摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
引言 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-36页 |
·植物细胞质雄性不育 | 第13-15页 |
·植物雄性不育及分类 | 第13页 |
·植物细胞质雄性不育及表型特征 | 第13-14页 |
·植物细胞质雄性不育的应用 | 第14-15页 |
·植物细胞质雄性不育的可能机制 | 第15-17页 |
·细胞质雄性不育假说 | 第15-16页 |
·细胞质雄性不育相关的线粒体嵌合基因及片段 | 第16-17页 |
·十字花科细胞质雄性不育的获得 | 第17-24页 |
·自然突变 | 第17-18页 |
·种间种内杂交和回交转育 | 第18-19页 |
·原生质体融合 | 第19-20页 |
·物理化学诱变 | 第20页 |
·基因工程创建雄性不育的研究进展 | 第20-24页 |
·大白菜组织培养研究进展 | 第24-29页 |
·外植体内在因素 | 第24-26页 |
·环境外在因素 | 第26-28页 |
·大白菜组织培养存在问题 | 第28-29页 |
·大白菜遗传转化研究进展 | 第29-34页 |
·农杆菌介导的转化机理 | 第29-30页 |
·根癌农杆菌介导的转化方法 | 第30-32页 |
·影响根癌农杆菌介导的因素 | 第32-34页 |
·本研究目的与意义、研究内容与技术路线 | 第34-36页 |
·本研究目的与意义 | 第34页 |
·研究内容 | 第34-35页 |
·本研究的技术路线 | 第35-36页 |
第二章 萝卜orf138 和白菜花药特异启动子(BcA9)的克隆 | 第36-51页 |
·萝卜orf138 克隆载体构建 | 第36-45页 |
·材料与方法 | 第36-42页 |
·结果与分析 | 第42-45页 |
·讨论 | 第45页 |
·白菜花药特异启动子(BcA9)克隆载体构建 | 第45-51页 |
·材料与方法 | 第45-47页 |
·结果与分析 | 第47-49页 |
·讨论 | 第49-51页 |
第三章 大白菜细胞质雄性不育基因orf224 和orf138 植物表达载体的构建 | 第51-73页 |
·大白菜PolCMS orf224 的ED355 强组成型启动子和白菜花药特异启动子(BcA9)植物表达载体构建 | 第51-63页 |
·材料与方法 | 第51-56页 |
·结果与分析 | 第56-62页 |
·讨论 | 第62-63页 |
·大白菜OguCMS orf138 的ED355 强组成型启动子和白菜花药特异启动子(BcA9)植物表达载体构建 | 第63-73页 |
·材料与方法 | 第64-67页 |
·结果与分析 | 第67-71页 |
·讨论 | 第71-73页 |
第四章 大白菜子叶段高频再生体系的建立 | 第73-83页 |
·材料与方法 | 第73-75页 |
·材料 | 第73页 |
·方法 | 第73-75页 |
·结果与分析 | 第75-80页 |
·培养条件对大白菜再生频率的影响 | 第75-77页 |
·外植体对大白菜再生频率的影响 | 第77-80页 |
·讨论 | 第80-83页 |
第五章 大白菜遗传转化体系的建立 | 第83-94页 |
·试验材料和方法 | 第83-86页 |
·试验材料 | 第83页 |
·试剂的配置 | 第83页 |
·培养基种类 | 第83-84页 |
·大白菜潮霉素(Hyg)和抑菌头孢霉素(Cef)的敏感性试验 | 第84页 |
·农杆菌菌株和质粒 | 第84-85页 |
·影响大白菜遗传转化的因素 | 第85-86页 |
·结果与分析 | 第86-92页 |
·Hyg 的敏感浓度筛选 | 第86-87页 |
·Cef 抑菌剂浓度对抑菌效果和芽分化的影响 | 第87页 |
·预培养时间对大白菜遗传转化的影响 | 第87-88页 |
·农杆菌浓度对大白菜遗传转化的影响 | 第88页 |
·感菌时间对大白菜遗传转化的影响 | 第88-89页 |
·共培养时间对大白菜遗传转化的影响 | 第89页 |
·基因型对大白菜遗传转化的影响 | 第89-90页 |
·外植体苗态对大白菜遗传转化的影响 | 第90页 |
·外植体切割方式和接种方式对大白菜遗传转化的影响 | 第90-91页 |
·附加物质对大白菜遗传转化的影响 | 第91-92页 |
·讨论 | 第92-94页 |
第六章 大白菜转基因植株的检测 | 第94-104页 |
·材料 | 第94页 |
·方法 | 第94-100页 |
·GUS 染色 | 第94页 |
·PCR 检测 | 第94-95页 |
·RT- PCR 检测 | 第95-97页 |
·Southern blot 杂交 | 第97-100页 |
·结果与讨论 | 第100-103页 |
·转基因植株的获得 | 第100-101页 |
·转基因初步鉴定 | 第101-103页 |
·讨论 | 第103-104页 |
第七章 结论 | 第104-106页 |
·萝卜细胞质雄性不育orf138 基因的克隆 | 第104页 |
·大白菜细胞质雄性不育基因orf224 植物表达载体的构建 | 第104页 |
·大白菜细胞质雄性不育基因orf138 植物表达载体的构建 | 第104页 |
·大白菜子叶段离体再生体系的建立 | 第104-105页 |
·大白菜遗传转化体系的建立 | 第105页 |
·大白菜转基因植株的获得及GUS、PCR 和 RT-PCR 鉴定 | 第105-106页 |
参考文献 | 第106-117页 |
致谢 | 第117-118页 |
作者简介 | 第118页 |