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MiR-101靶向调控E盒锌指蛋白1(ZEB1)抑制肺癌生长和转移的作用与机制研究

缩略语表第5-7页
中文摘要第7-10页
ABSTRACT第10-12页
前言第13-15页
文献回顾第15-30页
第一部分 MIR-101及ZEB1在NSCLC组织和细胞系中的表达第30-46页
    1 材料第30-33页
        1.1 材料第30-31页
        1.2 实验相关的主要设备第31-32页
        1.3 使用的主要试剂第32-33页
        1.4 RT-PCR的引物设计第33页
    2 实验方法第33-41页
        2.1 细胞培养第33-35页
        2.2 Real-time PCR检测第35-37页
        2.3 Western Blot第37-41页
    3 结果第41-45页
    4 讨论第45-46页
第二部分 MIR-101对NSCLC细胞的增殖、侵袭和转移的影响第46-65页
    1 材料第46-48页
        1.1 细胞系第46页
        1.2 实验动物第46页
        1.3 使用的主要设备第46-47页
        1.4 使用的主要试剂第47-48页
        1.5 质粒第48页
        1.6 MicroRNA mimics第48页
    2 实验方法第48-57页
        2.1 细胞培养第48-49页
        2.2 慢病毒的构建、包装和滴度第49-50页
        2.3 建立稳定表达荧光素酶(luc)的A549细胞系第50-51页
        2.4 细胞转染第51-52页
        2.5 MTT实验第52页
        2.6 平板细胞克隆形成实验第52页
        2.7 流式细胞仪检测细胞凋亡第52-53页
        2.8 Caspase-3活性检测第53页
        2.9 细胞凋亡ELISA Plus试剂盒定量检测细胞凋亡第53-54页
        2.10 划痕实验第54页
        2.11 细胞迁移及侵袭实验第54-55页
        2.12 动物实验第55-56页
        2.13 TUNEL测定细胞凋亡第56-57页
    3 结果第57-63页
    4 讨论第63-65页
第三部分 MIR-101与ZEB-1对NSCLC增殖和转移的影响的机制研究第65-85页
    1 材料第65-66页
        1.1 细胞系第65页
        1.2 主要仪器第65页
        1.3 主要的试剂第65-66页
    2 方法第66-79页
        2.1 细胞培养第66-67页
        2.2双荧光素酶报告基因检测miR-101靶向调控ZEB-1第67-68页
        2.3 RT-PCR检测miR-101 mimics和miR-NC中ZEB-1表达的差异第68-71页
        2.4 Western Blot检测miR-101 mimics和miR-NC中ZEB-1蛋白表达的差异第71-75页
        2.5 Western Blot检测miR-101靶向调控ZEB1抑制肺癌生长及转移的机制第75-79页
    3 结果第79-83页
    4 讨论第83-85页
小结第85-86页
参考文献第86-102页
个人简历和研究成果第102-103页
致谢第103-104页

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