摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-18页 |
1 烟草及卷烟概述 | 第8-10页 |
2 烟草抗病研究 | 第10-11页 |
·烟草基因组计划 | 第10-11页 |
·烟草抗性研究 | 第11页 |
3 其他植物抗病研究 | 第11-13页 |
·植物病程相关蛋白研究进展 | 第11-12页 |
·植物抗病基因研究进展 | 第12页 |
·植物几丁质酶研究进展 | 第12-13页 |
4 SMART方法 | 第13-14页 |
5 SSH方法 | 第14-17页 |
6 研究青霉菌灭活菌丝体处理的烟草抑制消减cDNA文库的构建的分子生物学机制的目的与意义 | 第17-18页 |
第二章 材料与方法 | 第18-31页 |
1 材料及试剂 | 第18页 |
·材料 | 第18页 |
·主要试剂、仪器 | 第18页 |
2 方法 | 第18-31页 |
·cDNA的合成及纯化 | 第18-22页 |
·抑制消减杂交 | 第22-27页 |
·消减cDNA文库的构建 | 第27-28页 |
·消减cDNA文库的质量分析 | 第28-29页 |
·DNA序列测定与分析 | 第29-31页 |
第三章 结果与分析 | 第31-47页 |
1 cDNA的合成 | 第31-33页 |
·总RNA提取 | 第31页 |
·cDNA第一链合成最佳循环数确定 | 第31-32页 |
·cDNA柱纯化 | 第32-33页 |
2 抑制消减杂交 | 第33-34页 |
·cDNA酶切 | 第33-34页 |
·抑制消减杂交两轮PCR后结果 | 第34页 |
3 抑制消减文库的构建 | 第34-35页 |
4 质粒提取与鉴定 | 第35-36页 |
5 测序与同源比对结果 | 第36-41页 |
6 硝酸还原酶及谷胱甘肽过氧化物酶序列分析 | 第41-47页 |
·硝酸还原酶序列分析及Gene Ontology功能分析结果 | 第41-44页 |
·谷胱甘肽过氧化物酶序列分析及Gene Ontology功能分析结果 | 第44-47页 |
第四章 讨论 | 第47-50页 |
1 青霉菌灭活菌丝体处理时间选择 | 第47页 |
2 烟叶品种和烟苗时期的选择 | 第47页 |
3 筛选到的基因功能及应用 | 第47-49页 |
4 硝酸还原酶和谷胱甘肽过氧化物酶序列分析 | 第49页 |
5 抑制消减杂交方法的应用 | 第49-50页 |
第五章 结论与展望 | 第50-51页 |
1 成功构建了一个青霉菌灭活菌丝体处理的烟叶抑制消减文库 | 第50页 |
2 筛选出了部分与细胞保护和抗病相关的特异表达基因 | 第50页 |
3 展望 | 第50-51页 |
附录一:BLASTN同源性比较结果 | 第51-55页 |
附录二:BALSTX同源性比较 | 第55-59页 |
参考文献 | 第59-62页 |
硕士期间发表论文 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |