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青霉菌灭活菌丝体诱导的烟草抑制消减杂交cDNA表达文库的构建

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 文献综述第8-18页
 1 烟草及卷烟概述第8-10页
 2 烟草抗病研究第10-11页
   ·烟草基因组计划第10-11页
   ·烟草抗性研究第11页
 3 其他植物抗病研究第11-13页
   ·植物病程相关蛋白研究进展第11-12页
   ·植物抗病基因研究进展第12页
   ·植物几丁质酶研究进展第12-13页
 4 SMART方法第13-14页
 5 SSH方法第14-17页
 6 研究青霉菌灭活菌丝体处理的烟草抑制消减cDNA文库的构建的分子生物学机制的目的与意义第17-18页
第二章 材料与方法第18-31页
 1 材料及试剂第18页
   ·材料第18页
   ·主要试剂、仪器第18页
 2 方法第18-31页
   ·cDNA的合成及纯化第18-22页
   ·抑制消减杂交第22-27页
   ·消减cDNA文库的构建第27-28页
   ·消减cDNA文库的质量分析第28-29页
   ·DNA序列测定与分析第29-31页
第三章 结果与分析第31-47页
 1 cDNA的合成第31-33页
   ·总RNA提取第31页
   ·cDNA第一链合成最佳循环数确定第31-32页
   ·cDNA柱纯化第32-33页
 2 抑制消减杂交第33-34页
   ·cDNA酶切第33-34页
   ·抑制消减杂交两轮PCR后结果第34页
 3 抑制消减文库的构建第34-35页
 4 质粒提取与鉴定第35-36页
 5 测序与同源比对结果第36-41页
 6 硝酸还原酶及谷胱甘肽过氧化物酶序列分析第41-47页
   ·硝酸还原酶序列分析及Gene Ontology功能分析结果第41-44页
   ·谷胱甘肽过氧化物酶序列分析及Gene Ontology功能分析结果第44-47页
第四章 讨论第47-50页
 1 青霉菌灭活菌丝体处理时间选择第47页
 2 烟叶品种和烟苗时期的选择第47页
 3 筛选到的基因功能及应用第47-49页
 4 硝酸还原酶和谷胱甘肽过氧化物酶序列分析第49页
 5 抑制消减杂交方法的应用第49-50页
第五章 结论与展望第50-51页
 1 成功构建了一个青霉菌灭活菌丝体处理的烟叶抑制消减文库第50页
 2 筛选出了部分与细胞保护和抗病相关的特异表达基因第50页
 3 展望第50-51页
附录一:BLASTN同源性比较结果第51-55页
附录二:BALSTX同源性比较第55-59页
参考文献第59-62页
硕士期间发表论文第62-63页
致谢第63页

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