摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-12页 |
1 绪论 | 第12-23页 |
·多种途径影响植物的成花转变 | 第12-13页 |
·春化作用相关基因FLC 的表达调控 | 第13-17页 |
·自主途径(Autonomous Pathway) | 第14页 |
·PAF1 复合体(PAF1complex) | 第14-15页 |
·SWR1 复合体(SWR1 complex) | 第15页 |
·FRI 依赖途径(FRI complex) | 第15-16页 |
·春化作用途径(Vernalization pathway ) | 第16-17页 |
·影响FLC 表达的其它基因 | 第17页 |
·拟南芥中的天然早花突变体 | 第17-19页 |
·芸苔属中FLC 及天然早花突变体的研究进展 | 第19-20页 |
·研究的目的与内容 | 第20-23页 |
·研究的目的、意义 | 第20-21页 |
·本文研究的主要内容 | 第21-22页 |
·本文的特色与创新之处 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-41页 |
·材料 | 第23-26页 |
·植物材料 | 第23页 |
·质粒载体与菌株 | 第23页 |
·主要仪器设备 | 第23-24页 |
·主要分子生物学试剂和试剂盒 | 第24页 |
·各种试剂及培养基的配制 | 第24-26页 |
·实验方法 | 第26-29页 |
·种植、样品处理及采集 | 第26-27页 |
·红菜苔和白菜总RNA 提取 | 第27页 |
·红菜苔基因组DNA 提取 | 第27-28页 |
·JM109 感受态细胞的制备—CaC12 法 | 第28页 |
·小量碱裂解法提取质粒DNA | 第28-29页 |
·核酸的电泳及纯度、浓度测定 | 第29页 |
·BrpFLC 基因cDNA 及其它春化作用相关基因的克隆 | 第29-32页 |
·引物设计 | 第29-30页 |
·RNA 的提取 | 第30页 |
·反转录(RT) | 第30页 |
·PCR 扩增 | 第30页 |
·PCR 产物的回收和纯化 | 第30-31页 |
·PCR 产物的转化 | 第31页 |
·阳性转化子的鉴定 | 第31-32页 |
·红菜苔BrpFLC 及其它春化作用相关基因序列的分析 | 第32页 |
·BrpFLC 启动子及其内含子I 的克隆 | 第32-34页 |
·引物设计 | 第32-33页 |
·DNA 的提取 | 第33页 |
·BrpFLC1 和BrpFLC2 内含子I、BrpFLC2 启动子的克隆、测序及分析 | 第33页 |
·BrpFRI 的克隆、测序及分析 | 第33-34页 |
·红菜苔BrpFLC 及其它春化作用相关基因表达模式的研究 | 第34-36页 |
·Northern 探针的制备 | 第34页 |
·Northern 杂交 | 第34-35页 |
·半定量RT-PCR | 第35-36页 |
·RNAi 沉默载体的构建 | 第36-41页 |
3 结果与分析 | 第41-73页 |
·BrpFLC 基因cDNA 的克隆及其序列分析 | 第41-54页 |
·BrpFLC1 基因cDNA 的克隆及序列分析 | 第41-45页 |
·BrpFLC2 和BrpFLC3 基因cDNA 的克隆和序列分析 | 第45-48页 |
·BrpFLC2 和BrpFLC3 基因cDNA 编码氨基酸序列分析 | 第48-53页 |
·小结 | 第53-54页 |
·BrpFLC 的表达模式的研究 | 第54-57页 |
·BrpFLC 在红菜苔不同组织中的表达 | 第54-55页 |
·春化作用抑制BrpFLC 的表达 | 第55页 |
·红菜苔中春化作用相关基因的克隆及其与春化作用的关系 | 第55-56页 |
·小结 | 第56-57页 |
·红菜苔天然早花突变分子机理的研究 | 第57-67页 |
·红菜苔开花时间研究 | 第57-58页 |
·BrpFLC1 在红菜苔中的剪切紊乱是红菜苔早花突变的主要原因 | 第58-61页 |
·植物开花关键基因FLC 在红菜苔和白菜中的表达差异 | 第61-62页 |
·BrpFLC 启动子区及内含子I 的扩增 | 第62-65页 |
·从红菜苔中克隆BrpFRI 的部分序列 | 第65-67页 |
·小结 | 第67页 |
·红菜苔春化作用关键基因BrpVIN3 片段的克隆及其RNAi 载体的构建 | 第67-73页 |
·红菜苔春化作用关键基因BrpVIN3 片段的克隆 | 第68-69页 |
·红菜苔春化作用关键基因BrpVIN3 RNAi 载体的构建 | 第69-71页 |
·小结 | 第71-73页 |
4 结论与展望 | 第73-76页 |
·主要结论 | 第73-74页 |
·后续研究工作的建议及展望 | 第74-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-83页 |
附录 | 第83-85页 |
A. pBIN19-VIN3 测序结果 | 第83-84页 |
B. 红菜苔 FLC1 第五到第七个外显子之间 DNA 序列测序结果 | 第84-85页 |
C. 在攻读学位期间发表的论文目录 | 第85页 |