| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-9页 |
| 引言 | 第9-29页 |
| 一、BMPs 家族简介 | 第9-14页 |
| （一） BMPs 及其受体 | 第9-11页 |
| （二） BMP 激活的信号通路 | 第11-13页 |
| （三） BMP4 基因及其功能研究 | 第13-14页 |
| 二、细胞衰老与肿瘤关系 | 第14-21页 |
| （一） 细胞衰老的介绍 | 第14-15页 |
| （二） 复制性衰老与过早性衰老 | 第15-16页 |
| （三） 衰老与肿瘤的相关性 | 第16-21页 |
| 三、组蛋白乙酰化修饰与物基因的转录调控 | 第21-26页 |
| （一） 真核生物的染色质结构与基因的转录调控 | 第21-22页 |
| （二） 组蛋白乙酰化修饰与转录调控 | 第22-23页 |
| （三） 组蛋白乙酰转移酶的分类与功能 | 第23-26页 |
| 四、本论文研究的内容和意义 | 第26-29页 |
| （一） 立题依据 | 第26-27页 |
| （二） 本论文的研究内容和意义 | 第27-29页 |
| 实验材料与方法 | 第29-44页 |
| 一、实验材料 | 第29-30页 |
| （一） 质粒 | 第29页 |
| （二） 抗体与蛋白质 | 第29页 |
| （三） 哺乳动物细胞系 | 第29页 |
| （四） 实验试剂 | 第29-30页 |
| 二、实验方法 | 第30-44页 |
| Ⅰ. 分子生物学实验方法 | 第30-37页 |
| （一） 分子克隆 | 第30页 |
| （二） 质粒大量制备的方法 | 第30-32页 |
| （三） 琼脂糖电泳 | 第32页 |
| （四） 哺乳动物细胞总RNA 的提取和反转录 | 第32-33页 |
| （五） PCR 和荧光实时定量（Real-time）PCR | 第33-35页 |
| （六） 染色质免疫沉淀实验（Chromatin immounoprecipitation，ChIP） | 第35-36页 |
| （七） RNA 干涉（RNAi） | 第36-37页 |
| Ⅱ. 细胞生物学实验方法 | 第37-43页 |
| （一） 哺乳动物细胞系的培养 | 第37页 |
| （二） 真核生物细胞系的脂质体和罗氏瞬时转染 | 第37页 |
| （三） 真核生物细胞的磷酸钙转染和荧光素酶报告基因检测 | 第37-39页 |
| （四） 建立稳定转染细胞系 | 第39页 |
| （五） 蛋白质的Western Blot 分析 | 第39-41页 |
| （六） 免疫荧光（Cellular Immonunofluorescence）实验 | 第41-42页 |
| （七） MTT 细胞活性检测实验 | 第42页 |
| （八） 衰老染色实验 | 第42-43页 |
| Ⅲ. 统计分析 | 第43-44页 |
| 实验结果与分析 | 第44-66页 |
| 一、BMP4 参与调节化疗药物阿霉素诱导肺癌细胞走向过早性衰老 | 第44-48页 |
| （一） 化疗药物阿霉素诱导肺癌细胞走向过早性衰老 | 第44-45页 |
| （二） BMP4 参与调节阿霉素诱导肺癌细胞走向过早性衰老 | 第45-48页 |
| 二、BMP4 参与调节阿霉素诱导衰老的的分子机制及意义 | 第48-57页 |
| （一） BMP4 过表达诱导肺癌细胞走向过早性衰老 | 第48-49页 |
| （二） BMP4诱导肺癌细胞走向过早性衰老重要通过上调周期相关蛋p16~（INK4a）和p21~（WAF1/cip1）表达实现的 | 第49-50页 |
| （三） 由BMP4 所激活的Smad 信号途径在BMP4 调节肺癌细胞衰老中其重要作用 | 第50-53页 |
| （四） p38MAPK 信号途径参与调节BMP4 诱导的肺癌细胞衰老 | 第53-57页 |
| 三、组蛋白乙酰化参与调节BMP4 对周期相关基因的表达调控 | 第57-63页 |
| （一） BMP4 通过促进p16~（INK4a）和p21WAF1基因转录来上调 p16INK4a 和p21~（WAF1/cip1） 蛋白水平 | 第57-60页 |
| （二） 乙酰转移酶p300 参与BMP4 促进启动子上组蛋白H3、H4 乙酰化水平增加 | 第60-61页 |
| （三） Smad 蛋白招募乙酰转移酶p300 到p16~（INK4a）和p21~（WAF1/cip1）启动子上促进组蛋白H3，H4 乙酰化水平增加 | 第61-63页 |
| 四、p53 和BMP4 途径共同参与阿霉素对衰老的促进作用 | 第63-66页 |
| （一） p53 在阿霉素诱导肺癌细胞走向过早性衰老中起重要调节作用 | 第63-65页 |
| （二） 共同干涉p53 和BMP4 明显抵制阿霉素对衰老的促进作用 | 第65-66页 |
| 讨论 | 第66-70页 |
| 一、BMP4 与化疗药物阿霉素抑制肿瘤的关系 | 第66-67页 |
| 二、BMP4 与 p53 途径共同参与调节阿霉素对衰老的促进作用 | 第67页 |
| 三、Smad 信号途径的效应因子 Smad 蛋白促进 BMP4 下游靶基因 p16~（INK4a）和p21~（WAF1/cip11）转录激活的具体机制 | 第67-68页 |
| 四、由BMP4 所激活的Smad 和p38MAPK 信号途径在调节BMP4 促进肺癌细胞衰老中相关性 | 第68页 |
| 五、组蛋白乙酰化在BMP4 促进衰老相关基因p16~（INK4a）和p21~（WAF1/cip1）表达中的调节作用 | 第68-70页 |
| 主要结论和创新点 | 第70-71页 |
| 一、主要结论 | 第70页 |
| 二、主要创新点 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-83页 |
| 附录 | 第83-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第86页 |
