异柠檬酸裂解酶基因克隆与表达特征研究
| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-6页 |
| 第一章 绪论 | 第6-14页 |
| ·本课题的来源及研究意义 | 第6页 |
| ·异柠檬酸裂解酶的基本介绍 | 第6-8页 |
| ·异柠檬酸裂解酶与结核分枝杆菌 | 第8-11页 |
| ·异柠檬酸裂解酶作为研发抗结核病靶点 | 第11-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-25页 |
| ·主要试剂及器材 | 第14-15页 |
| ·主要仪器 | 第15页 |
| ·细菌菌株及质粒 | 第15页 |
| ·主要培养基及试剂配方 | 第15-16页 |
| ·基因组DNA提取 | 第16-17页 |
| ·DNA的提取及纯化 | 第17-19页 |
| ·载体构建 | 第19-22页 |
| ·蛋白诱导与纯化 | 第22页 |
| ·表达产物的鉴定(SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳) | 第22-25页 |
| 第三章 实验结果 | 第25-36页 |
| ·ICL基因提取及测序鉴定 | 第25-28页 |
| ·PET28-ICL重组原核表达质粒的构建 | 第28-29页 |
| ·重组表达产物的SDS-PAGE鉴定结果 | 第29-30页 |
| ·SDS-PAGE鉴定产物诱导表达条件 | 第30-31页 |
| ·SDS-PAGE鉴定表达产物存在形式 | 第31-32页 |
| ·ICL的纯化结果 | 第32-33页 |
| ·纯化后重组蛋白含量的测定 | 第33-34页 |
| ·重组ICL的酶学性质测定 | 第34-35页 |
| ·异柠檬酸裂解酶三维结构分析 | 第35-36页 |
| 讨论 | 第36-41页 |
| ·ICL基因提取及测序鉴定 | 第36页 |
| ·PET28-ICL重组原核表达质粒的构建 | 第36-37页 |
| ·PET28-ICL质粒的原核表达 | 第37-38页 |
| ·PET28-ICL质粒原核表达的条件优化 | 第38页 |
| ·ICL的纯化 | 第38-39页 |
| ·重组ICL的酶学性质测定 | 第39页 |
| ·异柠檬酸裂解酶的三维结构分析 | 第39-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-46页 |
| 攻读硕士学位期间研究成果 | 第46-47页 |
