| 内容提要 | 第1-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一篇 文献综述 | 第15-39页 |
| 第1章 IgG Fc 受体研究进展 | 第15-39页 |
| ·Fc 受体的分类、命名 | 第15-20页 |
| ·IgG Fc 受体的基本生物学特性 | 第20-23页 |
| ·FcγRI (CD64) | 第20-21页 |
| ·FcγRII (CD32) | 第21-22页 |
| ·FcγRIII (CD16) | 第22-23页 |
| ·boFcγ2R | 第23页 |
| ·moFcγRIV | 第23页 |
| ·FcγR 的免疫学功能研究进展 | 第23-27页 |
| ·调节抗体介导的免疫细胞活化 | 第23-24页 |
| ·介导抗体亚类的不同免疫功能 | 第24-26页 |
| ·介导细胞吞噬作用 | 第26页 |
| ·介导 ADCC 作用 | 第26页 |
| ·介导树突状细胞抗原提呈 | 第26-27页 |
| ·FcγR 的空间结构及其与抗体的相互作用 | 第27-32页 |
| ·FcγR 三维结构 | 第27-29页 |
| ·FcγR-抗体相互作用 | 第29-32页 |
| ·Fc 受体与自身免疫性疾病 | 第32-39页 |
| ·激活型和抑制型 FcγR 的信号转导 | 第32-34页 |
| ·Fc 受体与免疫应答 | 第34-35页 |
| ·Fc 受体在自身免疫中的机制 | 第35-37页 |
| ·FcγR 药物靶标研究 | 第37-39页 |
| 第二篇 研究内容 | 第39-99页 |
| 第1章 人 FcγRII 基因的克隆 | 第39-47页 |
| ·材料和方法 | 第39-45页 |
| ·载体、菌株及工具酶 | 第39-40页 |
| ·试剂 | 第40-41页 |
| ·引物设计 | 第41页 |
| ·外周血白细胞的分离 | 第41页 |
| ·人外周血白细胞总 RNA 的提取 | 第41页 |
| ·反转录 PCR(RT-PCR)扩增 | 第41-42页 |
| ·人 FcγRII 基因克隆 | 第42-45页 |
| ·结果 | 第45页 |
| ·人 FcγRII 基因克隆 | 第45页 |
| ·人 FcγRII 测序结果及其推导的氨基酸序列 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第2章 重组人 FcγRII 胞外区蛋白(shuRII)的制备 | 第47-58页 |
| ·材料和方法 | 第47-52页 |
| ·菌株、质粒和细胞株 | 第47页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第47页 |
| ·PBST 洗液 | 第47-48页 |
| ·重组表达载体的构建和鉴定 | 第48-49页 |
| ·ShuRII 蛋白的诱导表达 | 第49-50页 |
| ·人 IgG 的标记 | 第50-51页 |
| ·Western blot 检测 | 第51页 |
| ·包涵体纯化 | 第51页 |
| ·ShuRII 蛋白的复性 | 第51-52页 |
| ·ELISA 鉴定活性 | 第52页 |
| ·流式细胞仪检测复性蛋白活性 | 第52页 |
| ·结果 | 第52-55页 |
| ·pETshuRII 表达载体的构建 | 第52页 |
| ·ShuRII 蛋白的表达、可溶性分析及 Western blot 鉴定 | 第52页 |
| ·ShuRII 蛋白的纯化 | 第52-53页 |
| ·ELISA 检测复性蛋白的活性 | 第53-55页 |
| ·流式细胞仪检测复性蛋白的抑制活性 | 第55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| ·huFcγRII 表达系统的选择 | 第55-56页 |
| ·huFcγRII 包涵体的复性 | 第56-57页 |
| ·huFcγRII 复性产物生物活性检测 | 第57-58页 |
| 第3章 人 FcγRII 稳定转染细胞系的建立 | 第58-68页 |
| ·材料和方法 | 第58-64页 |
| ·质粒、菌种及主要试剂 | 第58页 |
| ·细胞 | 第58页 |
| ·试剂配制 | 第58-59页 |
| ·引物设计 | 第59页 |
| ·huFcγRII 真核表达载体的构建及鉴定 | 第59-60页 |
| ·细胞转染 | 第60-61页 |
| ·鼠抗鸡红细胞(CRBC)高免血清的制备 | 第61-62页 |
| ·抗 CRBC IgG 的分离和纯化 | 第62-63页 |
| ·玫瑰花环试验 | 第63页 |
| ·免疫荧光检测 huFcγRII 的表达 | 第63-64页 |
| ·结果 | 第64-67页 |
| ·真核表达质粒 pcDNA3-huFcγRII 的构建 | 第64页 |
| ·抗 CRBC 高免血清效价 | 第64-65页 |
| ·鼠抗 CRBC IgG 的纯化结果 | 第65页 |
| ·稳定表达 huFcγRII 转染细胞株的建立 | 第65-66页 |
| ·huFcγRII 在 COS-7 转染细胞表面与其配体的结合 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-68页 |
| 第4章 人 FcγRII 线性结合表位的筛选与鉴定 | 第68-87页 |
| ·材料和方法 | 第68-76页 |
| ·主要仪器 | 第68页 |
| ·huFcγRII 多肽设计 | 第68-69页 |
| ·Fmoc 固相多肽合成 | 第69-73页 |
| ·合成多肽的沉淀和脱盐纯化 | 第73-74页 |
| ·合成多肽的纯度和结构特性鉴定 | 第74页 |
| ·合成多肽的溶解和保存 | 第74-75页 |
| ·huFcγRII 多肽与载体蛋白的偶联 | 第75页 |
| ·huFcγRII 受体线性结合表位的初步鉴定 | 第75-76页 |
| ·RII6-C6 对人 IgG-可溶性受体结合的抑制 | 第76页 |
| ·RII6-C6 对 IgG-细胞表面受体结合的抑制 | 第76页 |
| ·结果 | 第76-80页 |
| ·多肽的合成与偶联 | 第76页 |
| ·合成多肽的结构特性鉴定 | 第76-77页 |
| ·huFcγRII 线性配体结合表位鉴定 | 第77-79页 |
| ·RII6-C6 对人 IgG-可溶性受体结合的抑制 | 第79-80页 |
| ·RII6-C6 对 IgG-细胞表面受体结合的抑制 | 第80页 |
| ·讨论 | 第80-87页 |
| ·关于固相多肽的合成 | 第80-83页 |
| ·影响多肽合成困难的因素分析 | 第83-84页 |
| ·多肽的设计合成与检测 | 第84-85页 |
| ·huFcγRII 线性结合表位的鉴定 | 第85-86页 |
| ·结合表位多肽的抑制功效 | 第86-87页 |
| 第5章 huFcγRII 线性结合表位对系统性红斑狼疮小鼠的治疗 | 第87-99页 |
| ·材料和方法 | 第88-93页 |
| ·实验动物 | 第88页 |
| ·仪器 | 第88页 |
| ·主要试剂 | 第88页 |
| ·RII6-C6 的小鼠体内实验 | 第88页 |
| ·SLE 小鼠临床症状的观察 | 第88-89页 |
| ·SLE 小鼠尿蛋白含量的测定 | 第89页 |
| ·SLE 小鼠抗 DNA 抗体含量的测定 | 第89-90页 |
| ·组织病理学和免疫组织化学分析肾组织的病理变化 | 第90-93页 |
| ·统计分析 | 第93页 |
| ·结果 | 第93-97页 |
| ·RII6-C6 降低了 MRL/lpr 小鼠死亡率 | 第93页 |
| ·RII6-C6 降低了 MRL/lpr 小鼠尿蛋白的含量 | 第93-94页 |
| ·血清中抗 DNA 抗体的测定 | 第94-95页 |
| ·RII6-C6 治疗组免疫复合物介导的肾炎减轻 | 第95-97页 |
| ·讨论 | 第97-99页 |
| 结论 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-114页 |
| 科研成果 | 第114-118页 |
| 致谢 | 第118-119页 |
| 导师简介 | 第119-121页 |
| 作者简介 | 第121-122页 |
| 摘要 | 第122-124页 |
| 英文摘要 | 第124-126页 |
