缩略语表 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
前言 | 第13-15页 |
文献回顾 | 第15-30页 |
第一部分 MIR-101及ZEB1在NSCLC组织和细胞系中的表达 | 第30-46页 |
1 材料 | 第30-33页 |
1.1 材料 | 第30-31页 |
1.2 实验相关的主要设备 | 第31-32页 |
1.3 使用的主要试剂 | 第32-33页 |
1.4 RT-PCR的引物设计 | 第33页 |
2 实验方法 | 第33-41页 |
2.1 细胞培养 | 第33-35页 |
2.2 Real-time PCR检测 | 第35-37页 |
2.3 Western Blot | 第37-41页 |
3 结果 | 第41-45页 |
4 讨论 | 第45-46页 |
第二部分 MIR-101对NSCLC细胞的增殖、侵袭和转移的影响 | 第46-65页 |
1 材料 | 第46-48页 |
1.1 细胞系 | 第46页 |
1.2 实验动物 | 第46页 |
1.3 使用的主要设备 | 第46-47页 |
1.4 使用的主要试剂 | 第47-48页 |
1.5 质粒 | 第48页 |
1.6 MicroRNA mimics | 第48页 |
2 实验方法 | 第48-57页 |
2.1 细胞培养 | 第48-49页 |
2.2 慢病毒的构建、包装和滴度 | 第49-50页 |
2.3 建立稳定表达荧光素酶(luc)的A549细胞系 | 第50-51页 |
2.4 细胞转染 | 第51-52页 |
2.5 MTT实验 | 第52页 |
2.6 平板细胞克隆形成实验 | 第52页 |
2.7 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第52-53页 |
2.8 Caspase-3活性检测 | 第53页 |
2.9 细胞凋亡ELISA Plus试剂盒定量检测细胞凋亡 | 第53-54页 |
2.10 划痕实验 | 第54页 |
2.11 细胞迁移及侵袭实验 | 第54-55页 |
2.12 动物实验 | 第55-56页 |
2.13 TUNEL测定细胞凋亡 | 第56-57页 |
3 结果 | 第57-63页 |
4 讨论 | 第63-65页 |
第三部分 MIR-101与ZEB-1对NSCLC增殖和转移的影响的机制研究 | 第65-85页 |
1 材料 | 第65-66页 |
1.1 细胞系 | 第65页 |
1.2 主要仪器 | 第65页 |
1.3 主要的试剂 | 第65-66页 |
2 方法 | 第66-79页 |
2.1 细胞培养 | 第66-67页 |
2.2双荧光素酶报告基因检测miR-101靶向调控ZEB-1 | 第67-68页 |
2.3 RT-PCR检测miR-101 mimics和miR-NC中ZEB-1表达的差异 | 第68-71页 |
2.4 Western Blot检测miR-101 mimics和miR-NC中ZEB-1蛋白表达的差异 | 第71-75页 |
2.5 Western Blot检测miR-101靶向调控ZEB1抑制肺癌生长及转移的机制 | 第75-79页 |
3 结果 | 第79-83页 |
4 讨论 | 第83-85页 |
小结 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-102页 |
个人简历和研究成果 | 第102-103页 |
致谢 | 第103-104页 |