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酿酒酵母菌和白念珠菌中RCK2和HOG1蛋白激酶在高渗胁迫,氧化胁迫和细胞壁完整性方面的功能研究

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
第一章 文献综述第8-19页
   ·酿酒酵母和白念珠菌HOG MAPK 信号转导途径简介第9-12页
     ·酿酒酵母HOG 信号转导途径的组成及调控第9-10页
     ·白念珠菌HOG 途径与酿酒酵母HOG 途径的差异第10-12页
   ·酿酒酵母TOR 途径简介第12-16页
     ·TOR 复合物的组成第12-14页
     ·TOR 对细胞生长的调控第14页
     ·TOR 对蛋白质合成和稳定性的调控第14-15页
     ·TOR 对转录的调控第15-16页
   ·酿酒酵母ScRCK2 基因研究进展第16-18页
   ·本论文的研究内容与意义第18-19页
第二章 材料与方法第19-35页
   ·实验材料第19-25页
     ·菌种第19-20页
     ·质粒第20页
     ·主要实验仪器第20-21页
     ·培养基第21-22页
     ·试剂第22-23页
     ·常用溶液与缓冲液第23-25页
   ·实验方法第25-35页
     ·大肠杆菌和酵母菌的培养与菌种保存第25页
     ·CaCl_2 法制备感受态细胞第25-26页
     ·质粒转化E.coli 感受态细胞第26页
     ·SDS 碱裂解法小量制备质粒DNA第26-27页
     ·SDS 碱裂解法大量制备质粒DNA第27-28页
     ·玻璃珠法提取酵母基因组DNA第28页
     ·液氮法提取酵母基因组DNA第28页
     ·PCR 扩增DNA 片断第28-29页
     ·乙醇沉淀法纯化DNA 片断第29页
     ·DNA 片断的柱纯化第29-30页
     ·酶切第30-31页
     ·连接第31页
     ·α互补筛选阳性克隆实验第31-32页
     ·乙酸锂法转化酿酒酵母细胞第32页
     ·乙酸锂法转化白念珠菌细胞第32-33页
     ·梯度连续稀释实验第33-34页
     ·网络共享资源简介第34-35页
第三章 ScRCK2 基因在细胞对雷帕霉素敏感性中的作用第35-39页
   ·酿酒酵母ScRCK2 基因的缺失导致细胞对雷帕霉素敏感第35-36页
   ·ScRCK2 突变体在酿酒酵母细胞对雷帕霉素敏感性中的作用第36-38页
   ·小结与讨论第38-39页
第四章 白念珠菌CaRCK2 基因的克隆与鉴定第39-55页
   ·白念珠菌CaRCK2 基因的克隆与激酶缺陷突变体CaRCK2KD 的构建第39-49页
     ·白念珠菌CaRCK2 基因的生物信息学分析第39-42页
     ·白念珠菌CaRCK2 基因的克隆第42-44页
     ·白念珠菌CaRCK2 基因激酶缺陷突变体CaRCK2KD 的构建第44-47页
     ·质粒pCR4-CaRCK2 和pCR4-CaRCK2KD 的构建第47-49页
   ·白念珠菌CaRCK2 基因可以互补酿酒酵母ScRCK2 基因的功能第49-51页
   ·过量表达CaRCK2 和CaRCK2KD 对酿酒酵母rck2Δ抗氧化胁迫能力的影响第51-54页
   ·小结与讨论第54-55页
第五章 白念珠菌CaRCK2 基因的敲除与功能研究第55-72页
   ·CaRCK2 基因敲除盒的构建第55-59页
   ·白念珠菌CaRCK2 基因的敲除第59-61页
   ·CaRCK2 基因缺失株的功能研究第61-67页
     ·CaRCK2 基因的缺失导致白念珠菌细胞生长缓慢第61-62页
     ·CaRCK2 基因的缺失导致白念珠菌细胞对雷帕霉素敏感第62页
     ·CaRCK2 基因与白念珠菌细胞对氧化胁迫反应有关第62-64页
     ·CaRCK2 基因的缺失导致白念珠菌细胞对高渗胁迫敏感第64-65页
     ·CaRCK2 基因的缺失导致白念珠菌细胞对LiCl 敏感第65-66页
     ·CaRCK2 基因的缺失导致白念珠菌细胞对SDS,CFW 和CongoRed 敏感第66-67页
   ·酿酒酵母ScRCK2 对白念珠菌CaRCK2 的功能互补情况第67-71页
     ·酿酒酵母ScRCK2 基因和激酶缺陷突变体ScRCK2KD 的亚克隆第68-70页
     ·酿酒酵母ScRCK2 基因对白念珠菌CaRCK2 基因的功能互补第70-71页
   ·小结与讨论第71-72页
第六章 酿酒酵母和白念珠菌HOG 途径在雷帕霉素敏感性中的作用第72-78页
   ·酿酒酵母HOG 途径与细胞雷帕霉素敏感性之间的关系第72-73页
   ·白念珠菌HOG 途径与细胞雷帕霉素敏感性之间的关系第73-75页
   ·白念珠菌CaHOG1 基因缺失株新表型的发现第75-76页
   ·小结与讨论第76-78页
参考文献第78-86页
发表论文和科研情况说明第86-87页
致谢第87页

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