摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 文章综述 | 第9-16页 |
·GRIM—19的由来 | 第9页 |
·GRIM—19的生物学特征 | 第9-10页 |
·基因特点 | 第9页 |
·染色体定位 | 第9页 |
·细胞定位 | 第9-10页 |
·组织分布 | 第10页 |
·GRIM—19与细胞凋亡 | 第10-14页 |
·线粒体与细胞凋亡 | 第11页 |
·GRIM—19与线粒体 | 第11-12页 |
·GRIM—19与信号转导和转录激活因子STAT3 | 第12-14页 |
·GRIM—19与其它因子的相互作用 | 第14页 |
·GRIM—19与恶性肿瘤 | 第14-15页 |
·重组日本七鳃鳗GRIM19基因对肿瘤细胞凋亡的诱导 | 第15-16页 |
第二章 重组日本七鳃鳗GRIM19的基因克隆以及序列分析 | 第16-22页 |
·材料和方法 | 第16-18页 |
·材料 | 第16页 |
·方法 | 第16-18页 |
·结果 | 第18-20页 |
·RT-PCR结果 | 第18页 |
·cDNA测序结果及由cDNA序列推导的氨基酸序列 | 第18-19页 |
·rLjGRIM19编码蛋白的BLAST检索结果及同源性比对分析 | 第19-20页 |
·讨论 | 第20-22页 |
第三章 原核表达载体pET23b-rLjGRIM19的构建与表达 | 第22-31页 |
·材料与方法 | 第22-27页 |
·材料 | 第22页 |
·方法 | 第22-27页 |
·结果 | 第27-29页 |
·PCR结果 | 第27-28页 |
·阳性转化子双酶切鉴定 | 第28页 |
·rLjGRIM19的诱导表达及鉴定 | 第28-29页 |
·Western Blot鉴定 | 第29页 |
·讨论 | 第29-31页 |
第四章 真核表达载体pcDNA3.1/NT-GFP- rLjGRIM19的构建 | 第31-34页 |
·材料与方法 | 第31-33页 |
·材料 | 第31页 |
·方法 | 第31-33页 |
·结果 | 第33页 |
·重组表达菌的鉴定结果一 | 第33页 |
·重组表达菌的鉴定结果二 | 第33页 |
·讨论 | 第33-34页 |
第五章 脂质体转染法转染人宫颈癌Hela细胞和肝癌HepG2细胞 | 第34-39页 |
·材料与方法 | 第34-35页 |
·材料 | 第34页 |
·方法 | 第34-35页 |
·结果 | 第35-37页 |
·重组质粒转染Hela细胞 | 第35-36页 |
·重组质粒转染HepG2细胞 | 第36-37页 |
·讨论 | 第37-39页 |
第六章 转染后细胞凋亡活性的检测 | 第39-45页 |
·材料与方法 | 第39-40页 |
·材料 | 第39页 |
·方法 | 第39-40页 |
·结果 | 第40-43页 |
·苏木素伊红(HE)染色法对细胞凋亡现象的观察 | 第40-41页 |
·重组质粒转染细胞的Hoechst染色结果 | 第41-42页 |
·重组质粒转染Hela与HepG2细胞的DNA ladder测定结果 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
第七章 结论 | 第45-46页 |
·主要结论 | 第45页 |
·创新点 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-48页 |
附录 | 第48-54页 |
致谢 | 第54-55页 |