| 缩略词 | 第4-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| 1.1 猪流行性腹泻病毒 | 第12-14页 |
| 1.1.1 PEDV的理化特性 | 第12页 |
| 1.1.2 PEDV的培养特性 | 第12-13页 |
| 1.1.3 PEDV的基因结构 | 第13页 |
| 1.1.4 编码的蛋白结构及功能 | 第13-14页 |
| 1.2 PED的流行病学 | 第14-15页 |
| 1.3 PED的病理变化和临床症状 | 第15-16页 |
| 1.4 PED的诊断技术 | 第16-17页 |
| 1.4.1 中和试验 | 第16页 |
| 1.4.2 免疫荧光法 | 第16页 |
| 1.4.3 酶联免疫吸附试验 | 第16-17页 |
| 1.4.4 胶体金免疫层析法 | 第17页 |
| 1.5 PEDV疫苗的研究 | 第17-20页 |
| 1.5.1 灭活疫苗 | 第18页 |
| 1.5.2 弱毒疫苗 | 第18-19页 |
| 1.5.3 核酸疫苗 | 第19页 |
| 1.5.4 转基因植物疫苗 | 第19页 |
| 1.5.5 基因工程疫苗 | 第19-20页 |
| 1.5.6 亚单位疫苗 | 第20页 |
| 1.6 防治 | 第20-21页 |
| 1.7 研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 河北省PEDV流行株的分离鉴定 | 第22-32页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 病料 | 第22页 |
| 2.1.2 细胞及毒株 | 第22页 |
| 2.1.3 主要试剂耗材 | 第22-23页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第23页 |
| 2.1.5 试剂配制 | 第23-24页 |
| 2.1.6 引物设计与合成 | 第24页 |
| 2.2 试验步骤 | 第24-27页 |
| 2.2.1 病料的采集与处理 | 第24页 |
| 2.2.2 RNA的提取 | 第24页 |
| 2.2.3 RT-PCR检测 | 第24-26页 |
| 2.2.4 胰酶浓度测定 | 第26页 |
| 2.2.5 PEDV在 Vero细胞上增殖 | 第26页 |
| 2.2.6 PEDV分离株间接免疫荧光(IFA)鉴定 | 第26-27页 |
| 2.2.7 病毒粒子透射电镜观察 | 第27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-30页 |
| 2.3.1 RT-PCR检测 | 第27页 |
| 2.3.2 最佳胰酶浓度测定 | 第27-28页 |
| 2.3.3 病毒的分离和传代 | 第28页 |
| 2.3.4 间接免疫荧光试验 | 第28-29页 |
| 2.3.5 病毒形态的电镜观察 | 第29-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-31页 |
| 2.5 小结 | 第31-32页 |
| 第三章 全基因组序列的测定与遗传进化分析 | 第32-53页 |
| 3.1 试验材料 | 第32-34页 |
| 3.1.1 毒株、菌种及载体 | 第32页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第32页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第32页 |
| 3.1.4 试剂配制 | 第32-33页 |
| 3.1.5 引物设计与合成 | 第33-34页 |
| 3.2 试验方法 | 第34-37页 |
| 3.2.1 病毒处理 | 第34-35页 |
| 3.2.2 RNA提取 | 第35页 |
| 3.2.3 RT-PCR | 第35页 |
| 3.2.4 PEDV全基因组扩增 | 第35页 |
| 3.2.5 PCR产物纯化 | 第35-36页 |
| 3.2.6 DNA连接转化 | 第36页 |
| 3.2.7 重组质粒鉴定 | 第36-37页 |
| 3.2.8 序列测定与拼接 | 第37页 |
| 3.2.9 全基因组序列分析 | 第37页 |
| 3.3 结果与分析 | 第37-51页 |
| 3.3.1 全基因扩增结果 | 第37-38页 |
| 3.3.2 全基因片段克隆及拼接 | 第38-39页 |
| 3.3.3 HBQHD1株基因组结构分析 | 第39-41页 |
| 3.3.4 HBQHD1株S蛋白的遗传进化分析 | 第41-44页 |
| 3.3.5 HBQHD1株M蛋白的遗传进化分析 | 第44-48页 |
| 3.3.6 HBQHD1株N蛋白的遗传进化分析 | 第48-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-52页 |
| 3.5 小结 | 第52-53页 |
| 第四章 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 参加科研情况说明 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |