| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩写 | 第11-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-47页 |
| 1.1 钾在植物生长发育中的生理功能 | 第14-31页 |
| 1.1.1 钾在植物体内的分布 | 第14页 |
| 1.1.2 植物体内钾的生理功能 | 第14-17页 |
| 1.1.3 植物缺钾症状 | 第17-18页 |
| 1.1.4 植物中钾的吸收和转运机制 | 第18-28页 |
| 1.1.5 钾通道和钾转运体的调控机制 | 第28-31页 |
| 1.2 氮在植物生长发育中的生理功能 | 第31-40页 |
| 1.2.1 植物体内氮的生理功能 | 第31-32页 |
| 1.2.2 植物缺氮或氮肥过量的症状 | 第32页 |
| 1.2.3 植物中NO_3~-的吸收和转运机制 | 第32-40页 |
| 1.3 植物体内钾和氮吸收利用的相互影响 | 第40-41页 |
| 1.4 MYB转录因子对植物响应的调控 | 第41-45页 |
| 1.4.1 MYB转录因子的结构 | 第41-43页 |
| 1.4.2 MYB转录因子的功能 | 第43-45页 |
| 1.4.3 MYB59的研究进展 | 第45页 |
| 1.5 本研究工作的立题依据和意义 | 第45-47页 |
| 第二章 材料与方法 | 第47-84页 |
| 2.1 实验材料 | 第47-49页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第47页 |
| 2.1.2 常用菌株 | 第47页 |
| 2.1.3 常用载体 | 第47-48页 |
| 2.1.4 常用实验仪器 | 第48页 |
| 2.1.5 常用试剂 | 第48-49页 |
| 2.2 实验方法 | 第49-80页 |
| 2.2.1 拟南芥的培养与种植 | 第49-50页 |
| 2.2.2 遗传分析及图位克隆 | 第50-52页 |
| 2.2.3 T-DNA插入纯合突变体的鉴定 | 第52-56页 |
| 2.2.4 转基因材料的获得及筛选 | 第56-58页 |
| 2.2.5 K~+和NO_3~-含量的测定 | 第58-59页 |
| 2.2.6 ~(86)Rb~+同位素吸收实验 | 第59-60页 |
| 2.2.7 分子克隆与载体构建 | 第60-64页 |
| 2.2.8 目的基因转录水平表达分析 | 第64-67页 |
| 2.2.9 酵母相关实验方法 | 第67-69页 |
| 2.2.10 原核蛋白的诱导表达及纯化(His-tag融合蛋白) | 第69-70页 |
| 2.2.11 SDS-PAGE及Western Blot | 第70-73页 |
| 2.2.12 凝胶阻滞实验(EMSA) | 第73-76页 |
| 2.2.13 染色质免疫共沉淀实验(ChIP) | 第76-79页 |
| 2.2.14 半体内Cell-Free降解实验 | 第79-80页 |
| 2.3 实验所用引物 | 第80-84页 |
| 第三章 实验结果及分析 | 第84-117页 |
| 引言 | 第84页 |
| 3.1 lks3突变体具有低钾敏感表型 | 第84-86页 |
| 3.1.1 lks3突变体的获得及鉴定 | 第84-85页 |
| 3.1.2 lks3突变体K~+含量的测定 | 第85-86页 |
| 3.2 LKS3编码转录因子蛋白MYB59 | 第86-91页 |
| 3.2.1 基因At1g70390其它T-DNA插入突变体的鉴定与表型 | 第86页 |
| 3.2.2 基因At1g70390回补lks3材料的鉴定与表型 | 第86-87页 |
| 3.2.3 TAIL-PCR寻找引起lks3低钾敏感表型的目的基因 | 第87-88页 |
| 3.2.4 图位克隆寻找引起lks3低钾敏感表型的目的基因 | 第88-91页 |
| 3.3 MYB59参与拟南芥K~+和NO_3~-从根向冠的转运 | 第91-97页 |
| 3.3.1 myb59突变体及回补材料表型观察 | 第91-93页 |
| 3.3.2 myb59突变体及回补材料K~+含量及NO_3~-含量测定 | 第93-94页 |
| 3.3.3 myb59突变体及回补材料木质部伤流液中K~+含量及NO_3~-含量测定 | 第94-95页 |
| 3.3.4 myb59各转录本回补材料表型观察 | 第95-96页 |
| 3.3.5 MYB59特异地参与钾营养胁迫的调控过程 | 第96-97页 |
| 3.4 MYB59作为转录因子正向调控NRT1.5基因的表达 | 第97-103页 |
| 3.4.1 MYB59具有转录激活活性 | 第97-98页 |
| 3.4.2 myb59突变体及回补材料中NRT1.5基因的表达检测 | 第98-101页 |
| 3.4.3 MYB59和NRT1.5的表达部位部分重叠 | 第101页 |
| 3.4.4 观察pNRT1.5:GUS转基因材料组织染色的强弱 | 第101-102页 |
| 3.4.5 观察pNRT1.5:NRT1.5-GFP转基因材料GFP荧光的强弱 | 第102-103页 |
| 3.5 MYB59.3与NRT1.5的启动子直接结合 | 第103-106页 |
| 3.5.1 ChIP-qPCR实验验证MYB59.3在体内直接结合NRT1.5的启动子 | 第103-104页 |
| 3.5.2 EMSA实验验证MYB59.3在体外直接结合NRT1.5的启动子 | 第104-106页 |
| 3.6 NRT1.5是MYB59的遗传上位基因 | 第106-113页 |
| 3.6.1 myb59和nrt1.5突变体对低钾的敏感程度较为一致 | 第106-108页 |
| 3.6.2 MYB59和NRT1.5在低钾响应过程中处于同一通路 | 第108-111页 |
| 3.6.3 MYB59和NRT1.5的遗传关系研究 | 第111-113页 |
| 3.7 MYB59和NRT1.5对低钾的响应 | 第113-117页 |
| 3.7.1 MYB59总RNA和NRT1.5对低钾的响应 | 第113-114页 |
| 3.7.2 MYB59各转录本对低钾的响应 | 第114-115页 |
| 3.7.3 MYB59.3蛋白对低钾的响应 | 第115-117页 |
| 第四章 讨论 | 第117-120页 |
| 4.1 MYB59和NRT1.5在K~+/NO_3~-的转运过程中起着重要作用 | 第117-118页 |
| 4.2 MYB59存在可变剪切 | 第118-119页 |
| 4.3 MYB59存在转录后修饰 | 第119-120页 |
| 第五章 结论 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-142页 |
| 致谢 | 第142-144页 |
| 作者简历 | 第144页 |
