| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-35页 |
| 1 水稻抗稻瘟病分子育种研究进展 | 第15-20页 |
| ·稻瘟病抗性基因定位与克隆 | 第15-16页 |
| ·稻瘟病抗性基因聚合育种 | 第16-17页 |
| ·转基因抗稻瘟病育种 | 第17-20页 |
| ·抗稻瘟病分子育种展望 | 第20页 |
| 2 根癌农杆菌介导法转化水稻的研究进展 | 第20-26页 |
| ·农杆菌转化受体系统的研究进展 | 第21-23页 |
| ·农杆菌转化侵染体系的研究进展 | 第23-25页 |
| ·农杆菌介导转化水稻展望 | 第25-26页 |
| 3 外源总DNA导入分子育种研究进展 | 第26-32页 |
| ·外源总DNA导入分子育种的意义 | 第26-27页 |
| ·外源总DNA导入分子育种的理论基础 | 第27-30页 |
| ·外源总DNA导入分子育种工作的成就 | 第30-31页 |
| ·外源总DNA导入分子育种展望 | 第31-32页 |
| 4 本研究目的与意义 | 第32-33页 |
| 5 本研究的主要内容 | 第33-35页 |
| 第二章 农杆菌介导溶菌酶基因转化籼稻的研究 | 第35-64页 |
| 1 材料与方法 | 第36-47页 |
| ·试验材料 | 第36-37页 |
| ·试验材料 | 第36页 |
| ·质粒与农杆菌菌株 | 第36页 |
| ·引物 | 第36页 |
| ·培养基 | 第36-37页 |
| ·试验方法 | 第37-42页 |
| ·外植体的培养 | 第37-38页 |
| ·工程菌的制备 | 第38-40页 |
| ·G418筛选愈伤组织临界浓度的确定 | 第40页 |
| ·农杆菌对愈伤组织的转化 | 第40-42页 |
| ·转化子的筛选与再生培养 | 第42页 |
| ·转化植株的分子检测 | 第42-47页 |
| ·植物总DNA的提取 | 第42-43页 |
| ·拟转化株的PCR检测 | 第43页 |
| ·拟转化植株的Southern检测 | 第43-47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-58页 |
| ·转化受体系统的优化 | 第47-51页 |
| ·基本培养基对愈伤组织诱导的影响 | 第47页 |
| ·不同激素浓度及配比对愈伤组织诱导的影响 | 第47-49页 |
| ·基本培养基对愈伤组织继代培养的影响 | 第49页 |
| ·基本培养基对愈伤组织分化的影响 | 第49-50页 |
| ·籼稻成熟胚离体再生体系优化结果 | 第50-51页 |
| ·G418筛选愈伤组织临界浓度确定 | 第51页 |
| ·农杆菌转化侵染体系的研究 | 第51-55页 |
| ·农杆菌菌液浓度对转化的影响 | 第51-52页 |
| ·乙酰丁香酮(AS)对农杆菌转化的影响 | 第52页 |
| ·侵染时间对农杆菌转化的影响 | 第52-53页 |
| ·负压处理对农杆菌转化的影响 | 第53页 |
| ·共培养对农杆菌转化的影响 | 第53-55页 |
| ·筛选方式对农杆菌转化的影响 | 第55页 |
| ·农杆菌转化籼稻成熟胚愈伤组织技术流程 | 第55-56页 |
| ·农杆菌转化结果 | 第56-57页 |
| ·转化植株的分子检测 | 第57-58页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第57-58页 |
| ·转化植株的Southern检测 | 第58页 |
| 3 讨论 | 第58-64页 |
| ·影响籼稻胚性愈伤组织形成的因素 | 第58-60页 |
| ·影响农杆菌介导转化水稻的因素 | 第60-64页 |
| ·Vir基因活化物的添加 | 第60-61页 |
| ·负压处理 | 第61页 |
| ·共培养方式 | 第61-62页 |
| ·筛选培养 | 第62-64页 |
| 第三章 穗茎注射法导入溶菌酶基因的研究 | 第64-84页 |
| 1 材料与方法 | 第66-69页 |
| ·材料 | 第66-67页 |
| ·基因 | 第66页 |
| ·受体材料 | 第66页 |
| ·试剂 | 第66-67页 |
| ·方法 | 第67-69页 |
| ·质粒DNA注射液的制备 | 第67-68页 |
| ·工程农杆菌菌液注射液的制备 | 第68页 |
| ·穗茎注射方法 | 第68-69页 |
| ·G418筛选种子临界浓度的确定 | 第69页 |
| ·G418筛选T0代种子 | 第69页 |
| ·注射处理植株结实率统计 | 第69页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第69页 |
| ·转化植株Southern检测 | 第69页 |
| 2 结果与分析 | 第69-77页 |
| ·G418筛选种子临界浓度的确定 | 第69-70页 |
| ·注射处理对结实率的影响 | 第70页 |
| ·质粒DNA穗茎注射方法的研究 | 第70-74页 |
| ·注射时期对转化率的影响 | 第71页 |
| ·质粒DNA浓度对转化率的影响 | 第71-72页 |
| ·质粒DNA不同溶液稀释对转化率的影响 | 第72页 |
| ·不同籼稻品种对转化率的影响 | 第72-73页 |
| ·注射处理材料G418筛选、PCR检测结果 | 第73-74页 |
| ·工程农杆菌菌液穗茎注射的研究 | 第74-75页 |
| ·菌液穗茎注射T0代G418筛选结果 | 第74-75页 |
| ·菌液穗茎注射T0代NPTⅡ基因PeR检测结果 | 第75页 |
| ·菌液穗茎注射T0代溶菌酶基因PCR检测结果 | 第75页 |
| ·Southern检测结果 | 第75-77页 |
| 3 讨论 | 第77-84页 |
| ·质粒DNA穗茎注射法导入外源DNA的机理 | 第77-78页 |
| ·穗茎注射法对受体植株结实率的影响 | 第78-79页 |
| ·注射时期是穗茎注射转化成功的关键因素 | 第79页 |
| ·外源DNA降解对穗茎注射转化的影响 | 第79-80页 |
| ·质粒DNA穗茎注射转基因植株的拷贝数 | 第80-81页 |
| ·提高工程农杆菌菌液穗茎注射转化率的途径 | 第81-82页 |
| ·三种转化方法的比较 | 第82-84页 |
| 第四章 转基因植株后代遗传稳定性分析、抗性鉴定及杂交组合选育的研究 | 第84-108页 |
| 1 材料与方法 | 第85-88页 |
| ·材料 | 第85-86页 |
| ·方法 | 第86-88页 |
| ·遗传分析 | 第86-87页 |
| ·纯合单株检测 | 第87页 |
| ·穗颈瘟鉴定 | 第87-88页 |
| ·农艺性状分析 | 第88页 |
| 2 结果与分析 | 第88-102页 |
| ·T1代PCR检测结果 | 第88-91页 |
| ·T2代PCR检测结果 | 第91-92页 |
| ·T1代抗病鉴定 | 第92-95页 |
| ·T2代株系的抗病鉴定 | 第95-96页 |
| ·杂交组合的抗病性鉴定 | 第96-99页 |
| ·杂交组合的农艺性状考察 | 第99-102页 |
| 3 讨论 | 第102-108页 |
| ·溶菌酶基因稻瘟病抗性探讨 | 第102页 |
| ·外源基因遗传稳定性 | 第102-104页 |
| ·转基因材料在育种中的应用 | 第104-105页 |
| ·目标性状在杂交后代中的遗传 | 第105-107页 |
| ·目的基因对非目标性状的影响 | 第107-108页 |
| 总结 | 第108-112页 |
| 1.全文结论 | 第108-110页 |
| ·高频离体再生体系的建立 | 第108-109页 |
| ·农杆菌转化体系的优化 | 第109页 |
| ·穗茎注射法的探索 | 第109-110页 |
| ·抗稻瘟病转基因株系的获得 | 第110页 |
| ·抗稻瘟病的新杂交组合的获得 | 第110页 |
| 2.本文创新性 | 第110-111页 |
| 3.展望 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-131页 |
| 附录 图版 | 第131-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
| 作者简介 | 第137-138页 |
| 在读期间科研学术成果目录 | 第138页 |