| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-34页 |
| 1 细胞因子研究进展 | 第11-16页 |
| ·细胞因子的概念与分类 | 第11页 |
| ·细胞因子的生物学活性 | 第11-14页 |
| ·细胞因子的共同特性 | 第14-16页 |
| 2 白细胞介素 | 第16-19页 |
| ·白细胞介素的命名与种类 | 第17页 |
| ·生物学活性 | 第17-19页 |
| 3 白细胞介素2 概述 | 第19-21页 |
| ·IL-2 的分子结构 | 第20页 |
| ·IL-2 的生物学功能 | 第20-21页 |
| 4 禽类IL-2 的研究进展 | 第21-32页 |
| ·IL-2 的诱生 | 第21-23页 |
| ·禽类IL-2 的基因及其克隆 | 第23-26页 |
| ·IL-2 基因表达 | 第26-27页 |
| ·IL-2 基因表达产物的纯化 | 第27-28页 |
| ·IL-2 的生物活性 | 第28-29页 |
| ·IL-2 在畜禽业中的应用前景 | 第29-32页 |
| 5 本项目研究的意义 | 第32-34页 |
| 第二章 番鸭IL-2 基因的克隆与序列分析 | 第34-55页 |
| 1 材料 | 第34-36页 |
| ·实验动物 | 第34页 |
| ·质粒和菌株 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第34页 |
| ·主要溶液的配制 | 第34-36页 |
| 2 方法 | 第36-43页 |
| ·引物设计与合成 | 第36页 |
| ·番鸭脾淋巴细胞的分离与诱导培养 | 第36-37页 |
| ·细胞总RNA 的提取 | 第37页 |
| ·番鸭IL-2 基因的RT-PCR | 第37-39页 |
| ·PCR 产物目的片段的回收与纯化 | 第39页 |
| ·感受态细胞的制备（氯化钙法） | 第39-40页 |
| ·IL-2 cDNA 与 pMD18T 的连接及转化 | 第40页 |
| ·重组质粒少量提取 | 第40-41页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第41-42页 |
| ·阳性TA 克隆菌株的序列测定与分析 | 第42页 |
| ·番鸭IL-2 基因序列的同源性比较 | 第42页 |
| ·各种动物IL-2 基因推导的氨基酸序列比较 | 第42-43页 |
| ·番鸭IL-2 分子二级结构的初步预测 | 第43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-51页 |
| ·番鸭IL-2 基因RT-PCR 扩增结果 | 第43页 |
| ·重组质粒 pMD18T/IL-2 的鉴定 | 第43-45页 |
| ·重组质粒 pMD18T/IL2 的序列测定结果 | 第45-49页 |
| ·番鸭IL-2 基因序列与其他动物IL-2 基因序列的同源性比较 | 第49页 |
| ·各种动物IL-2 基因推导的氨基酸序列比较分析 | 第49-51页 |
| ·番鸭IL-2 基因二级结构预测分析 | 第51页 |
| 4 讨论 | 第51-55页 |
| ·IL-2 基因克隆的条件 | 第51-53页 |
| ·IL-2 序列分析与二级结构预测 | 第53-55页 |
| 第三章 番鸭IL-2 基因的原核表达 | 第55-68页 |
| 1 材料 | 第55-56页 |
| ·质粒和菌株 | 第55页 |
| ·工具酶和相关试剂 | 第55页 |
| ·实验仪器 | 第55页 |
| ·主要试剂的配制 | 第55-56页 |
| 2 方法 | 第56-60页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第56-57页 |
| ·表达载体的鉴定 | 第57-58页 |
| ·重组表达质粒 pGEX-IL2 在大肠杆菌中的表达 | 第58-59页 |
| ·表达产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）鉴定 | 第59页 |
| ·诱导表达时间的优化 | 第59页 |
| ·IPTG 最佳诱导浓度的确定 | 第59页 |
| ·最佳诱导温度的确定 | 第59-60页 |
| ·表达蛋白的纯化 | 第60页 |
| 3 结果与分析 | 第60-65页 |
| ·表达载体鉴定结果 | 第60-61页 |
| ·pGEX-IL2 融合蛋白的表达 | 第61-64页 |
| ·pGEX-IL2 融合蛋白的表达形式 | 第64-65页 |
| 4 讨论 | 第65-68页 |
| ·表达产物的分布 | 第65页 |
| ·表达载体对表达的产量及生物学活性影响 | 第65-66页 |
| ·蛋白诱导表达的条件 | 第66-67页 |
| ·表达蛋白的纯化 | 第67-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
