中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-19页 |
·酿酒酵母和白念珠菌HOG MAPK 信号转导途径简介 | 第9-12页 |
·酿酒酵母HOG 信号转导途径的组成及调控 | 第9-10页 |
·白念珠菌HOG 途径与酿酒酵母HOG 途径的差异 | 第10-12页 |
·酿酒酵母TOR 途径简介 | 第12-16页 |
·TOR 复合物的组成 | 第12-14页 |
·TOR 对细胞生长的调控 | 第14页 |
·TOR 对蛋白质合成和稳定性的调控 | 第14-15页 |
·TOR 对转录的调控 | 第15-16页 |
·酿酒酵母ScRCK2 基因研究进展 | 第16-18页 |
·本论文的研究内容与意义 | 第18-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-35页 |
·实验材料 | 第19-25页 |
·菌种 | 第19-20页 |
·质粒 | 第20页 |
·主要实验仪器 | 第20-21页 |
·培养基 | 第21-22页 |
·试剂 | 第22-23页 |
·常用溶液与缓冲液 | 第23-25页 |
·实验方法 | 第25-35页 |
·大肠杆菌和酵母菌的培养与菌种保存 | 第25页 |
·CaCl_2 法制备感受态细胞 | 第25-26页 |
·质粒转化E.coli 感受态细胞 | 第26页 |
·SDS 碱裂解法小量制备质粒DNA | 第26-27页 |
·SDS 碱裂解法大量制备质粒DNA | 第27-28页 |
·玻璃珠法提取酵母基因组DNA | 第28页 |
·液氮法提取酵母基因组DNA | 第28页 |
·PCR 扩增DNA 片断 | 第28-29页 |
·乙醇沉淀法纯化DNA 片断 | 第29页 |
·DNA 片断的柱纯化 | 第29-30页 |
·酶切 | 第30-31页 |
·连接 | 第31页 |
·α互补筛选阳性克隆实验 | 第31-32页 |
·乙酸锂法转化酿酒酵母细胞 | 第32页 |
·乙酸锂法转化白念珠菌细胞 | 第32-33页 |
·梯度连续稀释实验 | 第33-34页 |
·网络共享资源简介 | 第34-35页 |
第三章 ScRCK2 基因在细胞对雷帕霉素敏感性中的作用 | 第35-39页 |
·酿酒酵母ScRCK2 基因的缺失导致细胞对雷帕霉素敏感 | 第35-36页 |
·ScRCK2 突变体在酿酒酵母细胞对雷帕霉素敏感性中的作用 | 第36-38页 |
·小结与讨论 | 第38-39页 |
第四章 白念珠菌CaRCK2 基因的克隆与鉴定 | 第39-55页 |
·白念珠菌CaRCK2 基因的克隆与激酶缺陷突变体CaRCK2KD 的构建 | 第39-49页 |
·白念珠菌CaRCK2 基因的生物信息学分析 | 第39-42页 |
·白念珠菌CaRCK2 基因的克隆 | 第42-44页 |
·白念珠菌CaRCK2 基因激酶缺陷突变体CaRCK2KD 的构建 | 第44-47页 |
·质粒pCR4-CaRCK2 和pCR4-CaRCK2KD 的构建 | 第47-49页 |
·白念珠菌CaRCK2 基因可以互补酿酒酵母ScRCK2 基因的功能 | 第49-51页 |
·过量表达CaRCK2 和CaRCK2KD 对酿酒酵母rck2Δ抗氧化胁迫能力的影响 | 第51-54页 |
·小结与讨论 | 第54-55页 |
第五章 白念珠菌CaRCK2 基因的敲除与功能研究 | 第55-72页 |
·CaRCK2 基因敲除盒的构建 | 第55-59页 |
·白念珠菌CaRCK2 基因的敲除 | 第59-61页 |
·CaRCK2 基因缺失株的功能研究 | 第61-67页 |
·CaRCK2 基因的缺失导致白念珠菌细胞生长缓慢 | 第61-62页 |
·CaRCK2 基因的缺失导致白念珠菌细胞对雷帕霉素敏感 | 第62页 |
·CaRCK2 基因与白念珠菌细胞对氧化胁迫反应有关 | 第62-64页 |
·CaRCK2 基因的缺失导致白念珠菌细胞对高渗胁迫敏感 | 第64-65页 |
·CaRCK2 基因的缺失导致白念珠菌细胞对LiCl 敏感 | 第65-66页 |
·CaRCK2 基因的缺失导致白念珠菌细胞对SDS,CFW 和CongoRed 敏感 | 第66-67页 |
·酿酒酵母ScRCK2 对白念珠菌CaRCK2 的功能互补情况 | 第67-71页 |
·酿酒酵母ScRCK2 基因和激酶缺陷突变体ScRCK2KD 的亚克隆 | 第68-70页 |
·酿酒酵母ScRCK2 基因对白念珠菌CaRCK2 基因的功能互补 | 第70-71页 |
·小结与讨论 | 第71-72页 |
第六章 酿酒酵母和白念珠菌HOG 途径在雷帕霉素敏感性中的作用 | 第72-78页 |
·酿酒酵母HOG 途径与细胞雷帕霉素敏感性之间的关系 | 第72-73页 |
·白念珠菌HOG 途径与细胞雷帕霉素敏感性之间的关系 | 第73-75页 |
·白念珠菌CaHOG1 基因缺失株新表型的发现 | 第75-76页 |
·小结与讨论 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-86页 |
发表论文和科研情况说明 | 第86-87页 |
致谢 | 第87页 |