| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一部分 综述 | 第9-22页 |
| ·植物营养贮存蛋白质 | 第9-15页 |
| ·简介 | 第9-10页 |
| ·植物营养贮存蛋白质基因表达的调控 | 第10-13页 |
| ·植物营养贮存蛋白质的酶学性质 | 第13页 |
| ·拟南芥植物营养贮存蛋白质 | 第13-15页 |
| ·Haloacid dehalogenase(HAD)超家族 | 第15-17页 |
| ·蛋白质晶体学 | 第17-22页 |
| ·蛋白质结晶的原理 | 第17-19页 |
| ·蛋白质晶体生长方法 | 第19-20页 |
| ·蛋白质晶体生长优化 | 第20-22页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第22-37页 |
| ·实验材料 | 第22-25页 |
| ·菌株及质粒 | 第22页 |
| ·分子生物学试剂 | 第22页 |
| ·生物化学试剂 | 第22-23页 |
| ·试剂配制 | 第23-24页 |
| ·实验仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-37页 |
| ·拟南芥VSP1蛋白的表达与纯化 | 第25-28页 |
| ·Cu~(2+)和Mg~(2+)对VSP1酸性磷酸酶活性的影响 | 第28-29页 |
| ·VSP1蛋白底物特异性 | 第29页 |
| ·抑制剂对VSP1活性的影响 | 第29-30页 |
| ·VSP1 Asp124突变体的构建及其活性测定 | 第30-35页 |
| ·拟南芥VSP1蛋白的晶体学研究 | 第35-37页 |
| 第三部分 实验结果 | 第37-50页 |
| ·拟南芥VSP1蛋白的表达与纯化 | 第37-38页 |
| ·Cu~(2+)和Mg~(2+)对VSP1酸性磷酸酶活性的影响 | 第38-39页 |
| ·pNPP法测活标准曲线 | 第38页 |
| ·Cu~(2+)和Mg~(2+)对VSP1酸性磷酸酶活性的影响 | 第38-39页 |
| ·VSP1蛋白底物特异性 | 第39-40页 |
| ·钼酸铵法测活标准曲线 | 第39页 |
| ·VSP1蛋白底物特异性 | 第39-40页 |
| ·抑制剂对VSP1活性的影响 | 第40-41页 |
| ·VSP1 Asp124突变体的构建及其活性测定 | 第41-47页 |
| ·VSP1 Asp124突变体的PCR扩增 | 第42页 |
| ·VSP1 Asp124突变体转化DH5α感受态细胞 | 第42-43页 |
| ·测序 | 第43页 |
| ·质粒抽提与转化BL21(DE3) | 第43-44页 |
| ·VSP1-D124S与VSP1-D124A的试表达 | 第44-45页 |
| ·VSP1-D124S与VSP1-D124A的表达与纯化 | 第45-46页 |
| ·VSP1,VSP1-D124S与VSP1-D124A的圆二色谱 | 第46-47页 |
| ·VSP1-D124S与VSP1-D124A的活性测定 | 第47页 |
| ·拟南芥VSP1蛋白的晶体学研究 | 第47-50页 |
| 第四部分 讨论 | 第50-55页 |
| ·拟南芥VSP1蛋白的表达与纯化 | 第50-51页 |
| ·拟南芥VSP1酸性磷酸酶性质 | 第51-52页 |
| ·拟南芥VSP1蛋白的晶体学研究 | 第52-55页 |
| 第五部分 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 缩略词表 | 第63-64页 |
| 附录 | 第64-68页 |
| 附录一:拟南芥VSP1 mRNA与蛋白序列 | 第64-65页 |
| ·拟南芥VSP1 mRNA序列 | 第64页 |
| ·拟南芥VSP1蛋白序列 | 第64-65页 |
| 附录二:测序图谱 | 第65-68页 |
| ·VSP1-D124S测序图谱 | 第65-66页 |
| ·VSP1-D124A测序图谱 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第69-70页 |
