质粒 | 第37页 |
| ·主要的工具酶及试剂 | 第37-38页 |
| ·寡聚核苷酸 | 第38页 |
| ·主要试剂的配制 | 第38-39页 |
| ·主要实验仪器 | 第39-40页 |
| 2 方法 | 第40-47页 |
| ·重组表达质粒pGEX-6p-1-L11的构建 | 第40-42页 |
| ·含重组表达质粒pGEX-6p-1-L11工程菌的诱导表达 | 第42-44页 |
| ·融合蛋白GST-L11的纯化 | 第44-45页 |
| ·抗原的制备 | 第45页 |
| ·大鼠免疫 | 第45-46页 |
| ·ELISA检测抗体的效价 | 第46页 |
| ·八肋游仆虫蛋白提取物的免疫印迹 | 第46-47页 |
| 3 结果 | 第47-55页 |
| ·重组表达质粒pGEX-6p-1-L11的筛选和酶切鉴定 | 第47-48页 |
| ·重组表达质粒pGEX-6p-1-L11在E.coli BL21(DE3)中的表达 | 第48-52页 |
| ·Western blot分析 | 第52-53页 |
| ·融合蛋白GST-L11的纯化 | 第53页 |
| ·抗原的制备 | 第53-54页 |
| ·抗体的滴度测定 | 第54页 |
| ·抗体的特异性检测 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-56页 |
| 第四章 八肋游仆虫核糖体蛋白L11与第一类肽链释放因子eRF1a的体外相互用 | 第56-61页 |
| 1 材料 | 第56-57页 |
| ·菌株与质粒 | 第56页 |
| ·主要的酶及生化试剂 | 第56页 |
| ·主要试剂的配制 | 第56-57页 |
| 2 方法 | 第57-58页 |
| ·融合蛋白GST-L11的表达 | 第57页 |
| ·融合蛋白His-eRF1a的表达 | 第57页 |
| ·八肋游仆虫L11与eRF1a的体外相互作用的Pull down分析 | 第57-58页 |
| 3 结果 | 第58-59页 |
| ·以GS4B亲和层析柱进行的Pull down分析 | 第58页 |
| ·以Ni~(2+)-NTA亲和层析柱进行的Pull down分析 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 小结与展望 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 略语表 | 第70-71页 |
| 附录 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
