冷诱导基因CBF4在辣椒中的遗传转化及抗寒性分析
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-25页 |
| ·辣椒基因工程研究进展 | 第10-17页 |
| ·辣椒的离体再生 | 第10-13页 |
| ·辣椒遗传转化研究进展 | 第13-15页 |
| ·抗病毒病基因工程 | 第13-14页 |
| ·抗真菌病基因工程 | 第14页 |
| ·抗细菌病基因工程 | 第14-15页 |
| ·抗除草剂基因工程 | 第15页 |
| ·抗虫基因工程 | 第15页 |
| ·辣椒基因工程中存在的主要问题 | 第15-17页 |
| ·辣椒植株再生 | 第15-16页 |
| ·遗传转化率低 | 第16-17页 |
| ·转化方法单一 | 第17页 |
| ·植物抗寒机理研究 | 第17-19页 |
| ·冷害引起细胞生理生化及结构的改变 | 第17页 |
| ·膜的相变 | 第17-18页 |
| ·蛋白质的解联和变性 | 第18页 |
| ·活性氧的破坏作用 | 第18-19页 |
| ·冷诱导对Ca~(2+)水平变化的影响 | 第19页 |
| ·植物抗寒基因工程研究 | 第19-23页 |
| ·与抗寒有关的基因的研究 | 第20页 |
| ·CBF 转录因子及其在植株抗寒中的作用 | 第20-22页 |
| ·CBF 基因转化植物的研究进展 | 第22-23页 |
| ·研究的目的及意义 | 第23-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-31页 |
| ·试验材料 | 第25-26页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·菌株与质粒 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·培养基与溶液 | 第25-26页 |
| ·细菌培养基 | 第25页 |
| ·植物培养基 | 第25-26页 |
| ·常用溶液 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-31页 |
| ·辣椒AA5 再生体系的建立 | 第26页 |
| ·无菌苗的制备 | 第26页 |
| ·不定芽的诱导和分化 | 第26页 |
| ·不定芽的伸长 | 第26页 |
| ·生根与移栽 | 第26页 |
| ·遗传转化体系的优化 | 第26-27页 |
| ·不同预培养时间和浸染时间对抗性芽分化率的影响 | 第26页 |
| ·不同的共培养时间对芽分化率及遗传转化率的影响 | 第26-27页 |
| ·延迟培养时间的不同对芽分化率及遗传转化率的影响 | 第27页 |
| ·辣椒基因转化方法 | 第27页 |
| ·活化菌液制备 | 第27页 |
| ·浸染、共培养 | 第27页 |
| ·筛选培养 | 第27页 |
| ·Km 抗性分析 | 第27页 |
| ·转基因植株检测 | 第27-29页 |
| ·植物总DNA 提取方法 | 第27-28页 |
| ·PCR 的检测 | 第28页 |
| ·抗性植物RNA 提取方法 | 第28-29页 |
| ·RT-PCR 的检测 | 第29页 |
| ·转化株系生理生化指标的检测 | 第29-30页 |
| ·处理方法 | 第29页 |
| ·超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 | 第29页 |
| ·过氧化物酶(POD)活性的测定 | 第29-30页 |
| ·丙二醛(MDA)测定 | 第30页 |
| ·转化株系形态指标的检测 | 第30-31页 |
| 第三章 结果与分析 | 第31-36页 |
| ·辣椒AA5 再生体系的建立 | 第31页 |
| ·遗传转化体系的优化 | 第31-32页 |
| ·不同预培养时间和浸染时间对抗性芽分化率的影响 | 第31-32页 |
| ·不同的共培养时间对芽分化率及遗传转化率的影响 | 第32页 |
| ·延迟培养时间的不同对芽分化率及遗传转化率的影响 | 第32页 |
| ·转基因植株检测 | 第32-33页 |
| ·转基因辣椒的PCR 的检测 | 第32-33页 |
| ·转基因辣椒的RT-PCR 的检测 | 第33页 |
| ·形态指标的检测 | 第33-34页 |
| ·生理生化指标的检测 | 第34-36页 |
| ·SOD 含量的测定 | 第34-35页 |
| ·POD 含量的测定 | 第35页 |
| ·MDA 含量的测定 | 第35-36页 |
| 第四章 讨论 | 第36-38页 |
| ·辣椒再生体系的建立 | 第36-37页 |
| ·基因型的影响 | 第36页 |
| ·辣椒转CBF4 基因植株的获得 | 第36-37页 |
| ·存在的问题及下一步工作 | 第37-38页 |
| 第五章 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-45页 |
| 附录 | 第45-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 作者简介 | 第48页 |
