| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-24页 |
| 1 课题研究的背景 | 第9页 |
| 2 国内外研究进展 | 第9-22页 |
| 2.1 高等植物启动子研究进展 | 第9-13页 |
| 2.1.1 组成型启动子 | 第10页 |
| 2.1.2 诱导型启动子 | 第10-11页 |
| 2.1.3 组织特异性启动子 | 第11-13页 |
| 2.2 花特异性启动子研究进展 | 第13-15页 |
| 2.3 启动子分析方法研究进展 | 第15-20页 |
| 2.3.1 启动子分离方法 | 第15-18页 |
| 2.3.2 启动子的生物信息学分析方法和预测 | 第18-19页 |
| 2.3.3 启动子的实验分析方法 | 第19-20页 |
| 2.4 启动子与转录因子互作研究进展 | 第20-22页 |
| 2.4.1 凝胶阻滞实验 | 第21页 |
| 2.4.2 酵母单杂交 | 第21-22页 |
| 2.4.3 免疫沉淀技术 | 第22页 |
| 2.4.4 双分子荧光素酶实验 | 第22页 |
| 3 研究目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 矮牵牛PhGRP基因启动子的缺失突变分析 | 第24-43页 |
| 1 试验材料 | 第24页 |
| 1.1 植物材料 | 第24页 |
| 1.2 药品与试剂 | 第24页 |
| 1.3 载体和菌株 | 第24页 |
| 2 试验方法 | 第24-33页 |
| 2.1 PhGRP启动子5'端缺失载体构建 | 第24-29页 |
| 2.1.1 PhGRP启动子5'端缺失片段的扩增 | 第24-25页 |
| 2.1.2 片段回收 | 第25-26页 |
| 2.1.3 转化大肠杆菌感受态DH5α | 第26-27页 |
| 2.1.4 目的片段与载体连接 | 第27-28页 |
| 2.1.5 表达载体热激转化大肠杆菌 | 第28页 |
| 2.1.6 表达载体转化EHA105根癌农杆菌 | 第28-29页 |
| 2.2 pPhGRP全长及5'端缺失载体转化矮牵牛 | 第29-30页 |
| 2.2.1 转化矮牵牛'W115'培养基 | 第29页 |
| 2.2.2 矮牵牛'W115'转化步骤 | 第29-30页 |
| 2.3 pPhGRP5'端缺失载体转化拟南芥 | 第30-31页 |
| 2.4 转基因植株阳性检测 | 第31-32页 |
| 2.5 转基因阳性植株的组织化学染色 | 第32-33页 |
| 2.5.1 GUS染液配制 | 第32-33页 |
| 2.5.2 GUS化学组织染色方法 | 第33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-41页 |
| 3.1 pPhGRP 5'端缺失载体的构建 | 第33-35页 |
| 3.2 转基因植株的获得及阳性检测 | 第35-37页 |
| 3.3 pPhGRP全长及5'端缺失片段的表达模式 | 第37-41页 |
| 3.3.1 pPhGRP全长及5'端缺失片段转化矮牵牛 | 第37-39页 |
| 3.3.2 pPhGRP5'端缺失片段转化拟南芥 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 pPhGRP与转录因子的互作分析 | 第43-49页 |
| 1 试验材料 | 第43页 |
| 2 方法 | 第43-46页 |
| 2.1 酵母单杂交Prey载体构建 | 第43-44页 |
| 2.2 Prey载体转化酵母细胞 | 第44-46页 |
| 2.2.1 酵母感受态的制备 | 第44-45页 |
| 2.3.2 转化酵母感受态 | 第45-46页 |
| 2.3 pPhGRP与转录因子的互作验证 | 第46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-49页 |
| 第四章 结论与展望 | 第49-50页 |
| 1 结论 | 第49页 |
| 2 展望 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
