摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第11-33页 |
1.1 桦褐孔菌的研究现状 | 第11-15页 |
1.1.1 桦褐孔菌简介 | 第11页 |
1.1.2 桦褐孔菌的化学成分和药理学活性 | 第11-14页 |
1.1.2.1 抗氧化活性 | 第11-12页 |
1.1.2.2 抗突变活性 | 第12页 |
1.1.2.3 抗炎活性 | 第12-13页 |
1.1.2.4 抗糖尿病 | 第13页 |
1.1.2.5 抗菌 | 第13页 |
1.1.2.6 保肝 | 第13-14页 |
1.1.2.7 抗病毒 | 第14页 |
1.1.3 桦褐孔菌液体深层发酵 | 第14-15页 |
1.2 三萜类物质的研究进展 | 第15-25页 |
1.2.1 三萜化合物的化学结构 | 第15-16页 |
1.2.2 三萜化合物的生物活性 | 第16-19页 |
1.2.2.1 抑制肿瘤作用 | 第16-17页 |
1.2.2.2 抗氧化作用 | 第17页 |
1.2.2.3 抗病毒作用 | 第17页 |
1.2.2.4 抗糖尿病作用 | 第17-18页 |
1.2.2.5 护肝作用 | 第18页 |
1.2.2.6 抗菌作用 | 第18-19页 |
1.2.2.7 对免疫系统的作用 | 第19页 |
1.2.3 三萜化合物的提取 | 第19-21页 |
1.2.3.1 溶剂提取法 | 第19-20页 |
1.2.3.2 超声循环提取法 | 第20页 |
1.2.3.3 超临界流体萃取法 | 第20-21页 |
1.2.3.4 化学衍生法 | 第21页 |
1.2.3.5 半仿生提取法 | 第21页 |
1.2.4 三萜化合物的分离 | 第21-24页 |
1.2.4.1 凝胶色谱 | 第22页 |
1.2.4.2 反相硅胶柱色谱 | 第22-23页 |
1.2.4.3 大孔吸附树脂色谱 | 第23页 |
1.2.4.4 制备型/半制备型HPLC | 第23-24页 |
1.2.5 三萜化合物的检测 | 第24-25页 |
1.2.5.1 分光光度法 | 第24页 |
1.2.5.3 气相色谱法(GC) | 第24-25页 |
1.2.5.4 高效液相色谱法(HPLC) | 第25页 |
1.3 三萜类化合物的抗肿瘤作用 | 第25-31页 |
1.3.1 细胞毒作用 | 第25-26页 |
1.3.2 促进细胞凋亡 | 第26-29页 |
1.3.2.1 引发线粒体功能障碍 | 第26-27页 |
1.3.2.2 调控凋亡相关蛋白 | 第27-28页 |
1.3.2.3 干预细胞信号传导通路 | 第28-29页 |
1.3.3 对细胞周期的阻滞作用 | 第29页 |
1.3.4 调节机体免疫功能 | 第29-30页 |
1.3.5 其他抗肿瘤机制 | 第30-31页 |
1.4 杜仲简介 | 第31页 |
1.5 本论文的主要研究内容 | 第31-33页 |
第二章 桦褐孔菌三萜的发酵制备、提取分离 | 第33-42页 |
2.1 引言 | 第33页 |
2.2 实验材料 | 第33-35页 |
2.2.1 原始菌种 | 第33页 |
2.2.2 实验试剂 | 第33-34页 |
2.2.3 实验仪器及设备 | 第34-35页 |
2.2.4 培养基 | 第35页 |
2.2.4.1 活化培养基(MEA) | 第35页 |
2.2.4.2 种子培养基 | 第35页 |
2.2.4.3 基础发酵培养基 | 第35页 |
2.3 实验方法 | 第35-39页 |
2.3.1 原始菌种的活化与培养 | 第35-36页 |
2.3.2 菌种保藏 | 第36页 |
2.3.3 桦褐孔菌的斜面平面扩大培养 | 第36页 |
2.3.4 基础培养基中桦褐孔菌发酵 | 第36-37页 |
2.3.4.1 液体种子的制备 | 第36-37页 |
2.3.4.2 桦褐孔菌液体深层发酵 | 第37页 |
2.3.5 桦褐孔菌菌丝体三萜化合物的提取和分离 | 第37-38页 |
2.3.5.1 桦褐孔菌菌丝体三萜化合物提取 | 第37页 |
2.3.5.2 桦褐孔菌菌丝体三萜化合物的分离 | 第37-38页 |
2.3.6 桦褐孔菌菌丝体干重和总三萜含量的测定 | 第38-39页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第39-41页 |
2.5 小结 | 第41-42页 |
第三章 桦褐孔菌粗三萜的抗癌活性 | 第42-62页 |
3.1 引言 | 第42页 |
3.2 实验材料 | 第42-43页 |
3.2.1 原始细胞株 | 第42页 |
3.2.2 实验试剂 | 第42-43页 |
3.2.3 实验仪器 | 第43页 |
3.3 实验方法 | 第43-46页 |
3.3.1 细胞复苏与传代 | 第43-44页 |
3.3.1.1 细胞复苏 | 第43页 |
3.3.1.2 细胞传代 | 第43-44页 |
3.3.2 细胞形态学观察 | 第44页 |
3.3.3 MTT法测定细胞存活率 | 第44页 |
3.3.4 细胞周期实验 | 第44-45页 |
3.3.5 细胞凋亡实验 | 第45页 |
3.3.6 统计学分析方法 | 第45-46页 |
3.5 结果与分析 | 第46-59页 |
3.5.1 细胞形态观察 | 第46-47页 |
3.5.2 MTT实验 | 第47-56页 |
3.5.2.1 粗三萜对癌细胞生长的影响 | 第47-51页 |
3.5.2.2 不同分部对癌细胞生长的影响 | 第51-56页 |
3.5.3 细胞周期实验 | 第56-58页 |
3.5.4 细胞凋亡实验 | 第58-59页 |
3.6 小结 | 第59-61页 |
3.7 讨论 | 第61-62页 |
第四章 液体深层发酵桦褐孔菌三萜类成分分析 | 第62-67页 |
4.1 引言 | 第62页 |
4.2 实验材料 | 第62-64页 |
4.2.1 原始菌种 | 第62页 |
4.2.2 实验试剂 | 第62-63页 |
4.2.3 实验仪器 | 第63-64页 |
4.2.4 发酵培养基 | 第64页 |
4.3 试验方法 | 第64页 |
4.3.1 桦褐孔菌液体深层发酵 | 第64页 |
4.3.2 样品制备与HPLC分析 | 第64页 |
4.4 结果与讨论 | 第64-66页 |
4.5 小结与讨论 | 第66-67页 |
第五章 杜仲对桦褐孔菌液体深层发酵产三萜化合物的作用 | 第67-75页 |
5.1 引言 | 第67页 |
5.2 实验材料 | 第67-70页 |
5.2.1 原始菌种 | 第67-68页 |
5.2.2 培养基 | 第68页 |
5.2.2.1 种子培养基 | 第68页 |
5.2.2.2 发酵培养基 | 第68页 |
5.2.3 实验试剂 | 第68-69页 |
5.2.4 实验仪器 | 第69-70页 |
5.2.5 杜仲皮和杜仲壳的处理 | 第70页 |
5.3 实验方法 | 第70页 |
5.3.1 含杜仲培养基中的桦褐孔菌发酵 | 第70页 |
5.3.2 桦褐孔菌菌丝体干重和总三萜含量的测定 | 第70页 |
5.4 结果与讨论 | 第70-73页 |
5.4.1 杜仲壳对桦褐孔菌液体深层发酵产三萜化合物的影响 | 第70-72页 |
5.4.2 杜仲皮对桦褐孔菌液体深层发酵产三萜化合物的影响 | 第72-73页 |
5.5 小结 | 第73-75页 |
第六章 总结与展望 | 第75-77页 |
6.1 总结 | 第75-76页 |
6.2 展望 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-83页 |
致谢 | 第83页 |