鸡生长与免疫抑制综合征病毒单克隆抗体的制备和免疫组化法的建立
| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.病毒性免疫抑制病的研究进展 | 第10-16页 |
| ·传染性法氏囊病 | 第10页 |
| ·致病机理 | 第10页 |
| ·免疫抑制的表现 | 第10页 |
| ·马立克氏病 | 第10-11页 |
| ·致病机理 | 第10-11页 |
| ·免疫抑制的表现 | 第11页 |
| ·鸡传染性贫血 | 第11-12页 |
| ·致病机理 | 第11-12页 |
| ·免疫抑制的表现 | 第12页 |
| ·禽白血病 | 第12-13页 |
| ·致病机理 | 第12页 |
| ·免疫抑制的表现 | 第12-13页 |
| ·网状内皮组织增生病 | 第13页 |
| ·致病机理 | 第13页 |
| ·免疫抑制的表现 | 第13页 |
| ·病毒性免疫抑制病的现状 | 第13-14页 |
| ·病毒性免疫抑制病的普遍性和严重性 | 第13-14页 |
| ·病毒性免疫抑制病的多重感染 | 第14页 |
| ·免疫抑制的解除 | 第14-16页 |
| 2.鸡生长与免疫抑制综合征研究进展 | 第16-17页 |
| ·流行病学和临床症状 | 第16页 |
| ·病毒的结构形态 | 第16页 |
| ·病毒鉴定 | 第16-17页 |
| ·病毒检测方法的建立 | 第17页 |
| 3.单克隆抗体技术 | 第17-20页 |
| ·单克隆抗体的特点 | 第17-18页 |
| ·单克隆抗体的现状 | 第18页 |
| ·单克隆抗体在畜禽病毒性疾病中的应用 | 第18-20页 |
| ·单克隆抗体对病毒抗原结构与抗原表位的研究 | 第18-19页 |
| ·单克隆抗体在畜禽病毒性传染病诊断中的应用 | 第19页 |
| ·单克隆抗体在抗病毒感染方面的应用 | 第19-20页 |
| 引言 | 第20-22页 |
| 第二部分 单克隆抗体的制备 | 第22-36页 |
| 1.材料和方法 | 第22-28页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·病毒和抗体 | 第22页 |
| ·试验动物和细胞 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| ·所需试剂的配制 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-28页 |
| ·病毒的繁殖与纯化 | 第23页 |
| ·免疫抗原的制备 | 第23-24页 |
| ·Balb/c小鼠免疫 | 第24页 |
| ·间接ELISA方法的建立 | 第24-25页 |
| ·免疫小鼠的效价测定 | 第25页 |
| ·单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 | 第25-27页 |
| ·单克隆抗体腹水的制备 | 第27页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第27-28页 |
| 2.结果与分析 | 第28-33页 |
| ·病毒的纯化 | 第28页 |
| ·间接ELISA方法的建立 | 第28-30页 |
| ·最佳抗原包被浓度和酶浓度 | 第28页 |
| ·最佳抗原包被时间 | 第28-29页 |
| ·最佳封闭时间 | 第29页 |
| ·最佳二抗作用时间 | 第29-30页 |
| ·免疫小鼠的抗体效价 | 第30页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第30-31页 |
| ·腹水的制备 | 第31-32页 |
| ·细胞培养液上清和腹水效价测定 | 第32-33页 |
| 3.讨论 | 第33-36页 |
| ·酶标板的选择和洗涤 | 第33页 |
| ·小鼠免疫 | 第33页 |
| ·细胞融合 | 第33-34页 |
| ·细胞株的筛选 | 第34页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆和冻存 | 第34页 |
| ·杂交瘤细胞的复苏 | 第34-36页 |
| 第三部分 单克隆抗体的鉴定 | 第36-43页 |
| 1.材料与方法 | 第36-39页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·病毒和抗体 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·所需试剂的配制 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-39页 |
| ·单克隆抗体亚类的鉴定 | 第38页 |
| ·单克隆抗体特异性鉴定 | 第38-39页 |
| 2.结果与分析 | 第39-41页 |
| ·单克隆抗体亚类的鉴定 | 第39-40页 |
| ·单克隆抗体与其它病毒的交叉反应 | 第40页 |
| ·单克隆抗体的WESTERN-BLOT结果 | 第40-41页 |
| 3.讨论 | 第41-43页 |
| ·亚类鉴定 | 第41页 |
| ·特异性鉴定 | 第41页 |
| ·SDS-PAGE中的一些问题 | 第41-43页 |
| 第四部分 CSISV免疫组化检测法的建立 | 第43-52页 |
| 1.材料和方法 | 第43-45页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·病毒 | 第43页 |
| ·试验动物 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·所需试剂的配制 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-45页 |
| ·组织切片的制备 | 第44页 |
| ·免疫组化染色 | 第44-45页 |
| ·免疫组化染色条件的优化 | 第45页 |
| 2.结果与分析 | 第45-50页 |
| ·免疫组化染色条件的优化结果 | 第45-48页 |
| ·染色条件优化后的免疫组化结果 | 第48-50页 |
| 3.讨论 | 第50-52页 |
| ·组织脱片 | 第50页 |
| ·抗原修复 | 第50页 |
| ·苏木素复染 | 第50页 |
| ·非特异性反应 | 第50-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 英文摘要 | 第61-62页 |
| 附录 | 第62-63页 |
| 附图 | 第63-70页 |
