西藏当雄地区传统发酵乳制品微生物宏基因文库构建与乳酸菌生物多样性研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 引言 | 第8-14页 |
| ·宏基因组学 | 第8页 |
| ·宏基因组文库的分析技术 | 第8-12页 |
| ·变性梯度凝胶电泳（DGGE） | 第10页 |
| ·限制片段长度多态性(RFLP) | 第10-11页 |
| ·末端标记限制片段多态性(T-RFLP) | 第11页 |
| ·单链构像多态性（SSCP） | 第11-12页 |
| ·其他分析方法 | 第12页 |
| ·宏基因组学研究发展现状 | 第12-13页 |
| ·土壤微生物多样性及研究现状 | 第12页 |
| ·水环境微生物多样性及研究现状 | 第12-13页 |
| ·其它环境中微生物的多样性 | 第13页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第13-14页 |
| 2 试验材料及方法 | 第14-19页 |
| ·试验材料 | 第14-15页 |
| ·发酵乳样品的采集 | 第14页 |
| ·菌株和质粒 | 第14页 |
| ·试剂 | 第14-15页 |
| ·培养基 | 第15页 |
| ·PCR 扩增165 rDNA 的通用引物序列 | 第15页 |
| ·仪器设备 | 第15页 |
| ·试验方法 | 第15-19页 |
| ·乳样微生物总 DNA 的提取 | 第15-16页 |
| ·CTAB-SDS-冻融法 | 第15页 |
| ·玻璃珠吸附法 | 第15-16页 |
| ·研磨法 | 第16页 |
| ·16S rDNA 的 PCR 扩增 | 第16页 |
| ·PCR 产物的纯化回收 | 第16页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第16页 |
| ·16S rDNA 文库的构建与筛选 | 第16-17页 |
| ·质粒 DNA 的小量提取 | 第17页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第17-18页 |
| ·双酶切鉴定 | 第17-18页 |
| ·质粒电泳鉴定 | 第18页 |
| ·PCR 鉴定 | 第18页 |
| ·阳性克隆子的 PCR-RFLP 分析 | 第18-19页 |
| ·测序和分析 | 第19页 |
| 3 结果与分析 | 第19-32页 |
| ·乳样微生物总 DNA 的抽提 | 第19-20页 |
| ·16S rDNA 扩增及纯化回收 | 第20页 |
| ·16S rRNA 基因文库的构建 | 第20-21页 |
| ·质粒 DNA 提取与检测 | 第21-22页 |
| ·16S rDNA 文库的筛选 | 第22-23页 |
| ·序列比对及系统发育分析 | 第23-32页 |
| 4 讨论 | 第32-35页 |
| ·样品总 DNA 提取对微生物多样性的影响 | 第32-33页 |
| ·PCR 扩增条件对微生物多样性的影响 | 第33页 |
| ·克隆文库构建对微生物多样性的影响 | 第33-34页 |
| ·克隆文库分析对微生物多样性的影响 | 第34-35页 |
| 5 结论 | 第35-36页 |
| 致谢 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-44页 |
| 作者简介 | 第44页 |
