| 中文摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 英文缩略词 | 第8-9页 |
| 前言 | 第9-10页 |
| 第一篇 文献综述 | 第10-32页 |
| 1 转基因鸡研究进展 | 第10-13页 |
| 1.1 转基因鸡研究意义 | 第10页 |
| 1.2 转基因鸡制备方法 | 第10-13页 |
| 1.2.1 显微注射法 | 第11页 |
| 1.2.2 胚盘细胞 | 第11-12页 |
| 1.2.3 精原干细胞 | 第12页 |
| 1.2.4 反转录病毒载体法 | 第12-13页 |
| 2 PGCs介导法制备转基因鸡 | 第13-17页 |
| 2.1 鸡PGCs研究进展 | 第13-15页 |
| 2.2 Vasa的研究进展 | 第15-16页 |
| 2.3 Nanos的研究进展 | 第16-17页 |
| 3 转座子介导法制备转基因鸡 | 第17-24页 |
| 3.1 PB转座子的研究进展 | 第18-19页 |
| 3.1.1 PB转座子的结构 | 第18-19页 |
| 3.1.2 PB转座子的应用 | 第19页 |
| 3.2 SB转座子的研究进展 | 第19-23页 |
| 3.2.1 SB转座子的结构 | 第19-21页 |
| 3.2.2 SB转座子的应用 | 第21-23页 |
| 3.3 Tol2的研究进展 | 第23-24页 |
| 3.3.1 Tol2的结构 | 第23页 |
| 3.3.2 Tol2转座子的应用 | 第23-24页 |
| 参考文献 | 第24-32页 |
| 第二篇 实验研究 | 第32-63页 |
| 第一章 不同转座子介导鸡胚性腺PGC基因转移效率比较 | 第32-38页 |
| 前言 | 第32-33页 |
| 1 材料与方法 | 第33-34页 |
| 1.1 菌株、载体质粒和主要试剂 | 第33页 |
| 1.2 pT3-PST-CAG-GFP质粒DNA制备 | 第33页 |
| 1.3 鸡胚注射方案 | 第33-34页 |
| 1.4 数据统计分析 | 第34页 |
| 2 结果 | 第34-37页 |
| 2.1 胚盘注射对鸡胚成活率的影响 | 第34-35页 |
| 2.2 三种转座子介导制备转基因鸡效率的比较 | 第35-37页 |
| 3 讨论 | 第37-38页 |
| 第二章 PGCs特异表达载体构建及表达特性研究 | 第38-52页 |
| 前言 | 第38-39页 |
| 1 材料与方法 | 第39-43页 |
| 1.1 菌株及试剂 | 第39-40页 |
| 1.2 仪器设备 | 第40页 |
| 1.3 载体构建所用引物的设计与合成 | 第40-41页 |
| 1.4 pSV40En-PSP-GFP载体构建 | 第41-42页 |
| 1.5 pSV40En-PSP-SB100X载体构建 | 第42-43页 |
| 1.6 pSV40En-PSP-GFP鸡胚注射方案 | 第43页 |
| 1.7 pSV40En-PSP-SB100X鸡胚注射方案 | 第43页 |
| 1.8 数据统计分析 | 第43页 |
| 2 结果 | 第43-51页 |
| 2.1 SV40 Enhancer元件的克隆与鉴定 | 第43-44页 |
| 2.2 PSP Promoter元件的克隆与鉴定 | 第44页 |
| 2.3 SB100X元件的克隆与鉴定 | 第44-45页 |
| 2.4 pSV40En-PSP-GFP载体的构建与鉴定 | 第45-46页 |
| 2.4.1 pSV40En-GFP载体的构建与鉴定 | 第45-46页 |
| 2.4.2 pSV40En-PSP-GFP载体的构建与鉴定 | 第46页 |
| 2.5 pSV40En-PSP-SB100X载体的构建与鉴定 | 第46-47页 |
| 2.6 不同包埋剂对转基因鸡制备效率的比较 | 第47-49页 |
| 2.6.1 不同包埋剂对鸡胚成活率的影响 | 第47-48页 |
| 2.6.2 不同包埋剂对鸡胚阳性率的影响 | 第48-49页 |
| 2.7 PSP启动子对生殖系基因转移效率的影响 | 第49-51页 |
| 2.7.1 PSP启动子对转座子介导鸡胚成活率的影响 | 第49-50页 |
| 2.7.2 PSP启动子生殖系转基因效率 | 第50-51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| 第三章 Nanos 3'UTR元件对生殖系转基因效率的影响 | 第52-63页 |
| 前言 | 第52-53页 |
| 1 材料与方法 | 第53-56页 |
| 1.1 菌株及试剂 | 第53-54页 |
| 1.2 仪器设备 | 第54页 |
| 1.3 载体构建所用引物的设计与合成 | 第54-55页 |
| 1.4 pTNT-GFP-Nanos载体构建 | 第55页 |
| 1.5 pTNT-SB100X-Nanos载体构建 | 第55-56页 |
| 1.6 体外转录转座酶mRNA | 第56页 |
| 1.7 pTNT-SB100X-Nanos鸡胚注射方案 | 第56页 |
| 2 结果 | 第56-61页 |
| 2.1 Nanos3' UTR元件的克隆与鉴定 | 第57页 |
| 2.2 GFP基因的克隆与鉴定 | 第57-58页 |
| 2.3 pTNT-SB100X-Nanos载体构建与鉴定 | 第58-59页 |
| 2.4 pTNT-GFP-Nanos载体构建与鉴定 | 第59-60页 |
| 2.4.1 pTNT-GFP框架构建与鉴定 | 第59页 |
| 2.4.2 pTNT-GFP-Nanos载体构建与鉴定 | 第59-60页 |
| 2.5 Nanos 3'UTR对PGCs基因转移效率的影响 | 第60-61页 |
| 3 讨论 | 第61-63页 |
| 全文结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读学位期间发表学术论文 | 第66-67页 |
