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猴头菇CB1锰过氧化物酶全长cDNA的基因克隆及序列分析

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 绪论第10-22页
   ·木质素的生物降解概述第10-11页
     ·木质素的组成第10页
     ·木质素生物降解研究的目的及意义第10-11页
   ·木材白腐菌第11页
   ·白腐菌降解木质素酶系统第11-17页
     ·白腐菌降解木质素酶系统的协同作用第12-13页
     ·锰过氧化物酶(MnP)及其降解机制第13-15页
     ·漆酶(Laccase)及其降解机制第15-16页
     ·木质素过氧化物酶(LiP)及其降解机制第16-17页
   ·锰过氧化物酶MnP的分子生物学研究进展第17-20页
     ·MnP基因的克隆第17页
     ·MnP基因克隆的RACE技术第17-18页
     ·白腐菌的基因表达第18-19页
     ·MnP基因的异源表达第19页
     ·MnP基因的同源表达第19-20页
   ·研究目的和意义第20页
   ·研究的主要内容第20-21页
   ·课题来源第21-22页
2 白腐菌系统发育分析第22-28页
   ·材料与方法第22-23页
     ·供试菌种第22页
     ·主要试剂第22页
     ·主要仪器设备第22页
     ·培养基第22页
     ·ITS序列扩增与系统发育分析第22-23页
   ·结果与分析第23-26页
     ·猴头菇CB1的ITS序列与系统发育分析第23-24页
     ·灰树花菌株迁西二号的ITS序列与系统发育分析第24-26页
   ·本章小结第26-28页
3 白腐菌的主要木质素降解酶系统的检测第28-36页
   ·材料与方法第28-29页
     ·供试菌种第28页
     ·培养基第28-29页
     ·产酶培养方式第29页
     ·酶活测定方法第29页
   ·结果与分析第29-34页
     ·两种白腐菌在4种培养液中LiP的测定结果第29-30页
     ·猴头菇在4种不同的培养液中MnP活性检测及偏差分析结果第30-31页
     ·猴头菇在4种不同的培养液中漆酶活性检测及偏差分析结果第31-32页
     ·灰树花在4种不同的培养液中MnP活性检测及偏差分析结果第32-33页
     ·灰树花在4种不同的培养液中漆酶活性检测及偏差分析结果第33-34页
   ·本章小结第34-36页
4 猴头菇CB1锰过氧化物酶cDNA基因的克隆第36-66页
   ·材料第36-37页
     ·供试菌种第36页
     ·主要试剂第36页
     ·试验引物第36-37页
     ·主要仪器设备第37页
   ·方法第37-46页
     ·主要培养基第37页
     ·菌丝的收集第37页
     ·基因组DNA的提取第37-38页
     ·简并PCR第38页
     ·猴头菇总RNA的提取及DNA的消化第38-39页
     ·RT-PCR第39-40页
     ·MnP基因的PCR产物的凝胶回收第40页
     ·目的基因与T载体的连接第40-42页
     ·3’RACE第42-43页
     ·5’RACE第43-44页
     ·猴头菇MnP全长cDNA的基因序列分析第44-46页
   ·结果与分析第46-64页
     ·基因组DNA的提取第46页
     ·简并PCR第46页
     ·猴头菇丝总RNA的提取第46-47页
     ·RT-PCR扩增cDNA目的基因第47-48页
     ·3’RACE第48-50页
     ·5’RACE第50-52页
     ·MnP的全基因第52-53页
     ·拼接得到猴头菇MnP全长cDNA序列第53-55页
     ·猴头菇MnP的cDNA核苷酸序列的同源性比较第55-56页
     ·猴头菇MnP蛋白结构分析第56-64页
   ·本章小结第64-66页
结论第66-68页
参考文献第68-75页
附录1 猴头菇CB1的ITS序列比对结果第75-76页
附录2 灰树花迁西二号的ITS序列比对结果第76-77页
附录3 猴头菇简并PCR序列比对结果第77-78页
附录4 猴头菇RT-PCR序列比对结果果第78-79页
附录5 猴头菇3’RACE序列及比对结果第79-80页
附录6 猴头菇5’RACE序列及比对结果第80-81页
附录7 猴头菇全基因序列及比对结果第81-82页
攻读学位期间发表的学术论文第82-83页
致谢第83-84页

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