摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
主要符号表 | 第22-23页 |
1 绪论 | 第23-43页 |
1.1 研究背景与意义 | 第23页 |
1.2 NSCs的特性及影响其增殖与分化的主要外部因素 | 第23-32页 |
1.2.1 NSCs的生物学特性 | 第23-25页 |
1.2.2 NSCs的电生理学特性 | 第25-28页 |
1.2.3 影响NSCs增殖与分化的主要外部因素 | 第28-32页 |
1.3 导电聚合物及其在神经组织工程中的研究现状 | 第32-39页 |
1.3.1 导电聚合物简介 | 第32-36页 |
1.3.2 基于PPy和PAni的导电支架 | 第36-37页 |
1.3.3 基于PEDOT的导电支架 | 第37-39页 |
1.4 电刺激在神经组织工程中的研究现状 | 第39-41页 |
1.5 本文选题依据及主要研究思路 | 第41-43页 |
2 NSCs的分离、培养及鉴定 | 第43-59页 |
2.1 引言 | 第43页 |
2.2 实验材料与设备 | 第43-46页 |
2.2.1 实验动物 | 第43页 |
2.2.2 实验药品和试剂 | 第43-45页 |
2.2.3 实验仪器和设备 | 第45-46页 |
2.3 实验方法 | 第46-52页 |
2.3.1 培养基各组分的配制 | 第46-48页 |
2.3.2 NSCs的原代分离 | 第48页 |
2.3.3 NSCs的继代培养 | 第48-49页 |
2.3.4 NSCs生长曲线测定 | 第49页 |
2.3.5 NSCs生物学鉴定 | 第49-51页 |
2.3.6 统计学分析 | 第51-52页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第52-58页 |
2.4.1 细胞形态学 | 第52页 |
2.4.2 细胞生长曲线 | 第52-54页 |
2.4.3 干细胞特异性标志物表达 | 第54-57页 |
2.4.4 多向分化潜能 | 第57-58页 |
2.5 本章小结 | 第58-59页 |
3 PEDOT-HA/Cs/Gel三维导电支架的制备及表征 | 第59-78页 |
3.1 引言 | 第59-60页 |
3.2 实验材料与设备 | 第60-61页 |
3.2.1 实验药品和试剂 | 第60页 |
3.2.2 实验仪器和设备 | 第60-61页 |
3.2.3 细胞株 | 第61页 |
3.3 实验方法 | 第61-66页 |
3.3.1 PEDOT-HA/Cs/Gel三维导电支架的制备 | 第61-63页 |
3.3.2 傅立叶变换红外光谱与拉曼光谱分析 | 第63页 |
3.3.3 扫描电子显微镜与元素分析 | 第63页 |
3.3.4 孔隙率与吸水率检测 | 第63-64页 |
3.3.5 四探针电导率仪与电化学工作站分析 | 第64页 |
3.3.6 压缩模量与接触角检测 | 第64页 |
3.3.7 体外降解性分析 | 第64页 |
3.3.8 PEDOT-HA/Cs/Gel支架内PC12细胞接种与粘附率测定 | 第64-65页 |
3.3.9 PEDOT-HA/Cs/Gel支架内PC12细胞活性检测 | 第65页 |
3.3.10 PEDOT-HA/Cs/Gel支架内PC12细胞形态检测 | 第65页 |
3.3.11 统计学分析 | 第65-66页 |
3.4 实验结果与讨论 | 第66-77页 |
3.4.1 PEDOT-HA导电纳米颗粒表征 | 第66-68页 |
3.4.2 PEDOT-HA/Cs/Gel支架的化学结构分析 | 第68-69页 |
3.4.3 PEDOT-HA/Cs/Gel支架的微观结构 | 第69-70页 |
3.4.4 PEDOT-HA/Cs/Gel支架的孔隙率和吸水率 | 第70-71页 |
3.4.5 PEDOT-HA/Cs/Gel支架的电导率和电化学阻抗性能 | 第71-72页 |
3.4.6 PEDOT-HA/Cs/Gel支架的压缩模量和接触角 | 第72-74页 |
3.4.7 PEDOT-HA/Cs/Gel支架的体外降解率 | 第74-75页 |
3.4.8 PEDOT-HA/Cs/Gel支架内PC12细胞的粘附与活性 | 第75-76页 |
3.4.9 PEDOT-HA/Cs/Gel支架内PC12细胞的形态 | 第76-77页 |
3.5 本章小结 | 第77-78页 |
4 PEDOT/Cs/Gel三维导电支架的制备及表征 | 第78-94页 |
4.1 引言 | 第78页 |
4.2 实验材料与设备 | 第78-79页 |
4.2.1 实验药品和试剂 | 第78-79页 |
4.2.2 实验仪器和设备 | 第79页 |
4.2.3 细胞株 | 第79页 |
4.3 实验方法 | 第79-81页 |
4.3.1 PEDOT/Cs/Gel三维导电支架的制备 | 第79-80页 |
4.3.2 傅立叶变换红外光谱与拉曼光谱分析 | 第80页 |
4.3.3 扫描电子显微镜成像 | 第80页 |
4.3.4 孔隙率与吸水率检测 | 第80页 |
4.3.5 四探针电导率仪与电化学工作站分析 | 第80页 |
4.3.6 压缩模量与接触角检测 | 第80页 |
4.3.7 体外降解性分析 | 第80页 |
4.3.8 PEDOT/Cs/Gel支架内PC12细胞接种与粘附率测定 | 第80页 |
4.3.9 PEDOT/Cs/Gel支架内PC12细胞活性检测 | 第80页 |
4.3.10 PEDOT/Cs/Gel支架内PC12细胞形态检测 | 第80页 |
4.3.11 统计学分析 | 第80-81页 |
4.4 实验结果与讨论 | 第81-92页 |
4.4.1 PEDOT/Cs/Gel支架的化学结构分析 | 第81-83页 |
4.4.2 PEDOT/Cs/Gel支架的微观结构 | 第83-84页 |
4.4.3 PEDOT/Cs/Gel支架的孔隙率和吸水率 | 第84-85页 |
4.4.4 PEDOT/Cs/Gel支架的电导率和电化学阻抗性能 | 第85-86页 |
4.4.5 PEDOT/Cs/Gel支架的压缩模量和接触角 | 第86-88页 |
4.4.6 PEDOT/Cs/Gel支架的体外降解率 | 第88页 |
4.4.7 PEDOT/Cs/Gel支架内PC12细胞的粘附与活性 | 第88-91页 |
4.4.8 PEDOT/Cs/Gel支架内PC12细胞的形态 | 第91-92页 |
4.5 本章小结 | 第92-94页 |
5 三维导电支架对NSCs增殖与分化的影响 | 第94-113页 |
5.1 引言 | 第94-95页 |
5.2 实验材料与设备 | 第95-97页 |
5.2.1 实验药品和试剂 | 第95页 |
5.2.2 实验仪器和设备 | 第95-96页 |
5.2.3 细胞 | 第96-97页 |
5.3 实验方法 | 第97-100页 |
5.3.1 PEDOT-HA/Cs/Gel导电支架的制备 | 第97页 |
5.3.2 PEDOT/Cs/Gel导电支架的制备 | 第97页 |
5.3.3 导电支架内NSCs粘附性与活性的测定 | 第97页 |
5.3.4 细胞蛋白免疫荧光染色 | 第97页 |
5.3.5 RT-qPCR基因表达分析 | 第97-99页 |
5.3.6 细胞代谢水平检测 | 第99-100页 |
5.3.7 细胞形态观察 | 第100页 |
5.3.8 统计学分析 | 第100页 |
5.4 实验结果与讨论 | 第100-111页 |
5.4.1 NSCs在导电支架内的粘附性 | 第100-101页 |
5.4.2 NSCs在导电支架内的增殖 | 第101-106页 |
5.4.3 NSCs在导电支架内的代谢情况 | 第106-107页 |
5.4.4 NSCs在导电支架内的分化 | 第107-111页 |
5.5 本章小结 | 第111-113页 |
6 三维导电支架协同电刺激对NSCs增殖与分化的影响 | 第113-125页 |
6.1 引言 | 第113页 |
6.2 实验材料与设备 | 第113-114页 |
6.2.1 实验药品和试剂 | 第113-114页 |
6.2.2 实验仪器和设备 | 第114页 |
6.2.3 细胞 | 第114页 |
6.3 实验方法 | 第114-117页 |
6.3.1 电刺激装置的设计与制备 | 第114-115页 |
6.3.2 不同电压强度下NSCs的活性检测 | 第115-116页 |
6.3.3 电刺激下NSCs增殖与分化相关蛋白及基因的表达分析 | 第116页 |
6.3.4 电刺激与离子通道阻断剂作用NSCs分化 | 第116页 |
6.3.5 胞内Ca~(2+)成像 | 第116-117页 |
6.3.6 统计学分析 | 第117页 |
6.4 实验结果与讨论 | 第117-124页 |
6.4.1 电刺激对导电支架内NSCs活性的影响 | 第117-119页 |
6.4.2 电刺激对导电支架内NSCs增殖的影响 | 第119-121页 |
6.4.3 电刺激对导电支架内NSCs分化的影响 | 第121-122页 |
6.4.4 电刺激与离子通道阻断剂对NSCs分化的影响 | 第122-124页 |
6.5 本章小结 | 第124-125页 |
7 结论与展望 | 第125-128页 |
7.1 结论 | 第125-126页 |
7.2 创新点 | 第126-127页 |
7.3 展望 | 第127-128页 |
参考文献 | 第128-141页 |
附录 英文缩略词 | 第141-143页 |
攻读博士学位期间科研项目及科研成果 | 第143-145页 |
致谢 | 第145-147页 |
作者简介 | 第147页 |