| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-26页 |
| 1.1 三萜化合物简介 | 第8-16页 |
| 1.1.1 三萜类化合物生物合成途径 | 第9-11页 |
| 1.1.2 氧化鲨烯环化酶简介 | 第11-12页 |
| 1.1.3 细胞色素P450氧化酶简介 | 第12-14页 |
| 1.1.4 酿酒酵母合成萜类化合物工程策略进展 | 第14-16页 |
| 1.2 香树脂醇 | 第16-19页 |
| 1.2.1 α-香树脂醇和β-香树脂醇 | 第17页 |
| 1.2.2 α-香树脂醇和β-香树脂醇的药理活性 | 第17-18页 |
| 1.2.3 α-香树脂醇和β-香树脂醇的生物合成酶 | 第18-19页 |
| 1.3 熊果酸和齐墩果酸 | 第19-23页 |
| 1.3.1 熊果酸和齐墩果酸简介 | 第19-21页 |
| 1.3.2 熊果酸和齐墩果酸药理活性 | 第21-22页 |
| 1.3.3 熊果酸和齐墩果酸生物合成途径 | 第22-23页 |
| 1.4 本课题研究内容 | 第23-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-29页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第26页 |
| 2.1.2 药品与试剂 | 第26-28页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-42页 |
| 2.2.1 大肠杆菌和酿酒酵母菌培养及菌种保藏 | 第29-31页 |
| 2.2.2 大肠杆菌中质粒的提取实验 | 第31页 |
| 2.2.3 酿酒酵母菌中基因组的提取实验 | 第31-32页 |
| 2.2.4 PCR扩增实验 | 第32-34页 |
| 2.2.5 琼脂糖凝胶电泳实验 | 第34页 |
| 2.2.6 DNA片段纯化和琼脂糖凝胶回收实验 | 第34-35页 |
| 2.2.7 DNA片段和质粒的酶切连接实验 | 第35-36页 |
| 2.2.8 大肠杆菌转化实验 | 第36页 |
| 2.2.9 酿酒酵母菌醋酸锂转化实验 | 第36-37页 |
| 2.2.10 大肠杆菌和酿酒酵母菌落PCR验证实验 | 第37页 |
| 2.2.11 胞内鲨烯的提取和检测 | 第37页 |
| 2.2.12 香树脂醇的提取和检测 | 第37-39页 |
| 2.2.13 熊果酸和齐墩果酸的提取和检测 | 第39-41页 |
| 2.2.14 葡萄糖浓度的测定 | 第41-42页 |
| 第三章 酿酒酵母中香树脂醇合成途径的构建 | 第42-60页 |
| 3.1 香树脂醇合成途径的初步构建 | 第42-51页 |
| 3.1.1 合成香树脂醇表达载体的构建 | 第42-43页 |
| 3.1.2 ScLCZ01和ScLCZ02菌株构建及产物检测 | 第43-46页 |
| 3.1.3 CrMAS和ERG1表达模块及菌株构建 | 第46-51页 |
| 3.2 工程菌株摇瓶发酵 | 第51-53页 |
| 3.2.1 鲨烯环氧酶对香树脂醇合成的影响 | 第51-52页 |
| 3.2.2 启动子对香树脂醇合成的影响 | 第52-53页 |
| 3.3 工程菌株ScLCZ08发酵条件优化 | 第53-56页 |
| 3.4 胞内香树脂醇提取条件优化 | 第56-57页 |
| 3.5 最优香树脂醇发酵条件 | 第57-60页 |
| 第四章 酿酒酵母中熊果酸和齐墩果酸合成途径构建及发酵优化 | 第60-74页 |
| 4.1 熊果酸和齐墩果酸酸合成菌株构建 | 第60-66页 |
| 4.1.1 对照菌株ScLCZ09和ScLCZ10构建 | 第60-62页 |
| 4.1.2 熊果酸和齐墩果酸菌株ScLCZ11-14构建 | 第62-66页 |
| 4.2 细胞色素P450酶和CPR适配研究 | 第66-67页 |
| 4.3 摇瓶发酵条件优化 | 第67-69页 |
| 4.4 熊果酸和齐墩果酸提取优化 | 第69-74页 |
| 第五章 摇瓶发酵分离耦合及5L发酵罐补料发酵研究 | 第74-82页 |
| 5.1 树脂筛选 | 第74-76页 |
| 5.2 摇瓶发酵分离耦合研究 | 第76-80页 |
| 5.3 工程菌株5L发酵罐补料培养研究 | 第80-82页 |
| 第六章 结论与展望 | 第82-84页 |
| 6.1 结论 | 第82-83页 |
| 6.2 展望 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-94页 |
| 发表论文情况说明 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
