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液体发酵桦褐孔菌三萜类化合物对卵巢癌和肺癌细胞株的抑制作用研究

摘要第4-6页
abstract第6-7页
第一章 绪论第11-33页
    1.1 桦褐孔菌的研究现状第11-15页
        1.1.1 桦褐孔菌简介第11页
        1.1.2 桦褐孔菌的化学成分和药理学活性第11-14页
            1.1.2.1 抗氧化活性第11-12页
            1.1.2.2 抗突变活性第12页
            1.1.2.3 抗炎活性第12-13页
            1.1.2.4 抗糖尿病第13页
            1.1.2.5 抗菌第13页
            1.1.2.6 保肝第13-14页
            1.1.2.7 抗病毒第14页
        1.1.3 桦褐孔菌液体深层发酵第14-15页
    1.2 三萜类物质的研究进展第15-25页
        1.2.1 三萜化合物的化学结构第15-16页
        1.2.2 三萜化合物的生物活性第16-19页
            1.2.2.1 抑制肿瘤作用第16-17页
            1.2.2.2 抗氧化作用第17页
            1.2.2.3 抗病毒作用第17页
            1.2.2.4 抗糖尿病作用第17-18页
            1.2.2.5 护肝作用第18页
            1.2.2.6 抗菌作用第18-19页
            1.2.2.7 对免疫系统的作用第19页
        1.2.3 三萜化合物的提取第19-21页
            1.2.3.1 溶剂提取法第19-20页
            1.2.3.2 超声循环提取法第20页
            1.2.3.3 超临界流体萃取法第20-21页
            1.2.3.4 化学衍生法第21页
            1.2.3.5 半仿生提取法第21页
        1.2.4 三萜化合物的分离第21-24页
            1.2.4.1 凝胶色谱第22页
            1.2.4.2 反相硅胶柱色谱第22-23页
            1.2.4.3 大孔吸附树脂色谱第23页
            1.2.4.4 制备型/半制备型HPLC第23-24页
        1.2.5 三萜化合物的检测第24-25页
            1.2.5.1 分光光度法第24页
            1.2.5.3 气相色谱法(GC)第24-25页
            1.2.5.4 高效液相色谱法(HPLC)第25页
    1.3 三萜类化合物的抗肿瘤作用第25-31页
        1.3.1 细胞毒作用第25-26页
        1.3.2 促进细胞凋亡第26-29页
            1.3.2.1 引发线粒体功能障碍第26-27页
            1.3.2.2 调控凋亡相关蛋白第27-28页
            1.3.2.3 干预细胞信号传导通路第28-29页
        1.3.3 对细胞周期的阻滞作用第29页
        1.3.4 调节机体免疫功能第29-30页
        1.3.5 其他抗肿瘤机制第30-31页
    1.4 杜仲简介第31页
    1.5 本论文的主要研究内容第31-33页
第二章 桦褐孔菌三萜的发酵制备、提取分离第33-42页
    2.1 引言第33页
    2.2 实验材料第33-35页
        2.2.1 原始菌种第33页
        2.2.2 实验试剂第33-34页
        2.2.3 实验仪器及设备第34-35页
        2.2.4 培养基第35页
            2.2.4.1 活化培养基(MEA)第35页
            2.2.4.2 种子培养基第35页
            2.2.4.3 基础发酵培养基第35页
    2.3 实验方法第35-39页
        2.3.1 原始菌种的活化与培养第35-36页
        2.3.2 菌种保藏第36页
        2.3.3 桦褐孔菌的斜面平面扩大培养第36页
        2.3.4 基础培养基中桦褐孔菌发酵第36-37页
            2.3.4.1 液体种子的制备第36-37页
            2.3.4.2 桦褐孔菌液体深层发酵第37页
        2.3.5 桦褐孔菌菌丝体三萜化合物的提取和分离第37-38页
            2.3.5.1 桦褐孔菌菌丝体三萜化合物提取第37页
            2.3.5.2 桦褐孔菌菌丝体三萜化合物的分离第37-38页
        2.3.6 桦褐孔菌菌丝体干重和总三萜含量的测定第38-39页
    2.4 实验结果与讨论第39-41页
    2.5 小结第41-42页
第三章 桦褐孔菌粗三萜的抗癌活性第42-62页
    3.1 引言第42页
    3.2 实验材料第42-43页
        3.2.1 原始细胞株第42页
        3.2.2 实验试剂第42-43页
        3.2.3 实验仪器第43页
    3.3 实验方法第43-46页
        3.3.1 细胞复苏与传代第43-44页
            3.3.1.1 细胞复苏第43页
            3.3.1.2 细胞传代第43-44页
        3.3.2 细胞形态学观察第44页
        3.3.3 MTT法测定细胞存活率第44页
        3.3.4 细胞周期实验第44-45页
        3.3.5 细胞凋亡实验第45页
        3.3.6 统计学分析方法第45-46页
    3.5 结果与分析第46-59页
        3.5.1 细胞形态观察第46-47页
        3.5.2 MTT实验第47-56页
            3.5.2.1 粗三萜对癌细胞生长的影响第47-51页
            3.5.2.2 不同分部对癌细胞生长的影响第51-56页
        3.5.3 细胞周期实验第56-58页
        3.5.4 细胞凋亡实验第58-59页
    3.6 小结第59-61页
    3.7 讨论第61-62页
第四章 液体深层发酵桦褐孔菌三萜类成分分析第62-67页
    4.1 引言第62页
    4.2 实验材料第62-64页
        4.2.1 原始菌种第62页
        4.2.2 实验试剂第62-63页
        4.2.3 实验仪器第63-64页
        4.2.4 发酵培养基第64页
    4.3 试验方法第64页
        4.3.1 桦褐孔菌液体深层发酵第64页
        4.3.2 样品制备与HPLC分析第64页
    4.4 结果与讨论第64-66页
    4.5 小结与讨论第66-67页
第五章 杜仲对桦褐孔菌液体深层发酵产三萜化合物的作用第67-75页
    5.1 引言第67页
    5.2 实验材料第67-70页
        5.2.1 原始菌种第67-68页
        5.2.2 培养基第68页
            5.2.2.1 种子培养基第68页
            5.2.2.2 发酵培养基第68页
        5.2.3 实验试剂第68-69页
        5.2.4 实验仪器第69-70页
        5.2.5 杜仲皮和杜仲壳的处理第70页
    5.3 实验方法第70页
        5.3.1 含杜仲培养基中的桦褐孔菌发酵第70页
        5.3.2 桦褐孔菌菌丝体干重和总三萜含量的测定第70页
    5.4 结果与讨论第70-73页
        5.4.1 杜仲壳对桦褐孔菌液体深层发酵产三萜化合物的影响第70-72页
        5.4.2 杜仲皮对桦褐孔菌液体深层发酵产三萜化合物的影响第72-73页
    5.5 小结第73-75页
第六章 总结与展望第75-77页
    6.1 总结第75-76页
    6.2 展望第76-77页
参考文献第77-83页
致谢第83页

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