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外源性HMGB1促进胰腺癌细胞去分化的作用研究

摘要第5-8页
ABSTRACT第8-10页
英汉缩略语名词对照第13-14页
第一章 绪论第14-20页
    1.1 胰腺癌第14页
    1.2 高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)第14-15页
    1.3 肿瘤干细胞与HIF1α第15-18页
    1.4 Hippo-YAP信号通路第18-20页
第二章 HMGB1促进胰腺癌非干细胞去分化第20-32页
    2.1 实验材料第20-23页
        2.1.1 细胞株来源第20页
        2.1.2 主要实验仪器与试剂第20-22页
        2.1.3 主要试剂制备第22-23页
    2.2 实验操作步骤第23-27页
        2.2.1 细胞的复苏、传代及冻存第23-24页
        2.2.2 人胰腺癌细胞株放疗后上清液的提取第24-25页
        2.2.3 流式细胞技术筛选CD133阴性细胞及CD133阳性细胞比率的测定第25-26页
        2.2.4 蛋白免疫印迹法(Western blot)第26-27页
        2.2.5 统计学分析第27页
    2.3 实验结果第27-30页
        2.3.1 HMGB1促进胰腺癌非干细胞干性相关蛋白表达第27-28页
        2.3.2 HMGB1促进胰腺癌非干细胞自我更新第28-29页
        2.3.3 HMGB1促进胰腺癌非干细胞CD133阳性细胞扩增第29-30页
    2.4 讨论第30-32页
第三章 HMGB1/TLR2/YAP/HIF1α调控人胰腺癌非干细胞去分化机制研究第32-48页
    3.1 实验材料第32-33页
        3.1.1 主要实验仪器与试剂第32-33页
        3.1.2 主要试剂制备第33页
    3.2 实验操作步骤第33-38页
        3.2.1 质粒转染第33页
        3.2.2 荧光素酶报告基因实验(luciferase reporter assay)第33-34页
        3.2.3 免疫荧光技术(Immunofluorescence technique,IF)第34-35页
        3.2.4 蛋白免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)第35页
        3.2.5 核浆分离实验第35-36页
        3.2.6 染色质免疫共沉淀技术(ChIP)第36-38页
    3.3 实验结果第38-45页
        3.3.1 HMGB1通过TLR2受体促进人胰腺癌细胞去分化过程第38-40页
        3.3.2 HMGB1上调β-catenin表达,但非上调其核内定位第40-41页
        3.3.3 HMGB1上调YAP及HIF1α表达,并促进其核定位第41-43页
        3.3.4 HMGB1促进YAP和HIF1α结合,并促进YAP及HIF1α转录活性第43-44页
        3.3.5 HMGB1促进HIF1α转录活性进而上调Nanog转录效率第44-45页
    3.4 讨论第45-48页
第四章 结论与展望第48-50页
    4.1 结论第48页
    4.2 工作展望第48-50页
参考文献第50-57页
YAP蛋白在肿瘤中的研究进展第57-63页
    参考文献第60-63页
致谢第63-64页
攻读硕士期间公开发表的论文第64页

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