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大白菜细胞质雄性不育基因orf224和orf138表达载体构建及遗传转化

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
引言第11-13页
第一章 文献综述第13-36页
   ·植物细胞质雄性不育第13-15页
     ·植物雄性不育及分类第13页
     ·植物细胞质雄性不育及表型特征第13-14页
     ·植物细胞质雄性不育的应用第14-15页
   ·植物细胞质雄性不育的可能机制第15-17页
     ·细胞质雄性不育假说第15-16页
     ·细胞质雄性不育相关的线粒体嵌合基因及片段第16-17页
   ·十字花科细胞质雄性不育的获得第17-24页
     ·自然突变第17-18页
     ·种间种内杂交和回交转育第18-19页
     ·原生质体融合第19-20页
     ·物理化学诱变第20页
     ·基因工程创建雄性不育的研究进展第20-24页
   ·大白菜组织培养研究进展第24-29页
     ·外植体内在因素第24-26页
     ·环境外在因素第26-28页
     ·大白菜组织培养存在问题第28-29页
   ·大白菜遗传转化研究进展第29-34页
     ·农杆菌介导的转化机理第29-30页
     ·根癌农杆菌介导的转化方法第30-32页
     ·影响根癌农杆菌介导的因素第32-34页
   ·本研究目的与意义、研究内容与技术路线第34-36页
     ·本研究目的与意义第34页
     ·研究内容第34-35页
     ·本研究的技术路线第35-36页
第二章 萝卜orf138 和白菜花药特异启动子(BcA9)的克隆第36-51页
   ·萝卜orf138 克隆载体构建第36-45页
     ·材料与方法第36-42页
     ·结果与分析第42-45页
     ·讨论第45页
   ·白菜花药特异启动子(BcA9)克隆载体构建第45-51页
     ·材料与方法第45-47页
     ·结果与分析第47-49页
     ·讨论第49-51页
第三章 大白菜细胞质雄性不育基因orf224 和orf138 植物表达载体的构建第51-73页
   ·大白菜PolCMS orf224 的ED355 强组成型启动子和白菜花药特异启动子(BcA9)植物表达载体构建第51-63页
     ·材料与方法第51-56页
     ·结果与分析第56-62页
     ·讨论第62-63页
   ·大白菜OguCMS orf138 的ED355 强组成型启动子和白菜花药特异启动子(BcA9)植物表达载体构建第63-73页
     ·材料与方法第64-67页
     ·结果与分析第67-71页
     ·讨论第71-73页
第四章 大白菜子叶段高频再生体系的建立第73-83页
   ·材料与方法第73-75页
     ·材料第73页
     ·方法第73-75页
   ·结果与分析第75-80页
     ·培养条件对大白菜再生频率的影响第75-77页
     ·外植体对大白菜再生频率的影响第77-80页
   ·讨论第80-83页
第五章 大白菜遗传转化体系的建立第83-94页
   ·试验材料和方法第83-86页
     ·试验材料第83页
     ·试剂的配置第83页
     ·培养基种类第83-84页
     ·大白菜潮霉素(Hyg)和抑菌头孢霉素(Cef)的敏感性试验第84页
     ·农杆菌菌株和质粒第84-85页
     ·影响大白菜遗传转化的因素第85-86页
   ·结果与分析第86-92页
     ·Hyg 的敏感浓度筛选第86-87页
     ·Cef 抑菌剂浓度对抑菌效果和芽分化的影响第87页
     ·预培养时间对大白菜遗传转化的影响第87-88页
     ·农杆菌浓度对大白菜遗传转化的影响第88页
     ·感菌时间对大白菜遗传转化的影响第88-89页
     ·共培养时间对大白菜遗传转化的影响第89页
     ·基因型对大白菜遗传转化的影响第89-90页
     ·外植体苗态对大白菜遗传转化的影响第90页
     ·外植体切割方式和接种方式对大白菜遗传转化的影响第90-91页
     ·附加物质对大白菜遗传转化的影响第91-92页
   ·讨论第92-94页
第六章 大白菜转基因植株的检测第94-104页
   ·材料第94页
   ·方法第94-100页
     ·GUS 染色第94页
     ·PCR 检测第94-95页
     ·RT- PCR 检测第95-97页
     ·Southern blot 杂交第97-100页
   ·结果与讨论第100-103页
     ·转基因植株的获得第100-101页
     ·转基因初步鉴定第101-103页
   ·讨论第103-104页
第七章 结论第104-106页
   ·萝卜细胞质雄性不育orf138 基因的克隆第104页
   ·大白菜细胞质雄性不育基因orf224 植物表达载体的构建第104页
   ·大白菜细胞质雄性不育基因orf138 植物表达载体的构建第104页
   ·大白菜子叶段离体再生体系的建立第104-105页
   ·大白菜遗传转化体系的建立第105页
   ·大白菜转基因植株的获得及GUS、PCR 和 RT-PCR 鉴定第105-106页
参考文献第106-117页
致谢第117-118页
作者简介第118页

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