| 中文摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第一部分 前言 | 第8-20页 |
| 1.1 植物雄配子体的发生与发育 | 第8-10页 |
| 1.1.1 小孢子发生 | 第8-9页 |
| 1.1.2 雄配子体发育 | 第9-10页 |
| 1.1.3 花粉萌发及花粉管的生长 | 第10页 |
| 1.2 植物雄配子体发生的基因调控 | 第10-13页 |
| 1.2.1 小孢子发生的基因调控 | 第11-12页 |
| 1.2.2 雄配子体发育的基因调控 | 第12页 |
| 1.2.3 花粉管萌发和生长的基因调控 | 第12-13页 |
| 1.3 植物雌配子体的发生与发育 | 第13-16页 |
| 1.3.1 大孢子发生 | 第14-15页 |
| 1.3.2 雌配子体的发育 | 第15-16页 |
| 1.4 植物雌配子体发生的基因调控 | 第16-19页 |
| 1.4.1 大孢子发生的基因调控 | 第17-18页 |
| 1.4.2 雌配子体发育的基因调控 | 第18-19页 |
| 1.5 本实验研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二部分 材料和方法 | 第20-32页 |
| 2.1 材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 细菌菌株和质粒载体 | 第20页 |
| 2.1.3 工具酶和试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.4 常用抗生素配方 | 第21页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第21页 |
| 2.2 常用溶液和培养基配方 | 第21-24页 |
| 2.2.1 常用溶液配方 | 第21-22页 |
| 2.2.2 常用培养基配方 | 第22-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-32页 |
| 2.3.1 配子突变体筛选和种植 | 第24-25页 |
| 2.3.2 突变体表型观察 | 第25-26页 |
| 2.3.2.1 亚历山大染色 | 第25页 |
| 2.3.2.2 GUS染色 | 第25页 |
| 2.3.2.3 DAPI染色 | 第25页 |
| 2.3.2.4 花粉管苯胺蓝染色 | 第25-26页 |
| 2.3.2.5 花粉管萌发实验 | 第26页 |
| 2.3.2.6 胚胎透明及观察 | 第26页 |
| 2.3.2.7 胚囊观察(CLSM) | 第26页 |
| 2.3.3 突变体的回交实验及遗传分析 | 第26-27页 |
| 2.3.4 TAIL-PCR及纯杂合鉴定PCR | 第27-30页 |
| 2.3.4.1 CTAB提取植物DNA | 第27页 |
| 2.3.4.2 TAIL PCR | 第27-29页 |
| 2.3.4.3 PCR鉴定纯杂合 | 第29页 |
| 2.3.4.4 突变体目的基因半定量 | 第29-30页 |
| 2.3.4.5 比对测序结果 | 第30页 |
| 2.3.5 全长基因克隆、分子互补载体构建以及转染相应突变体拟南芥 | 第30-32页 |
| 2.3.5.1 全长基因克隆 | 第30页 |
| 2.3.5.2 互补载体构建 | 第30-31页 |
| 2.3.5.3 农杆菌转染相应突变体拟南芥 | 第31-32页 |
| 第三部分 实验结果 | 第32-49页 |
| 3.1 KD361自交F2代分离比 | 第32-34页 |
| 3.2 KD361与野生型拟南芥正反交F1代分离比 | 第34页 |
| 3.3 拟南芥野生型(LER)和KD361花粉粒亚历山大染色 | 第34-35页 |
| 3.4 拟南芥野生型(LER)和KD361花粉粒DAPI染色 | 第35页 |
| 3.5 HTR10和HTR361花粉粒的荧光观察和统计 | 第35-36页 |
| 3.6 拟南芥野生型(LER)和KD361花粉萌发实验 | 第36-37页 |
| 3.7 拟南芥野生型(LER)和KD361花粉管苯胺蓝染色 | 第37页 |
| 3.8 KD361花粉管适应性(生长能力)试验 | 第37-38页 |
| 3.9 拟南芥野生型(LER)和KD361的角果结实表型与统计 | 第38-39页 |
| 3.10 HTR10及HTR361受精情况观察与统计 | 第39-40页 |
| 3.11 拟南芥野生型(LER)和KD361早期胚胎表型观察与统计 | 第40-42页 |
| 3.12 拟南芥野生型(LER)和KD361胚囊发育表型观察与统计 | 第42-45页 |
| 3.13 克隆KD361 Ds插入边界基因组片段、序列比对及插入位点分析 | 第45页 |
| 3.14 KD361 Ds插入位点的纯杂合鉴定 | 第45-46页 |
| 3.15 KD361缺失基因AT4G00620等位SAIL_720_G12表型与统计 | 第46-47页 |
| 3.16 AT4G00620等位突变体SAIL_720_G12纯杂合鉴定 | 第47-48页 |
| 3.17 AT4G00620基因全长互补载体构建 | 第48-49页 |
| 第四部分 结论与讨论 | 第49-53页 |
| 4.1 KD361实验结果的结论 | 第49-50页 |
| 4.1.1 KD361雌雄配子均有缺陷,雌配子缺陷大于雄配子 | 第49-50页 |
| 4.1.2 KD361是Ds插入纯合子致死的突变体 | 第50页 |
| 4.1.3 KD361的Ds插入造成137kb的基因组序列缺失 | 第50页 |
| 4.2 对KD361实验结果的讨论 | 第50-51页 |
| 4.3 总结和展望 | 第51-53页 |
| 4.3.1 总结 | 第51-52页 |
| 4.3.2 展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 附录 | 第61-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
