摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 绪论 | 第13-27页 |
1.1 血管紧张素Ⅱ | 第13-16页 |
1.1.1 ANG Ⅱ的生成 | 第13页 |
1.1.2 ANG Ⅱ受体 | 第13-15页 |
1.1.3 ANG Ⅱ与心肌炎 | 第15-16页 |
1.2 高迁移率族蛋白B1(HMGB1) | 第16-22页 |
1.2.1 HMGB1的结构 | 第16-17页 |
1.2.2 HMGB1的翻译后修饰 | 第17-18页 |
1.2.3 HMGB1的释放 | 第18-19页 |
1.2.4 HMGB1的生物学意义 | 第19-21页 |
1.2.5 HMGB1与心肌炎 | 第21-22页 |
1.3 巨噬细胞 | 第22-23页 |
1.3.1 巨噬细胞的极化 | 第22-23页 |
1.3.2 巨噬细胞与心肌炎 | 第23页 |
1.4 研究目的、方法、实验设计方案和意义 | 第23-27页 |
1.4.1 研究目的 | 第23-24页 |
1.4.2 研究方法 | 第24页 |
1.4.3 实验设计 | 第24-26页 |
1.4.4 实验意义 | 第26-27页 |
第二章 ANG Ⅱ对巨噬细胞HMGB1分泌的影响 | 第27-43页 |
2.1 实验仪器与试剂 | 第27-31页 |
2.1.1 实验仪器 | 第27-28页 |
2.1.2 实验试剂 | 第28-29页 |
2.1.3 溶液的配制 | 第29-31页 |
2.2 实验方法 | 第31-37页 |
2.2.1 RAW264.7 巨噬细胞的培养 | 第31页 |
2.2.2 分离脾脏单个核细胞 | 第31-32页 |
2.2.3 免疫荧光技术检测HMGB1的核浆转移 | 第32-33页 |
2.2.4 提取细胞蛋白 | 第33页 |
2.2.5 Western blot | 第33-35页 |
2.2.6 实时荧光定量PCR检测HMGB1 | 第35-36页 |
2.2.7 细胞培养上清中HMGB1的检测 | 第36-37页 |
2.2.8 统计学分析 | 第37页 |
2.3 实验结果 | 第37-41页 |
2.3.1 ANG Ⅱ对巨噬细胞HMGB1表达的影响 | 第37-40页 |
2.3.2 ANG Ⅱ诱导HMGB1发生核浆易位 | 第40页 |
2.3.3 ANG Ⅱ受体阻断剂抑制巨噬细胞HMGB1蛋白表达 | 第40-41页 |
2.4 本章讨论 | 第41-43页 |
第三章 ANG Ⅱ调控巨噬细胞HMGB1释放的机制研究 | 第43-51页 |
3.1 实验仪器和试剂 | 第43-45页 |
3.1.1 实验仪器 | 第43-44页 |
3.1.2 实验试剂 | 第44-45页 |
3.1.3 溶液的配制 | 第45页 |
3.2 实验方法 | 第45-46页 |
3.2.1 RAW264.7 巨噬细胞的培养 | 第45页 |
3.2.2 Western blot | 第45页 |
3.2.3 免疫共沉淀 | 第45-46页 |
3.3 实验结果 | 第46-49页 |
3.3.1 ANG Ⅱ对HMGB1乙酰化水平的影响 | 第46-47页 |
3.3.2 ANG Ⅱ通过调节SIRT1促进HMGB1释放 | 第47-48页 |
3.3.3 ANG Ⅱ激活巨噬细胞JAK/STAT信号通路 | 第48页 |
3.3.4 JAK/STAT信号通路抑制剂对HMGB1分泌的影响 | 第48-49页 |
3.4 本章讨论 | 第49-51页 |
第四章 ANG Ⅱ诱导释放的HMGB1在巨噬细胞极化中的作用 | 第51-66页 |
4.1 实验仪器与试剂 | 第51-53页 |
4.1.1 实验仪器 | 第51-52页 |
4.1.2 实验试剂 | 第52-53页 |
4.1.3 溶液的配制 | 第53页 |
4.2 实验方法 | 第53-55页 |
4.2.1 RAW264.7 巨噬细胞的培养 | 第53页 |
4.2.2 分离小鼠腹腔巨噬细胞 | 第53-54页 |
4.2.3 分离脾脏单个核细胞 | 第54页 |
4.2.4 细胞培养上清中ANG Ⅱ、IL-1β 和TNF-α 的检测 | 第54页 |
4.2.5 HMGB1 siRNA的转染程序 | 第54-55页 |
4.2.6 FCM检测巨噬细胞表面MHCⅡ的表达 | 第55页 |
4.2.7 Western blot | 第55页 |
4.2.8 细胞培养上清中HMGB1的检测 | 第55页 |
4.2.9 统计学分析 | 第55页 |
4.3 实验结果 | 第55-64页 |
4.3.1 ANG Ⅱ对巨噬细胞极化的影响 | 第55-57页 |
4.3.2 HMGB1对巨噬细胞极化影响 | 第57-59页 |
4.3.3 EP与SB能够抑制ANG Ⅱ诱导的巨噬细胞的极化 | 第59-60页 |
4.3.4 HMGB1 siRNA抑制ANG Ⅱ诱导的巨噬细胞的极化 | 第60-61页 |
4.3.5 HMGB1对巨噬细胞ANG Ⅱ及AT1R表达的影响 | 第61-64页 |
4.4 本章讨论 | 第64-66页 |
第五章 主要结论与展望 | 第66-68页 |
5.1 主要结论 | 第66-67页 |
5.2 展望 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
攻读硕士期间的研究成果 | 第77页 |