| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 前言 | 第11-22页 |
| 1.1 油菜素内酯相关受体激酶BAK1 | 第11-13页 |
| 1.1.1 拟南芥AtBAK1 | 第11-12页 |
| 1.1.2 番茄S1BAK1 | 第12-13页 |
| 1.2 BAK1互作组分及BAK1功能 | 第13-18页 |
| 1.2.1 BAK1已鉴定的互作组分 | 第13页 |
| 1.2.2 BAK1参与调控BR信号 | 第13-14页 |
| 1.2.3 BAK1参与调控细胞死亡 | 第14-16页 |
| 1.2.4 BAK1参与调控植物细胞免疫反应 | 第16-18页 |
| 1.3 BAK1与SERKs家族其他成员的重叠作用 | 第18-19页 |
| 1.4 MBP pull-down原理 | 第19-20页 |
| 1.5 课题研究背景 | 第20-21页 |
| 1.6 课题研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-32页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 菌株及载体 | 第22页 |
| 2.1.3 试剂盒及基本试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第23页 |
| 2.1.5 主要引物 | 第23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-32页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第23页 |
| 2.2.2 核酸分子实验方法 | 第23-26页 |
| 2.2.2.1 拟南芥RNA的提取及反转录 | 第23-24页 |
| 2.2.2.2 载体构建 | 第24-26页 |
| 2.2.3 蛋白相关试验方法 | 第26-32页 |
| 2.2.3.1 融合蛋白原核表达及菌液蛋白提取 | 第26-28页 |
| 2.2.3.2 融合蛋白的纯化 | 第28-29页 |
| 2.2.3.3 SDS-PAGE胶的配制 | 第29页 |
| 2.2.3.4 Western Blot | 第29-30页 |
| 2.2.3.5 MBP-pull down检测蛋白互作 | 第30页 |
| 2.2.3.6 蛋白磷酸化及脱磷酸化检测 | 第30-31页 |
| 2.2.3.7 植物材料免疫沉淀 | 第31页 |
| 2.2.3.8 拟南芥种子消毒 | 第31-32页 |
| 第三章 结果与分析 | 第32-47页 |
| 3.1 BAK1激酶活性分析 | 第32-37页 |
| 3.1.1 BAK1-flag及其突变体原核表达 | 第32页 |
| 3.1.2 BAK1-flag及其突变体体外表达与诱导时间及温度的关系 | 第32-35页 |
| 3.1.3 BAK1-flag及特异突变体体外表达的蛋白修饰 | 第35-36页 |
| 3.1.4 BAK1-flag抑制菌落生长及其与激酶活性的关系 | 第36-37页 |
| 3.2 BAK1特异突变体互作组分的筛选 | 第37-43页 |
| 3.2.1 互作组分原核表达载体的构建 | 第37-39页 |
| 3.2.2 互作组分的原核表达及蛋白纯化 | 第39-41页 |
| 3.2.3 BAK1及特异位点互作组分筛选 | 第41-43页 |
| 3.3 BAK1转基因植株的活体磷酸化检测 | 第43-44页 |
| 3.4 番茄SlBAK1(SERK3)的生物信息学分析 | 第44-47页 |
| 第四章 讨论 | 第47-51页 |
| 4.1 蛋白质相互作用方法的探讨 | 第47-48页 |
| 4.2 AtBAK1体外表达蛋白修饰 | 第48页 |
| 4.3 SlBAK1基因功能研究 | 第48页 |
| 4.4 BAK1及其特异位点突变体差异互作组分 | 第48-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 | 第57-63页 |
| 附录1 载体图谱 | 第57-58页 |
| 附录2 主要试剂配制 | 第58-61页 |
| 附录3 试验相关引物 | 第61-62页 |
| 附录4 载体构建列表 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |
