| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 主要符号对照表 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-43页 |
| 1.1 杆状病毒简介 | 第16-26页 |
| 1.1.1 杆状病毒感染周期 | 第17-18页 |
| 1.1.2 BV与ODV的区别 | 第18-21页 |
| 1.1.3 AcMNPV出芽型病毒BV的侵染过程 | 第21-23页 |
| 1.1.4 几个与AcMNPV出芽型病毒粒子入侵有关的病毒基因 | 第23-24页 |
| 1.1.5 杆状病毒的应用 | 第24-26页 |
| 1.2 网格蛋白介导的内吞途径 | 第26-32页 |
| 1.2.1 网格蛋白介导的内吞系统与分子机制 | 第26-29页 |
| 1.2.2 Dynamin蛋白 | 第29-32页 |
| 1.3 Rab GTPase概述 | 第32-38页 |
| 1.3.1 Rab蛋白的亚细胞定位 | 第32-34页 |
| 1.3.2 Rab蛋白的结构和GTPase活性 | 第34-35页 |
| 1.3.3 Rab蛋白在细胞内吞、跨细胞转运以及胞吐中的作用 | 第35-37页 |
| 1.3.4 Rab蛋白与病毒侵染的关系 | 第37-38页 |
| 1.4 ESCRT-Ⅲ复合体概述 | 第38-42页 |
| 1.4.1 ESCRT系统 | 第38-40页 |
| 1.4.2 ESCRT-Ⅲ | 第40-42页 |
| 1.4.3 ESCRT系统与病毒侵染的关系 | 第42页 |
| 1.5 选题的目的和意义 | 第42-43页 |
| 第二章 材料与方法 | 第43-61页 |
| 2.1 实验材料 | 第43-46页 |
| 2.2 实验方法 | 第46-61页 |
| 2.2.1 细胞转染与病毒感染 | 第46-47页 |
| 2.2.2 细胞总RNA提取 | 第47页 |
| 2.2.3 dynamin和rab基因的转录本分析 | 第47-49页 |
| 2.2.4 质粒和bacmid的构建 | 第49-54页 |
| 2.2.5 细胞毒力测定 | 第54-55页 |
| 2.2.6 Dynamin抑制实验 | 第55页 |
| 2.2.7 激光共聚焦显微镜观察 | 第55页 |
| 2.2.8 病毒互补拯救实验 | 第55-56页 |
| 2.2.9 RNA干扰 | 第56-57页 |
| 2.2.10 标记基因表达和病毒基因组DNA复制分析 | 第57页 |
| 2.2.11 病毒入侵分析 | 第57-58页 |
| 2.2.12 cELISA(酶联免疫吸附实验)和嵌合体形成分析 | 第58-59页 |
| 2.2.13 直接膜融合(direct fusion)分析 | 第59-60页 |
| 2.2.14 病毒出芽释放分析 | 第60页 |
| 2.2.15 Western blot分析 | 第60-61页 |
| 第三章 Dynamin和Rab在AcMNPV侵染中的作用 | 第61-93页 |
| 3.1 AcMNPV侵染过程中宿主细胞dynamin和rab的转录水平分析 | 第61-64页 |
| 3.2 Dynamin在AcMNPV侵染过程中的作用 | 第64-69页 |
| 3.2.1 抑制dynamin对AcMNPV感染性病毒粒子产量的影响 | 第64-67页 |
| 3.2.2 Dynamin对BV入侵Sf9细胞起重要作用 | 第67-69页 |
| 3.3 草地贪夜蛾rab4,rab5,rab7,rab11基因克隆 | 第69-75页 |
| 3.3.1 Rab蛋白的氨基酸序列比对分析 | 第70-75页 |
| 3.4 Rab蛋白在AcMNPV侵染中的作用 | 第75-93页 |
| 3.4.1 GFP标签的Rab4,Rab5, Rab7和Rab11的表达 | 第75-76页 |
| 3.4.2 入侵的病毒粒子与Rab蛋白的共定位分析 | 第76-77页 |
| 3.4.3 Rab显性-负性突变体的表达 | 第77-78页 |
| 3.4.4 Rab5与Rab11参与感染性病毒粒子的产生 | 第78-81页 |
| 3.4.5 Rab5与Rab11对AcMNPV入侵宿主细胞起重要作用 | 第81-84页 |
| 3.4.6 Rab11对细胞表面GP64定位的影响 | 第84-87页 |
| 3.4.7 过表达DN Rab5或Rab11对AcMNPV出芽释放没有影响 | 第87-93页 |
| 第四章 ESCRT-Ⅲ复合体对AcMNPV侵染的影响 | 第93-103页 |
| 4.1 ESCRT-Ⅲ在内吞体成熟过程中的作用 | 第93-94页 |
| 4.2 材料与方法 | 第94-96页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第94-95页 |
| 4.2.2 RNA干扰 | 第95页 |
| 4.2.3 Western blot检测RNAi下调效率 | 第95页 |
| 4.2.4 RNAi下调ESCRT-Ⅲ组分对病毒DNA复制和基因表达影响分析 | 第95-96页 |
| 4.2.5 下调ESCRT-Ⅲ各组分表达对BV入侵的影响 | 第96页 |
| 4.2.6 下调ESCRT-Ⅲ各组分表达对感染性BV出芽释放的影响 | 第96页 |
| 4.3 ESCRT-Ⅲ在ACMNPV侵染中的作用 | 第96-103页 |
| 4.3.1 RNAi下调ESCRT-Ⅲ表达对AcMNPV感染性病毒产量的影响 | 第96-98页 |
| 4.3.2 RNAi下调ESCRT-Ⅲ各基因表达对BV入侵的影响 | 第98-100页 |
| 4.3.3 RNAi下调ESCRT-Ⅲ各基因表达对BV出芽释放的影响 | 第100-103页 |
| 第五章 结论与讨论 | 第103-108页 |
| 5.1 主要结论 | 第103页 |
| 5.2 讨论 | 第103-108页 |
| 参考文献 | 第108-128页 |
| 附录 | 第128-132页 |
| 附录A 柠檬酸钠缓冲液有效移除细胞表面病毒 | 第128-129页 |
| 附录B 草地贪夜蛾rab4,rab5,rab7和rab11基因序列 | 第129-132页 |
| 致谢 | 第132-133页 |
| 作者简介 | 第133页 |
