缩略语表 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-11页 |
英文摘要 | 第11-15页 |
前言 | 第16-17页 |
文献回顾 | 第17-38页 |
1 材料 | 第38-39页 |
1.1 实验动物 | 第38页 |
1.2 主要试剂 | 第38-39页 |
2 方法 | 第39-43页 |
2.1 MEFs细胞的分离培养 | 第39-40页 |
2.2 细胞培养 | 第40-41页 |
2.2.1 细胞培养与传代 | 第40页 |
2.2.2 细胞复苏 | 第40页 |
2.2.3 细胞冻存 | 第40-41页 |
2.3 细胞活力测定(MTT实验) | 第41页 |
2.4 细胞总ROS测定 | 第41页 |
2.5 细胞线粒体ROS测定 | 第41页 |
2.6 衰老相关的 β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色 | 第41页 |
2.7 Western blot | 第41-42页 |
2.8 MDC染色 | 第42页 |
2.9 腺病毒转染 | 第42页 |
2.10 自噬小体的观察 | 第42-43页 |
2.11 统计学分析 | 第43页 |
3 结果 | 第43-67页 |
3.1 CHS对H_2O_2诱导的衰老的保护作用 | 第43-48页 |
3.1.1 CHS和H_2O_2对MEFs细胞活力的影响 | 第43页 |
3.1.2 CHS对H_2O_2诱导的细胞总ROS水平影响 | 第43-44页 |
3.1.3 CHS对H_2O_2诱导的线粒体ROS水平影响 | 第44-45页 |
3.1.4 CHS对H_2O_2诱导的细胞衰老的SA-β-gal染色的影响 | 第45-46页 |
3.1.5 CHS对H_2O_2诱导的细胞衰老的相关标志蛋白表达的影响 | 第46页 |
3.1.6 CHS对H_2O_2诱导的细胞衰老的氧化应激通路蛋白Nrf2、HO-1、GCLC、GCLM的影响 | 第46-48页 |
3.2 CHS对MEFs复制性衰老的保护作用 | 第48-67页 |
3.2.1 CHS对MEFs细胞活力的影响 | 第48页 |
3.2.2 不同浓度CHS对MEFs细胞自噬的影响 | 第48页 |
3.2.3 CHS(5μg·mL~(-1))处理不同时间对MEFs细胞自噬的影响 | 第48-51页 |
3.2.4 MEFs细胞复制性衰老模型的建立 | 第51页 |
3.2.5 MEFs细胞复制性衰老模型中自噬情况 | 第51-56页 |
3.2.6 CHS对能够抗MEFs细胞衰老 | 第56页 |
3.2.7 CHS对复制性衰老MEFs细胞自噬的诱导作用 | 第56-60页 |
3.2.8 CHS对复制性衰老MEFs细胞自噬相关通路的影响 | 第60页 |
3.2.9 CHS通过AMPK/mTOR/ULK1通路诱导自噬 | 第60-64页 |
3.2.10 Compound C对CHS抗衰老作用的影响 | 第64-67页 |
4 讨论 | 第67-76页 |
4.1 H_2O_2诱导的细胞衰老模型中CHS的抗衰老作用 | 第67-68页 |
4.2 复制性衰老模型中CHS的抗衰老作用 | 第68-76页 |
小结 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-89页 |
附录 | 第89-98页 |
个人简历和研究成果 | 第98-99页 |
致谢 | 第99页 |